一、一氧化氮吸入对大鼠肝脏抗氧化能力的影响（论文文献综述）
徐旻霄[1]（2021）在《间歇运动对PM2.5暴露致Wistar大鼠心脏损伤的影响及其机制研究》文中提出研究背景空气污染作为全球性的公共卫生问题,对人类的生存产生极大的影响。空气颗粒物污染浓度越高,全因死亡率和其他相关疾病的发病率和死亡率也会随之增加。大量流行病学已经证实:室外空气污染物与心血管疾病（Cardiovascular Disease,CVD）发病率之间存在密切关系。全球范围内,空气污染导致因心血管疾病死亡的人数,是呼吸疾病的两倍。空气污染中,可吸入颗粒物PM2.5是诱导心血管损伤和疾病的主要原因。在心肌组织中线粒体含量十分丰富,为心脏活动提供能量,在可吸入颗粒物PM2.5暴露环境下,线粒体往往也是颗粒物攻击的目标之一。研究表明,很多心脏疾病的发生都与线粒体动力学平衡被破坏存在关联。因此根据已有的研究发现,可吸入颗粒物PM2.5诱导心血管损伤主要是通过氧化应激和线粒体动力学平衡被破坏造成的。长期规律性运动能够在细胞、组织、器官以及系统水平上提升机体的适应性表现。研究发现:长期规律性的运动可以有效提高心肌的收缩功能和舒张功能,增强心脏的做功能力。但是,运动诱导心血管系统获得的益处具有强度依赖性,即运动强度越大,获得健康效益也越大。间歇运动（Interval Traini ng,IT）源于间歇运动训练方案,是由高强度的运动负荷和低强度的恢复活动交替组合进行的运动模式。间歇运动由于其可调节的特点,有利于提高心脏功能,具有一定的心脏保护效益。有研究发现,在颗粒物污染暴露情况下从事运动锻炼活动,即运动复合颗粒物将会加剧颗粒物对机体的伤害,使运动中的机体面临更大的健康风险。研究发现,预运动能够改善颗粒物暴露所引起的心血管损伤。本研究通过间歇运动干预可吸入颗粒物PM2.5急性、亚急性暴露对心脏功能的影响,阐明间歇运动能否改善可吸入颗粒物PM2.5急性、亚急性暴露导致的心脏功能损伤,进一步深入探讨其内在机制。研究目的（1）阐明间歇运动干预对可吸入颗粒物PM2.5急性暴露心脏功能的保护作用;（2）探讨间歇运动干预对可吸入颗粒物PM2.5亚急性暴露心脏功能的保护作用及其可能的机制。研究方法研究一:（1）实验动物分组:将Wistar大鼠随机分成空白对照组（C）、低浓度暴露组（L）、中浓度暴露组（M）、高浓度暴露组（H）、间歇运动组（E）、运动干预低浓度暴露组（EL）、运动干预中浓度暴露组（EM）和运动干预高浓度暴露组（EH）;（2）运动干预:经过最大摄氧量测试,对所有运动组进行间歇运动干预（8周,5次/周,1小时/次）,高强度为40 m/min,低强度采用15 m/min;（3）可吸入颗粒物急性暴露:完成运动干预后,对不同浓度的暴露组分别进行相应浓度的急性颗粒物暴露,连续暴露6个小时,低浓度暴露组为55.5～150.4μg/m3,中浓度暴露组为150.5～250.4μg/m3,高浓度暴露组为250.5～500.4μg/m3;（4）实验指标检测:各组大鼠完成PM2.5暴露后,使用Vevo?2100高分辨率小动物超声成像系统测定Wistar大鼠左心室功能和形态。使用HE染色技术对大鼠心肌组织进行染色处理。制备大鼠心肌线粒体透射电镜切片,利用透射电子显微镜,观察心肌细胞和心肌线粒体的超微结构变化。检测心肌组织匀浆中氧化应激标志物的变化;（5）采用独立样本T检验对各组之间的指标变化进行分析。研究二:（1）实验动物分组:将Wistar大鼠随机分成空白对照组（C）,亚急性暴露组（P）,间歇运动组（E）和运动干预亚急性暴露组（EP）;（2）运动干预:经过最大摄氧量测试,对所有运动组进行间歇运动干预（与研究一方案相同）;（3）可吸入颗粒物亚急性暴露:完成运动干预后,进行可吸入颗粒物PM2.5亚急性暴露,连续暴露三周（21天）,每天暴露6小时,;（4）实验指标检测:各组Wistar大鼠完成PM2.5暴露后,利用Vevo?2100高分辨率小动物超声成像系统测定Wistar大鼠左心室功能和结构。使用HE染色技术对大鼠心肌组织进行染色处理,判断组织损伤情况。制备大鼠心肌线粒体透射电镜切片,利用透射电子显微镜,观察心肌细胞和心肌线粒体的超微结构变化。检测心肌线粒体融合/分裂蛋白（Mfn1/2、OPA1和Drp1）,以及心肌组织匀浆中ERK1/2-JNK-P53信号通路蛋白的表达变化;（5）采用独立样本T检验对各组之间的指标变化进行分析。研究结果研究一:（1）急性暴露浓度:在可吸入颗粒物PM2.5不同浓度急性暴露研究中,低、中、高浓度暴露的平均浓度分别为149.16±30.88μg/m3、269.31±30.79μg/m3和509.84±36.74μg/m3;（2）左心室功能和结构:高浓度暴露组与空白对照组相比,Wistar大鼠左心室的E/A、SR和S非常显着增加（p<0.01）,Decel显着增加（p<0.05）,E/SR显非常着降低（p<0.01）。与中浓度暴露组相比,运动干预中浓度暴露组中Wistar大鼠左心室的S、LVIDd和LVVold显着增加（p<0.05）,E/A和E显着降低（p<0.05）。与高浓度暴露组相比,运动干预高浓度暴露组中Wistar大鼠左心室的S、LVIDd和LVVold非常显着增加（p<0.01）,SV显着增加（p<0.05）E/A和E非常显着降低（p<0.01）;（3）HE染色和超微结构:随着暴露剂量的增加,心肌炎症及心肌细胞与心肌线粒体及肌丝损伤程度有加重的变化规律,运动干预可以缓解心肌炎症及心肌细胞与心肌线粒体及肌丝损伤程度的加重;（4）氧化应激标志物:高浓度暴露组与空白对照组相比,Wistar大鼠心肌组织匀浆中的SOD活性非常显着降低（p<0.01）,GSH-Px活性显着降低（p<0.05）。运动干预高浓度暴露组与高浓度暴露组相比,Wistar大鼠心肌组织匀浆中的LPO浓度显着降低（p<0.05）。研究二:（1）亚急性暴露浓度:在可吸入颗粒物PM2.5亚急性暴露研究中,暴露期间的平均浓度为233.63±201.47μg/m3;（2）左心室功能和结构:亚急性暴露组与空白对照组相比,Wistar大鼠左心室的S非常显着增加（p<0.01）,A和EF显着降低（p<0.05）。间歇运动组与空白对照组相比,Wistar大鼠左心室的显着增加,S非常显着降低（p<0.01）。与亚急性暴露组相比,运动干预亚急性暴露组中Wistar大鼠左心室的EF和LVPWd显着增加（p<0.05）,S非常显着降低（p<0.01）;（3）H E染色和超微结构:在可吸入颗粒物PM2.5亚急性暴露后,可以导致心肌细胞与心肌线粒体及肌丝损伤,运动干预则可以缓解由于可吸入颗粒物PM2.5亚急性暴露后诱导的心肌细胞与心肌线粒体及肌丝的损伤;（4）线粒体融合分裂蛋白:亚急性暴露组与空白对照组相比,Wistar大鼠心肌组织中线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2和OPA1显着降低（p<0.05）。与亚急性暴露组相比,运动干预亚急性暴露组中Wistar大鼠心肌组织中线粒体融合蛋白Mfn2和OPA1显着升高（p<0.05）,Mfn1升高（p>0.05,ES=1.3）。（5）信号通路指标:亚急性暴露组与空白对照组相比,Wistar大鼠心肌组织中p ERK1/2、RERK1/2、p JNK1/2非常显着增加（p<0.01）,p53增加（ES=0.21）。与亚急性暴露组相比,运动干预亚急性暴露组中Wi star大鼠心肌组织中p ERK1/2和p JNK1/2显着降低（p<0.05）,RERK 1/2非常显着降低（p<0.01）,P53降低（p>0.05,ES=0.29）。研究结论（1）8周间歇运动可以改善PM2.5急性暴露致心肌组织和线粒体的损伤情况,促进心脏舒张功能损伤的缓解,尤其是在中浓度和高浓度组中改善效果明显,这可能与运动缓解炎症和增强机体抗氧化能力有关。（2）3周PM2.5亚急性暴露导致左心室舒张收缩功能下降,心肌组织和线粒体受损,8周间歇运动可以有效缓解PM2.5亚急性暴露所造成的心脏结构和功能的损伤。（3）3周PM2.5亚急性暴露可能通过ERK1/2-JNK-P53的信号通路参与PGC-1α调控线粒体的融合/分裂,8周间歇运动可以有效降低PM2.5亚急性暴露所引起的ERK1/2-JNK-P53信号通路激活状态,增加PG C-1α的含量,促进线粒体融合蛋白表达的增加,降低线粒体的损伤程度。
万函[2]（2021）在《参附注射液调节NOS/NO信号通路保护LPS损伤的脐静脉血管内皮细胞的作用及机制》文中研究表明研究背景和目的:血栓闭塞性脉管炎（thromboangiitis obliterans,TAO）,又称为Buerger病（Buerger’s disease）,以侵犯四肢中小动静脉为主并呈现出节段性、闭塞性、血栓性、炎症性的非动脉粥样性疾病。其症状主要表现为间歇性跛行、静息痛、缺血性溃疡、化脓、雷诺氏症和坏疽等,若得不到及时治疗或治疗不当,病人就有截肢和死亡的危险。TAO发病机理至今尚未完全阐明,还没有哪一种观点可以解释TAO的所有临床表现。中、西医均认为该病与血管内皮细胞（Vascular endothelial cell,VEC）的损伤有密切关系。深入研究血栓闭塞性脉管炎的治疗对策是目前临床研究的重要课题,而中医在本病的治疗上取得了显着成绩,中西医结合治疗可以明显改善本病治愈率、并降低复发率。过氧化是引起VEC凋亡的主要因素之一,损伤后的VEC形态及功能均发生改变,是促进TAO血管内血栓形成的重要原因。脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）是革兰阴性杆菌细胞壁的主要组成部分,常被作为一种刺激物来诱导内皮细胞损伤。目前国内外尚无有效治疗方法从根本上治愈该病,针对TAO可能的发病机制,临床上多采取对症治疗减轻患者病痛。参附注射液（Shenfu injection,SFI）是由红参、附子经现代工艺研制而成的中药注射剂,主要成份包括人参皂苷和乌头类生物碱。中医认为SFI具有回阳救逆、益气摄血的功效,我们前期研究发现SFI可能通过其加强对血小板聚集的抑制作用,提高血管的抗血栓功能,减少TAO模型大鼠血栓形成,以及改善其病变体征。一氧化氮（Nitric oxide,NO）是一种旁分泌因子,可影响血管张力和血小板功能,防止白细胞粘附并减少内膜增生。本课题拟在前期实验的基础上,基于NOS/NO信号通路,采用LPS诱导原代培养HUVECs的离体TAO模型,进一步探索SFI抗血栓闭塞性脉管炎的作用及其机制。方法:1.原代HUVEC的获取、培养、传代、冻存及鉴定。2.MTT法检测筛选不同浓度LPS对HUVEC损伤程度,确定LPS诱导HUVEC损伤的合适浓度。3.MTT法检测不同浓度SFI对LPS损伤HUVEC生长的影响,确定实验分组。4.Griess法检测HUVEC上清液中NO含量检测,Q-PCR检测SFI对LPS诱导的HUVEC中e NOS、i NOS的m RNA表达的影响。5.通过流式细胞仪检测SFI对LPS诱导的HUVEC细胞凋亡的影响。6.在荧光显微镜下,RH-123染色法测定HUVEC的线粒体膜电位水平,DHE染色评价HUVEC细胞活性氧水平。结果:1.从脐带分离出来的HUVEC最初为圆形或椭圆形,1d后可融合成疏松的单层细胞,贴壁生长,常为多角形及短梭形;6d后可完全融合成连续的细胞单层,为扁平、多角形或梭形,胞核明显,细胞呈鹅卵石样镶嵌排列,边界清楚,无重叠生长现象。2.不同浓度（0—100g/ml）的LPS孵育HUVEC 24小时,结果显示LPS可引起VEC死亡,10?g/ml LPS可使细胞存活率降至56.13%,其后随浓度增加,细胞生存率降低不明显,因此我们选定10?g/ml的LPS诱导VEC损伤模型。3.与对照组相比,LPS模型组的细胞存活率明显偏低（P<0.001）。与LPS模型组相比,随着SFI剂量的增加,细胞存活率明显提高（P<0.05）。4.与对照组相比,LPS模型中NO含量明显增加（P<0.01）;与LPS模型组相比,各剂量SFI组,HUVEC上清液中NO含量显着减低,差异有统计学意义（P<0.05）。5.与对照组相比,LPS模型组e NOS的m RNA表达明显降低（P<0.01）;与LPS模型组相比,SFI低、中、高剂量组e NOS的m RNA表达显着增加（P<0.05或P<0.01）,而且随着SFI剂量增多,e NOS的m RNA表达上调的也越明显。6.与对照组相比,LPS模型组i NOS的m RNA表达明显增加（P<0.01）;与LPS模型组相比,SFI低、中、高剂量组i NOS的m RNA表达显着降低（P<0.05或P<0.01）,而且随着SFI剂量增多,i NOS表达下调的也越明显。7.散点图结果显示,对照组见少量损伤或早期凋亡细胞,与对照组相比,LPS模型组见大量早期凋亡细胞（Q4）及少量晚期凋亡细胞（Q2）（P<0.01）;被低、中、高剂量的SFI预处理后的凋亡率明显降低,较LPS模型组显着降低（P<0.01或P<0.05）,其中,中剂量组SFI预处理后凋亡率最低。表明SFI明显抑制了LPS对HUVEC的损伤作用,降低了HUVEC细胞凋亡率。8.与对照组相比,LPS模型组黄绿色荧光增强,提示大量细胞发生凋亡。与LPS模型组相比,低、中和高剂量SFI预处理后黄绿色荧光减弱,提示细胞凋亡数量明显减少,其中,中剂量SFI预处理后,黄绿色荧光最弱,提示细胞凋亡的数量最少。9.与对照组相比,LPS模型组的红色荧光较强,提示细胞活性氧水平明显偏高。与LPS模型组相比,低、中和高剂量SFI预处理后红色荧光变弱,显示SFI降低了细胞活性氧的水平。而且,随着SFI剂量的增多,HUVEC细胞活性氧水平反而降低。结论:1.SFI预处理明显抑制LPS诱导的HUVEC的损伤、提高其存活率,表明参附注射液对LPS诱导损伤的HUVEC有保护作用。2.SFI减少LPS诱导的HUVEC上清液中NO的含量、降低其活性氧水平,以及抑制细胞凋亡,显示参附注射液对LPS诱导损伤的HUVEC保护作用可能与其调节NO含量、减少氧化应激和抑制细胞凋亡有关。3.SFI上调e NOS的m RNA表达、下调i NOS的m RNA表达,提示SFI可能经NOS/NO信号通路使NO含量保持合适的浓度从而产生对LPS诱导损伤的HUVEC的保护作用。
南博[3]（2021）在《大蒜素调控氧化应激及内质网应激改善膳食丙烯酰胺肝毒性机制研究》文中研究表明本研究受国家自然科学基金面上项目（31571939）资助。丙烯酰胺（Acrylamide,AA）作为食品热加工过程中美拉德反应的重要产物,具有生殖毒性、神经毒性、肝毒性和潜在的致癌性等,因此通过膳食摄入AA的安全性问题引起广泛关注。研究发现,AA毒性的发生与氧化应激（Oxidative stress,OS）和内质网应激（Endoplasmic reticulum stress,ERS）密切相关,但其潜在机制仍处于探究阶段。OS和ERS可参与调控NLRP3（NOD-like receptor protein-3,NLRP3）炎性小体的激活,而MAPK（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）和NF-κB（Nuclear factor kappa-B,NF-κB）信号通路在调节炎症反应的过程中也发挥了至关重要的作用。探究MAPK和NF-κB信号通路参与AA诱导OS和ERS的过程不仅可以对AA的毒性机制进行补充,也可以进一步完善OS和ERS诱导生命过程紊乱的潜在机制。生物活性成分在调节机体炎症反应上一直受到广泛关注,大蒜素（Allicin）作为大蒜的主要活性物质,具有抗氧化、抑菌及抗炎等生理功能,在AA毒性干预上表现了突出的作用。因此,本研究旨在探究AA诱导OS、ERS和MAPK信号通路激活与NLRP3炎性小体激活、炎症反应之间的相互关系,并在此基础上,通过Allicin干预处理,进一步阐明Allicin保护AA所致机体损伤的潜在机制。主要研究内容与结果如下:（1）利用大鼠肝脏巨噬细胞Kupffer细胞和人肝癌细胞HepG2细胞构建细胞模型,探讨AA对Kupffer和HepG2细胞NLRP3炎性小体激活的影响。将Kupffer和HepG2细胞进行1m M AA诱导处理,首先,通过对超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）酶活性和活性氧（Reactive oxygen species,ROS）释放水平检测,以及ERS标志性蛋白-葡萄糖调节蛋白78（Glucose regulated protein 78 k D,GRP78）和C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）的检测,确定AA可以诱导细胞OS和ERS。其次,通过基因和蛋白水平的检测,发现AA可以激活MAPK和NF-κB信号通路以及NLRP3炎性小体。此外,以ELISA酶联免疫法检测细胞炎症因子白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）和白细胞介素-18（Interleukin-18,IL-18）释放水平,也补充说明了AA促进Kupffer和HepG2细胞炎症因子的释放,诱发炎症反应。在此基础上,分别利用ROS清除剂、内质网应激抑制剂以及MAPK选择性抑制剂预处理Kupffer和HepG2细胞,进一步明确OS、ERS和MAPK信号通路三者在参与调节AA诱导Kupffer和HepG2细胞NLRP3炎性小体的激活过程中的主要作用。研究发现,AA通过OS/ERS-MAPK-NLRP3信号通路激活NLRP3炎性小体,诱导炎症反应。（2）利用Allicin对AA的毒性进行干预,研究Allicin对AA诱导的Kupffer和HepG2细胞NLRP3炎性小体激活及炎症反应的影响及调控机制。以3.75、7.5和15μM Allicin干预处理1 m M AA诱导的Kupffer和HepG2细胞,首先,对SOD、GSH-Px酶活性和ROS释放水平以及GRP78、CHOP的mRNA和蛋白表达的检测证明Allicin缓解AA诱导的Kupffer和HepG2细胞OS和ERS。其次,对未折叠蛋白反应（Unfolded protein response,UPR）分支的需肌醇酶1（Inositol-requiring enzyme 1,IRE1）通路、MAPK和NF-κB信号通路节点蛋白进行检测,发现Allicin抑制IRE1α、凋亡信号调节激酶1（Apoptosis signal regulating kinase-1,ASK1）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、丝/苏氨酸蛋白激酶（Extracellular regulated protein kinases,ERK）、p38丝裂原激活蛋白激酶（p38 mitogen activited protein kinase,p38 MAPK）和核转录因子p65（p65 NF-k B）蛋白磷酸化及肿瘤坏死因子受体相关因子2（TNF receptor-associated factor 2,TRAF2）和X盒结合蛋白1（X-box binding protein1,XBP1）蛋白的表达水平,从而减少信号通路的激活,抑制AA诱导的NLRP3炎性小体的激活。研究发现,Allicin通过OS/ERS-MAPK-NLRP3信号通路抑制AA诱导的Kupffer和HepG2细胞NLRP3炎性小体激活,减轻AA诱发的毒性作用。（3）建立AA染毒和大蒜素干预的SD（Sprague Dawley,SD）大鼠模型,通过体内实验深入研究AA诱导NLRP3炎性小体激活的潜在机制及Allicin对AA诱导炎症反应的调控影响。体外实验初步明确了AA诱导NLRP3炎性小体激活及Allicin缓解AA诱导炎症反应的潜在机制。因此,Allicin缓解AA对SD大鼠肝脏和脾脏损伤的研究,可对其潜在机制进行进一步明确和完善。分别构建SD大鼠AA（30 mg/kg）染毒模型和Allicin（25 mg/kg和50 mg/kg）保护模型,肝脏与脾脏形态学观察证明SD大鼠AA染毒模型构建成功。对OS指标、ERS标志蛋白和炎症指标进行测定,发现SOD、ROS、GRP78、CHOP以及IL-1β和IL-18等水平与体外实验结果一致。此外,MAPK和NF-κB信号通路相关蛋白表达水平的检测结果表明,AA通过激活MAPK和NF-κB信号通路,诱导大鼠肝脏和脾脏NLRP3炎性小体的激活,进一步产生炎症反应,而Allicin对这一过程具有潜在的调节作用。综上所述,AA通过诱导OS和ERS激活MAPK信号通路,而MAPK信号通路的激活是NLRP3炎性小体激活的关键,NLRP3炎性小体的激活会进一步引发炎症反应,Allicin则可以通过调控OS和ERS调节MAPK信号通路的激活,抑制机体炎症的产生,从而抑制AA的毒性作用。因此,Allicin通过OS/ERS-MAPK-NLRP3信号通路抑制AA诱导的NLRP3炎性小体激活,缓解AA的毒性作用。
蒋志明[4]（2021）在《不同浓度艾烟环境对大鼠鼻粘膜OMP、iNOS蛋白表达及嗅觉功能的影响》文中认为目的:探讨不同浓度艾烟环境对机体嗅觉功能的影响,为临床施灸中产生的艾烟安全性提供评价依据。方法:1依据课题组先期测量艾灸诊室的艾烟浓度,以艾烟中PM2.5的含量为测量标准合理划分艾烟浓度,以此划分高、中、低艾烟浓度环境。将成年SD大鼠随机划分为正常对照组（正常组）、低浓度艾烟组（低烟组）、中浓度艾烟组（中烟组）、高浓度艾烟组（高烟组）。2随后将各浓度艾烟组大鼠进行持续90d,每日2次、每次4h的艾烟环境干预,持续90天,正常对照组不进行干预。通过双瓶实验、寻找食物小球实验对大鼠进行行为学观察;取大鼠血清、鼻粘膜组织,采用HE染色、TUNEL检测各组大鼠鼻粘膜病理损伤,ELISA检测大鼠血清、鼻粘膜中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量并统计三者之间的相关性;应用免疫组化法检测OMP阳性细胞表达情况;用Real-time PCR、免疫印迹法检测OMP、iNOS mRNA、蛋白的表达。3结束后取大鼠血清、鼻粘膜组织,采用HE染色、TUNEL检测各组大鼠鼻粘膜病理损伤;ELISA检测大鼠血清、鼻粘膜中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量并统计三者之间的相关性;应用免疫组化法检测OMP阳性细胞表达情况;分别使用Real-time PCR、免疫印迹法检测OMP、iNOS mRNA、蛋白的表达。结果:1各组大鼠行为学表现。通过比较各组大鼠行为变化,我们发现正常组与低烟组无统计学意义（P>0.05）,中烟组、高烟组与正常组、低烟组均存在差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。2鼻粘膜形态学变化。HE染色结果显示正常组大鼠鼻粘膜结构层次清除、排列整齐、表面有纤毛覆盖、粘膜下未见炎性细胞、低烟组较正常组粘膜下可见少量炎性细胞、中烟组大鼠鼻粘膜结构层次不清、排列较为紊乱、粘膜下有较多炎性细胞浸润;高烟组大鼠鼻粘膜结构层次不清、排列紊乱、坏死、粘膜下有大量炎性细胞浸润。TUNEL检测显示各组大鼠鼻粘膜凋亡细胞发现,随艾烟浓度升高大鼠鼻粘膜凋亡细胞也显着增加,中、高烟组大鼠鼻粘膜凋亡细胞较正常组低烟组显着增多（P<0.01）,高烟组较中烟组差异亦有统计学意义（P<0.01）。3通过ELISA检测显示各艾烟组大鼠血清、鼻粘膜中IL-1β、IL-6、TNF-α炎性因子含量较正常组均有明显增多（P<0.01）,其炎性因子含量随艾烟浓度升高而呈上升趋势且二者间具有显着相关性（P<0.001）。在免疫组化法检测各组大鼠鼻粘膜上OMP阳性细胞表达显示低烟组较正常组OMP表达量下降（P<0.05）。中烟组、高烟组较低烟组亦显着降低（P<0.01）,中烟组与高烟组无显着差异（P>0.05）,Real-time PCR、免疫印迹法检测OMP、iNOS mRNA的表达发现正常组、低烟组、中烟组、高烟组OMP mRNA与蛋白表达随艾烟浓度增加呈下降趋势且各组间存在显着差异（P<0.01）,而iNOS mRNA与蛋白的表达随艾烟浓度增加呈上升趋势且各组之间亦存在显着学差异（P<0.01）。结论:1长期低浓度艾烟环境不会导致机体鼻粘膜产生明显的病理改变,中、高浓度艾烟环境会引起机体炎性反应及鼻粘膜病理改变。2长期低浓度艾烟环境不会对机体嗅觉灵敏度产生明显的影响,中、高浓度艾烟环境会损伤机体嗅觉灵敏度。
姚琴[5]（2020）在《不同处理方式艾燃烧生成物调控ApoE-/-小鼠的血管内皮功能和机制研究》文中研究表明背景:艾燃烧生成物（Moxa Combustion Products,MCP）的效用是艾灸的作用机理之一,MCP是指在艾绒燃烧过程生成的产物,艾烟是其最主要的部分。MCP中含有一定量的颗粒物（Particulate Matter,PM）,研究显示艾灸诊室PM10平均质量浓度为3.54mg/m3,超过医院候诊室卫生标准（GB9671-1996）中规定的最高限值（0.15 mg/m3）;尤其是MCP的颗粒物中存在一定比例PM2.5,引发关注和担忧;而目前MCP中的颗粒物是否是艾灸疗效的关键因素未有研究。近年来,医疗市场也出现了以艾叶精油穴位涂抹、艾绒穴位热熨、艾烟滤过等艾烟的处理和替代方法甚至医疗设备。针对此,我们根据艾绒燃烧过程的不同阶段,提取各阶段的MCP产物,探索艾灸的关键起效环节,并研究艾烟中的颗粒物是否是艾灸疗效的关键因素。动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是心脑血管疾病的主要病理基础。内皮功能障碍（Endothelial Cell Dysfunction,ECD）是AS发病的始动环节,也是影响AS疾病进展的关键因素。一氧化氮（Nitric Oxide,NO）是ECD过程中最重要的血管活性物质,NO的合成受活化的内皮型一氧化氮合酶（Endothelial Nitric Oxide Synthase,eNOS）调控。研究显示,艾灸和艾烟可调节NO/ET-1平衡、PGI2/TXA2平衡,纠正血液流变的异常,改善内皮细胞功能,以减轻AS病变程度。因此,开展以eNOS活化调控AS的研究对于探寻中医艾灸治疗机理很有必要。课题组前期开展了艾灸和艾烟干预载脂蛋白E基因敲除（ApolipoproteinEknockout,ApoE-/-）小鼠的研究,显示出可通过良性调节脂质代谢、减轻炎症反应及内皮损伤等效应防治AS。目的:观察不同处理方式MCP（艾烟、滤过艾烟、艾绒挥发物及艾叶精油）对AS的作用,从eNOS活化相关信号通路观察其对血管内皮功能的影响,探索艾灸干预AS的起效环节及作用机制,并探讨MCP中的颗粒物是否艾灸起效的关键成分。方法:将60只雄性8周龄ApoE-/-小鼠随机均分为5组:艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组、艾叶精油组、模型组,12只同龄雄性C57BL/6小鼠作为正常对照。正常组、模型组小鼠常规抓取、固定;艾烟组小鼠暴露于2%浓度（以染毒柜遮光率度量）艾烟环境,每次约燃烧1.5 g艾绒;滤过艾烟组小鼠暴露于1.5 g艾绒点燃滤过后的艾烟环境;艾绒挥发组小鼠暴露于1.5g艾绒在150℃加热条件下的挥发物环境;艾叶精油组小鼠置暴露在3.75μL艾叶精油（1.5 g艾绒所含挥发油含量折合）加入16 mL蒸馏水雾化形成的环境中。所有干预均在染毒柜中进行,20 min/日,6日/周,连续干预14周。生化法检测血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C、NO的含量;Elisa法测定血浆ox-LDL、ApoA-I、ET-1、PGI2、TXA2、VEGF、vWF的含量;HE染色、油红“O”染色观察主动脉根、胸主动脉病理改变;Western blot法检测主动脉组织中AMPK、PI3K、AKT和eNOS 蛋白的表达及磷酸化蛋白 p-AMPK、p-PI3K、p-AKT、p-eNOS-Thr495、p-eNOS-Ser1177蛋白表达情况;RT-PCR法检测主动脉Ampk-mRNA、Pi3k-mRNA、Akt-mRNA和eNos-mRNA表达情况。结果:1.脂质代谢水平模型组小鼠血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C、ox-LDL含量均显着高于正常组（P<0.01或P<0.05）,血浆APOA-I含量与正常组无显着差异（P>0.05）。艾烟组小鼠血浆TC、TG、LDL-C、ox-LDL含量显着低于模型组（P<0.01或P<0.05）,HDL-C含量显着高于模型组（P<0.01）,ApoA-I含量与模型组无显着差异（P>0.05）。滤过艾烟组小鼠血浆TC、TG、LDL-C含量显着低于模型组（P<0.01或P<0.05）,HDL-C含量显着高于模型组（P<0.01）,ApoA-I、ox-LDL含量与模型组无显着差异（P>0.05）。艾绒挥发组小鼠血浆TC含量显着低于模型组（P<0.01）,TG、HDL-C、LDL-C、ApoA-I、ox-LDL含量与模型组无显着差异（P>0.05）。艾叶精油组小鼠血浆TC、TG、HDL-C、LDL-C、ox-LDL、ApoA-I含量与模型组无显着差异（P>0.05）。MCP各组组间比较,艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组、艾叶精油组对降低血浆TC水平效果依次下降,组间比较均有统计学差异。除TC外,艾烟组与滤过艾烟组对于调节其他各项血脂水平方面无显着性差异;艾烟组、滤过艾烟组对于降低血浆TG、HDL-C水平显着优于艾叶精油组;艾烟组对于降低血浆LDL-C水平显着优于艾绒挥发组、艾叶精油组;艾烟组对于降低血浆ox-LDL水平显着优于艾叶精油组。2.主动脉病理正常组小鼠未见明显异常;模型组小鼠可见明显的AS病理改变（AS斑块形成）;艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组较模型组明显改善（AS斑块程度减轻）,艾叶精油组较模型组未见明显改善（AS斑块形成）。3.血管内皮功能模型组小鼠血浆NO、NO/ET-1、PGI2水平显着低于正常组（P<0.01或P<0.05）,血浆ET-1、TXA2、TXA2/PGI2（T/P）水平显着高于正常组（P<0.01或P<0.05）,血浆VEGF、vWF与正常组无显着差异（P>0.05）。艾烟组小鼠血浆NO、PGI2、NO/ET-1水平显着高于模型组（P<0.01）,血浆ET-1含量、T/P显着低于模型组（P<0.01）,TXA2、VEGF、vWF含量与模型组无显着差异（P>0.05）。滤过艾烟组小鼠血浆NO、NO/ET-1水平显着高于模型组（P<0.05）,ET-1含量、T/P显着低于模型组（P<0.01）,TXA2、PGI2、VEGF、vWF含量与模型组无显着差异（P>0.05）。艾绒挥发组小鼠血浆NO、NO/ET-1水平显着高于模型组（P<0.05）,小鼠血浆ET-1含量、T/P显着低于模型组（P<0.01,P<0.05）,TXA2、PGI2、VEGF、vWF含量与模型组无显着差异（P>0.05）。艾叶精油组小鼠血浆PGI2含量显着高于模型组（P<0.05）,血浆T/P 比值显着低于模型组（P<0.01）,血浆NO、ET-1、NO/ET-1、TXA2、VEGF、vWF与模型组无显着差异（P>0.05）。MCP各组组间比较,艾烟组升高NO显着优于艾叶精油组,滤过艾烟组、艾绒挥发组ET-1显着低于艾叶精油组,艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组升高NO/ET-1显着优于艾叶精油组,艾烟组升高PGI2显着优于滤过艾烟组、艾绒挥发组,艾烟组T/P 比值显着低于艾绒挥发组,TXA2、VEGF、vWF组间比较均无显着性差异。4.eNOS活化相关信号通路模型组的主动脉p-AKT蛋白、p-AKT/AKT 比值均显着高于正常组（P<0.01）,主动脉p-eNOS-Ser1177 蛋白、p-eNOS-Ser1177/eNOS 比值、p-AMPK 蛋白、p-AMPK/AMPK比值、p-PI3K 蛋白、p-PI3K/PI3K 比值、Ampk-mRNA、PI3K-mRNA、eNos-mRNA均显着低于正常组（P<0.01或P<0.05）。艾烟组的主动脉p-eNOS-Thr1177 蛋白、p-eNOS-Thr1177/eNOS 比值、p-AMPK 蛋白、p-AMPK/AMPK比值、Ampk-mRNA、eNos-mRNA均显着高于模型组（P<0.01）,主动脉p-eNOS-Thr495 蛋白、p-eNOS-Thr495/eNOS 比值、p-AKT 蛋白、p-AKT/AKT 比值均显着低于模型组（P<0.01）。滤过艾烟组的主动脉p-eNOS-Thr1177 蛋白、p-eNOS-Thr1177/eNOS 比值、p-AMPK蛋白、p-AMPK/AMPK比值、Ampk-mRNA、eNos-mRNA均显着高于模型组（P<0.01或P<0.05）,主动脉 p-eNOS-Thr495 蛋白、p-eNOS-Thr495/eNOS 比值、p-AKT 蛋白、p-AKT/AKT比值均显着低于模型组（P<0.01）。艾绒挥发组的主动脉Ampk-mRNA、eNos-mRNA均显着高于模型组（P<0.05）,主动脉主动脉 p-eNOS-Thr495 蛋白、p-eNOS-Thr495/eNOS 比值、p-eNOS-Thr1177 蛋白、p-eNOS-Thr1177/eNOS 比值、p-AKT蛋白、p-AKT/AKT 比值均显着低于模型组（P<0.01 或P<0.05）。艾叶精油组的主动脉 p-eNOS-Thr495 蛋白、p-eNOS-Thr495/eNOS 比值、p-eNOS-Thr1177蛋白、p-AKT蛋白、p-AKT/AKT比值均显着低于模型组（P<0.01或P<0.05）。结论:1.艾烟、滤过艾烟可以良性调节脂质代谢、改善内皮细胞功能,从而减缓AS的进展,且二者疗效相当;即艾烟中的颗粒物在此过程中无显着作用,可能并不是艾灸起效的关键成分。2.与艾烟比较,一定浓度的艾绒挥发物、艾叶精油对于调节脂质代谢、减轻主动脉病变、改善内皮功能疗效欠佳;即艾绒的燃烧可能是艾灸起效的关键环节。3.艾烟、滤过艾烟通过激活AMPK蛋白的磷酸化,促进eNOS蛋白的Ser1177位点磷酸化及Thr495位点去磷酸化,提升NO水平以调节血管活性,可能是艾烟及滤过艾烟改善内皮功能的机制之一。
姚鸿州[6]（2019）在《三种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂对斑马鱼的毒性效应研究》文中进行了进一步梳理农药对社会发展的重要性显而易见。近年来杀菌剂,尤其是新型琥珀酸脱氢酶抑制剂（SDHI）类杀菌剂获得快速发展。杀菌剂在长期使用后可能有残留物迁移到水体环境,有必要就其对水生生物的潜在风险进行研究。SDHI类杀菌剂对鱼类具有潜在的毒性,然而关于苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对水生生物的毒性效应和机制的信息还很有限。鉴于此,本文通过应用斑马鱼胚胎和成鱼作为模式生物开展SDHI类杀菌剂苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺的水生生物毒性实验,探讨它们对非靶标生物斑马鱼的潜在毒性和作用机制。（1）通过96小时急性暴露试验,揭示这三种杀菌剂导致斑马鱼胚胎产生形态变化,孵化失败和死亡。苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对胚胎孵化抑制的96小时半数效应浓度值分别是0.039,0.21和3.41 mg/L,对胚胎的96小时半数致死浓度值分别是0.041,0.24和3.69 mg/L。（2）通过急性发育毒性试验,揭示苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对斑马鱼胚胎发育的多个方面造成影响。（1）干扰胚胎发育相关基因bmp2b,gh1,ghra和igf1的表达,导致仔鱼体长较短。（2）干扰仔鱼ATP,NO,NOS,CaN,AChE和EPI,影响胚胎的自主运动和仔鱼的自由运动。（3）干扰心脏发育相关基因cyp26a1和myh7的表达,扰乱心跳速率。（4）干扰仔鱼细胞凋亡相关基因apaf1,baxa,bbc3,bcl2a,casp3a,caspb和tp53,诱导细胞凋亡。（5）影响仔鱼中抗氧化标志物CAT,GST,POD和SOD的活性以及GSH含量,引起ROS和MDA含量增加。（6）抑制仔鱼中SDH活性。（7）对仔鱼中T4和T3含量产生干扰。（8）干扰仔鱼先天免疫相关基因ccl34a.4,cxcl18b,ifnphi1,il6,il6r,loxa,nos2a和tnfa的表达。（3）通过对成年斑马鱼的4天急性毒性试验和7天暴露后检测氧化应激相关指示物,探讨这三种杀菌剂急性暴露对成鱼生存和氧化应激的影响。（1）急性暴露影响成鱼的形态和运动,苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对成鱼的96小时半数致死浓度值分别为0.065,0.33和2.60 mg/L。（2）7天毒性暴露影响成鱼中抗氧化标志物CAT,GST,POD和SOD的活性以及GSH的含量,引起MDA含量增加。（4）通过对成年雌性斑马鱼的30天慢性暴露试验,探讨这三种杀菌剂对雌鱼的慢性毒性效应。试验表明苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺的30天暴露对成年雌鱼的氧化应激,内分泌,神经系统,能量代谢和肠道组织形态造成影响。（1）影响雌鱼中抗氧化标志物CAT,GST,POD和SOD的活性以及GSH含量,引起MDA含量增加。（2）引起T4含量升高,T3含量下降。（3）导致T,E2含量下降。（4）诱导NO,NOS,CaN和EPI增加,抑制ATP和AChE活性。（5）抑制SDH活性。（6）引起肠道绒毛损伤。综上,SDHI类杀菌剂苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对斑马鱼胚胎和成鱼均表现出毒性。在本文中其毒性主要表现为急性致死、发育抑制、诱导氧化应激、神经毒性、内分泌干扰和肠道损伤等。因此,这类杀菌剂对水生生物的潜在毒性可能通过多种途径表现出来,它们对水生生物的潜在影响值得进行更深入的研究。
田一航[7]（2019）在《出生体重对仔猪免疫功能的影响及精氨酸的营养效应研究》文中提出生产上,母猪窝产仔数的增加通常伴随着低出生体重（Low birth weight,LBW）仔猪数量的增加。与正常出生体重（Normal birth weight,NBW）仔猪相比,LBW仔猪断奶前死亡率高,生长性能降低。因此本文首先探究LBW对新生（0日龄）和断奶前后（21和24日龄）仔猪免疫功能和抗氧化能力的影响,然后在饲粮中添加精氨酸（Arginine,Arg）,探究其对LBW仔猪的营养效应,为改善LBW仔猪健康提供思路。试验一出生体重对新生仔猪免疫功能和肝脏抗氧化能力的影响研究本试验旨在探究出生体重对新生仔猪免疫功能和肝脏抗氧化能力的影响。试验从10头体况接近、胎次相近和产期一致的母猪所产DLY新生仔猪中选出10头NBW仔猪（体重:1.66±0.07 kg）和10头LBW仔猪（体重:0.83±0.04 kg）,不吃初乳,出生后24 h内屠宰。结果表明:与NBW仔猪相比,LBW新生仔猪1)肾脏指数显着提高（P<0.05）,肺脏指数有提高的趋势（P=0.050）;2)血清蛋氨酸、天冬氨酸和谷氨酸含量显着提高（P<0.05）;3)血清IgA含量显着降低（P<0.05）,IgM含量有降低的趋势（P=0.072）;4)肝脏SOD和GPx活性显着降低（P<0.05）,AHR活性有降低的趋势（P=0.076）。结果表明,与NBW新生仔猪相比,LBW新生仔猪的肾脏和肺脏指数提高,血清蛋氨酸、天冬氨酸和谷氨酸含量提高,血清IgA和IgM含量降低,肝脏AHR、SOD和GPx活性降低,说明LBW新生仔猪免疫功能和抗氧化能力降低。试验二出生体重和断奶对仔猪免疫功能、肠道健康和抗氧化能力的影响研究本试验旨在探究出生体重和断奶对仔猪免疫功能、肠道健康和抗氧化能力的影响。试验采用2×2的双因子设计,从30头体况接近、胎次相近和产期一致的母猪所产DLY仔猪中分别选取30头NBW和30头LBW仔猪。在21日龄时按体重相近、公母各半的原则选出24头NBW仔猪（体重:6.14±0.03 kg）和24头LBW仔猪（体重:3.68±0.05kg）,将NBW仔猪分为两个处理（NBW对照组和NBW断奶组）,LBW仔猪分为两个处理（LBW对照组和LBW断奶组）,每个处理12头个重复,每个重复1头猪。对照组仔猪当天进行麻醉屠宰,断奶组仔猪按猪场正常程序断奶和饲喂,3d后进行麻醉屠宰。结果表明:与NBW仔猪相比,LBW仔猪1)体重显着降低（P<0.05）;2)血清COR和BUN含量显着提高（P<0.05）,IgM和LZM含量显着降低（P<0.05）;3)肝脏SOD和Nrf2基因表达量显着降低（P<0.05）;4)空肠绒毛高度和CLDN-1基因表达量显着降低（P<0.05）;5)空肠b0,+AT基因表达量显着降低（P<0.05）;6)空肠Caspase-1和胸腺IL-2基因表达量显着提高（P<0.05）,脾脏IL-2,肝脏和脾脏IL-6基因表达量显着降低（P<0.05）;7)盲肠食糜大肠杆菌数显着提高（P<0.05）。与断奶前相比,断奶后3 d NBW仔猪1)体重增加0.21 kg;2)血清COR和CRP含量显着提高（P<0.05）,血清C3和LZM含量显着降低（P<0.05）;3)空肠CAT、SOD、Nrf2、NQO-1和HO-1基因表达量显着降低（P<0.05）;4)空肠绒毛高度、绒隐比、杯状细胞数、OCLN、CLDN-1和CLDN-2基因表达量显着降低（P<0.05）;5)空肠y+LAT1、b0,+AT和PePT1基因表达量显着降低（P<0.05）;6)空肠和肝脏Caspase-1、胸腺TNF-α基因表达量显着提高（P<0.05）,空肠和脾脏IL-2,空肠、脾脏和肝脏IL-6,空肠TLR9、MyD88、TRIF、p65NF-?B,以及胸腺TRAF6基因表达量显着降低（P<0.05）;7)盲肠食糜大肠杆菌数显着降低（P<0.05）。与断奶前相比,断奶后3 d LBW仔猪1)体重降低0.10 kg;2)血清BUN含量显着提高（P<0.05）,血清C3和LZM含量显着降低（P<0.05）;3)空肠CAT、SOD、Nrf2、NQO-1和HO-1基因表达量显着降低（P<0.05）;4)空肠绒隐比、杯状细胞数、ZO-2和OCLN基因表达量显着降低（P<0.05）;5)空肠y+LAT1、4F2hc、b0,+AT和PePT1基因表达量显着降低（P<0.05）;6)空肠和脾脏IFN-γ、脾脏和胸腺TNF-α和Caspase-1、脾脏NLRP3基因表达量显着提高（P<0.05）,空肠和肝脏IL-18、空肠TLR9、NOD2、TRIF、IL-2、TNF-α和NLRP3、肝脏IFN-γ基因表达量显着降低（P<0.05）。7)盲肠食糜大肠杆菌数显着提高（P<0.05）。结果表明,与NBW仔猪相比,LBW仔猪氧化还原平衡遭到破坏,免疫功能降低,肠道健康受损,体重下降;与断奶前相比,断奶后3 d NBW仔猪机体氧化还原平衡遭到破坏,氨基酸转运载体表达下调,促炎因子基因表达升高,肠道结构与功能遭到破坏;与断奶前相比,断奶后3 d LBW仔猪肠道抗氧化能力降低、氨基酸转运受阻、有害菌数量增加、肠道结构与功能遭到破坏,促炎因子基因表达下调,体重降低。试验三饲粮补充Arg对LBW仔猪免疫功能和肝脏抗氧化能力的营养效应研究本试验旨在探究饲粮添加Arg对LBW仔猪免疫功能和肝脏抗氧化能力的营养效应。试验从72头体况接近、胎次相近和产期一致的母猪所产DLY新生仔猪中选出16头NBW和72头LBW仔猪。4日龄后,从中选出10头NBW仔猪和20头LBW仔猪,NBW仔猪饲喂基础饲粮（NBW组）,LBW仔猪分别饲喂基础饲粮（LBW组）和添加1.0%Arg的饲粮（LBW+Arg组）,人工乳饲喂21天。结果表明:与NBW组相比,LBW组仔猪1)血清IgG含量显着降低（P<0.05）,脾脏TNF-α、IL-10和TGF-β1基因表达量显着降低（P<0.05）。2)脾脏TLR2、p65NF-?B、MyD88和p38MAPK基因表达量显着降低（P<0.05）,胸腺MyD88和p38MAPK基因表达量显着降低（P<0.05）。3)胸腺ARG2基因表达量显着降低（P<0.05）。4)肝脏ASA和AHR活性显着降低,Nrf2和NQO-1基因表达量显着提高（P<0.05）。与LBW组相比,LBW+Arg组仔猪1)脾脏指数显着提高（P<0.05）,胸腺指数有提高的趋势（P=0.070）。2)血清IgA和IgM含量显着提高（P<0.05）,脾脏IFN-γ基因表达量显着提高（P<0.05）,p38MAPK基因表达量有提高的趋势（P=0.079）。3)肝脏AHR、SOD和GPx的活性显着提高,NQO-1、IL-1β和IL-6的基因表达量显着降低（P<0.05）。结果表明,与NBW哺乳仔猪相比,LBW哺乳仔猪血清免疫球蛋白含量、脾脏细胞因子基因表达量、脾脏和胸腺免疫相关基因表达量、肝脏抗氧化酶活性和胸腺ARG基因表达量均降低;与LBW哺乳仔猪相比,饲粮添加1.0%Arg通过提高LBW仔猪血清免疫球蛋白含量、脾脏指数和肝脏抗氧化酶的活性,说明饲粮添加1.0%Arg改善了LBW仔猪免疫功能和肝脏抗氧化能力。综上所述,本研究结果表明,与NBW仔猪相比,LBW仔猪在0日龄、21日龄（断奶前）及24日龄（断奶后3 d）抗氧化能力和免疫功能明显降低。饲粮添加1%Arg可以提高LBW哺乳仔猪免疫功能和抗氧化能力。
姚艳玲[8]（2019）在《吸烟对雄性大鼠生殖毒性及子代学习记忆的影响及机制研究》文中研究说明目的:构建不同暴露时间和不同暴露剂量的雄性大鼠吸烟模型,评估吸烟对雄性大鼠的生殖毒性,进一步探讨吸烟引起生殖毒性的分子生物学机制;通过Morris水迷宫实验测定不同性别子代空间学习记忆能力的改变,并在分子生物学层面探讨父代吸烟引起子代学习记忆能力改变的机制。方法:SD大鼠300只（雄性200只,雌性100只）,根据暴露时间随机分为2、4、6、8、12周,每周组又包括空白对照组（新鲜空气即0支/天）、低剂量组（10支/天）、中剂量组（20支/天）及高剂量组（30支/天）,每组10只动物。香烟暴露组雄鼠于吸烟结束前1周分别与未染毒成年雌性大鼠按1∶1合笼,交配时间为一周,怀孕雌鼠自然分娩后连续观察子代生长发育情况,21天后断乳,子代雌雄随机分笼分组,分组方法同父代,每组10只动物,雌雄各半。子代长到7周后结束实验。Morris水迷宫方法测定子代学习记忆能力的变化;HE染色法观察父代睾丸组织和子代海马组织的结构形态;精子涂片法,计算精子数量和精子畸形率;观察和记录雌鼠受孕率和子代出生数量;ELISA法测定父代血清和子代血清中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及瘦素（leptin）的表达水平;测定父代睾丸组织和子代海马组织中SOD活性、MDA含量及GSH-Px活性,测定子代海马组织中NO含量及NOS活性;免疫组织化学法检测Caspase-8、Caspase-3蛋白表达水平;RT-PCR及Western Blot法测定父代睾丸组织中死亡受体Fas/FasL凋亡通路中及wnt/β-catenin增殖通路上相关基因mRNA和蛋白表达水平;子代海马组织中wnt/β-catenin相关基因mRNA和蛋白表达水平。TUNEL法测定子代海马组织中凋亡率。结果:（1）香烟暴露组大鼠,体重增长速度减慢（P<0.05）;不同暴露时间及暴露剂量间父代精子的数量和畸形率差异有统计学意义（P<0.05）;香烟暴露组大鼠随染毒时间及剂量的增加,睾丸组织逐渐出现萎缩,曲细精管间隙逐渐变大,精原细胞细胞排列出现紊乱,甚至出现大范围无精原细胞和精子的曲细精管;雌性大鼠受孕率及子代出生数量明显减少（P<0.05）;香烟暴露组父代大鼠血清中IGF-1和leptin的蛋白表达差异均有统计学意义（P<0.05）;体重变化与IGF-1呈正相关,和Leptin呈负相关。（2）暴露组大鼠睾丸组织中SOD和GSH-Px活性均升高（P<0.05）;MDA含量明显增加（P<0.05）;暴露组大鼠睾丸组织中Fas、FasL、FADD、Caspase-3和Caspase-8基因在mRNA和蛋白水平上表达随着暴露时间的延长和暴露剂量的增加,均出现明显上调（P<0.05）;暴露组大鼠睾丸组织中wnt-2b、β-catenin和GSK-3β基因在mRNA和蛋白表达水平上,均出现明显下调（P<0.05）。（3）暴露组子代体重的增长随着父代暴露时间的延长和暴露剂量的增加而减慢（P<0.05）;雌性子代血清中IGF-1蛋白的含量在除2周高剂量组和12周低剂量组外,其他各暴露组均出现明显的降低（P<0.05）;雄性子代血清中IGF-1蛋白的表达量在除8周低、高剂量组和12周低剂量组外,其他各暴露组均出现明显的降低（P<0.05）。雌性子代血清中Leptin蛋白的表达量在除2周各暴露组、6周中剂量组和8周高剂量组明显增加外（P<0.05）,其他各暴露组均出现明显的降低（P<0.05）;雄性子代血清中Leptin蛋白的含量在除6周中剂量组和8周高剂量组明显增加外（P<0.05）,其他各暴露组均出现降低（P<0.05）。水迷宫实验中,雌性大鼠定位航行实验中潜伏期和游泳总距离变化及空间搜索实验中跨越平台次数变化均不显着;在雄性子代,则表现为潜伏期和游泳总距离总体增加的趋势,同时跨越平台次数也减少（P<0.05）。（4）雌性子代海马组织中总NOS含量除在4周中、高暴露组减少外,其他各暴露组均出现增加,且在2周和12周中剂量暴露组及6周低剂量暴露组差异有统计学意义（P<0.05）;iNOS含量总体水平降低（P<0.05）;NO含量在6周低、中暴露组和8周各暴露组出现明显的增高（P<0.05）;BDNF蛋白含量在8周和12周各暴露组出现明显下调（P<0.05）;SOD活性在各剂量暴露组均明显下调（P<0.05）;GSH-Px活性在各剂量暴露组均明显增加（P<0.05）;Tunel阳性细胞数在各剂量暴露组均明显增加（P<0.05）;β-catenin和GSK-3β在mRNA水平上在各剂量暴露组下调明显下调（P<0.05）;wnt-2b、β-catenin、GSK-3β和磷酸化GSK-3β蛋白表达量,随着暴露时间的延长和暴露剂量的增加上调（P<0.05）。雌雄子代海马组织中Caspase-3阳性细胞数在各剂量暴露组均明显增加（P<0.05）。雄性子代海马组织中总NOS及iNOS含量在各暴露组均明显的增加（P<0.05）;NO含量在各暴露组均出现明显的降低（P<0.05）;BDNF蛋白表达量出现明显的减少（P<0.05）;SOD活性及MDA含量在各剂量暴露组明显的增加（P<0.05）;GSH-Px活性只在4周低、中剂量暴露组和8周中剂量暴露组明显的降低（P<0.05）;Tunel阳性细胞数明显的增加（P<0.05）;wnt-2b和β-catenin在mRNA水平均表达上调（P<0.05）;GSK-3β在mRNA水平表达下调（P<0.05）;wnt-2b、β-catenin、磷酸化β-catenin及磷酸化GSK-3β蛋白表达量均明显上调（P<0.05）;GSK-3β蛋白表达量明显下调（P<0.05）。结论:吸烟引起雄性大鼠睾丸组织结构损伤,精子生成减少,雌鼠受孕率降低,其分子生物学机制可能是吸烟使睾丸组织发生了不可逆性的损伤,损伤机制包括睾丸组织中过度的氧化应激反应,上调的死亡受体Fas/FasL凋亡信号通路和抑制的wnt/β-catenin增殖通路。父代吸烟可导致子代空间学习记忆能力受损,且对雄性子代影响更明显,引起这种表现的可能原因是父代吸烟引起了雄性子代海马组织中氧化和抗氧化系统失衡;BDNF蛋白表达下调;父代吸烟使子代海马组织中凋亡率增加,同时激活了wnt/β-catenin增殖通路,凋亡与增殖之间相抗衡使子代未出现更为明显的学习记忆损伤。
胡怡[9]（2018）在《系列褐藻胶寡糖通过调控sGC表达对大鼠肺动脉高压影响的研究》文中研究表明目的:肺动脉高压（PAH）是由多种原因引起的肺动脉压力异常升高的病理生理状态,是存在于多种临床疾病中的一种血流动力学障碍,其病理生理学特点是在缺氧、炎性反应、血流异常剪切力等诱发下,异常产生的血管活性物质和细胞因子,作用于血管内皮和血管平滑肌等靶细胞,导致肺血管异常收缩、生长、重构及细胞外基质堆积等,最终形成肺动脉高压。肺动脉高压的临床表现缺乏特异性,很难做到早期发现和早期诊断、治疗,其临床特征是肺血管阻力逐渐上升,导致右心衰竭,最终引起全身静脉充血和器官灌注受损。肺动脉高压患者预后差,致死率及致残率极高。肺动脉高压严重影响患者生活质量,威胁患者生命健康,目前仍然是一个慢性不可治愈的疾病,其导致的肺源性心脏病是人类死亡的常见原因。迄今为止针对肺动脉高压研发出不同机制的多种药物,尽管取得一些研究成果,但目前临床仍缺乏有效治疗尤其是药物治疗手段,已上市药物种类少、价格昂贵、副作用多、疗效欠佳,未上市的药物处于实验研发及临床试验阶段,尚未临床应用。因此开发安全、有效、质优、价廉的降低肺动脉高压的药物对广大饱受疾病痛苦、经济负担折磨的肺动脉高压患者具有重要意义。海洋多糖来源丰富,海洋动物、海洋植物、海洋微生物都能合成出不同于陆地植物的带有大量电荷的多糖。海洋多糖具有如抗凝、抗血栓、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、抗炎等多种生物活性,但因其存在凝胶性强、黏度大、水溶性差、不易被吸收等缺点,因而限制了多糖在生物医药等领域的应用。近年来随着海洋科学研究的发展深入,具有多种生物活性的多糖降解产物-寡糖逐渐进入人们的视野。褐藻胶寡糖（AOS）,是由海藻酸钠降解而成的一种寡聚物,由β-D-甘露糖醛酸和α-L-古罗糖醛酸通过1-4糖苷键连接形成的线型嵌段化合物,具有促进植物生长和诱导抗逆性、抗凝血、抗菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、神经保护、诱导细胞因子的产生、免疫调节等生物学活性,且褐藻胶寡糖的寡糖组成、分子量（聚合度）、端基糖环结构对褐藻胶寡糖的抗氧化活性的影响不同。可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）是一个以原卟啉IX型血红素为辅基,α、β两个亚基组成的异源二聚体,每种亚基又有2种异构体,分别命名为α1、α2和β1、β2,在肺组织中sGC主要以α1、β1亚基形式存在。一氧化氮（NO）作为一种内皮源性舒张因子在调控血管张力、细胞增殖、迁移和凋亡中起着重要作用。sGC是NO的细胞内唯一受体,催化三磷酸鸟苷产生细胞内第二信使分子环鸟苷酸,参与平滑肌收缩舒张、抑制血小板聚集、调控细胞增殖及凋亡、神经突触的信号传递等。在机体中,除了经典的内皮依赖的NO激活sGC通路（NO-sGC通路）对维持肺动脉低阻力起着重要作用外,还存在一条内皮不依赖的、与活性氧代谢产物有关的sGC激活通路,即H2O2-sGC通路,它们一起参与血管张力和器官血流状态的调节。基于上述原因,本研究初步探索是否可以利用褐藻胶寡糖抗氧化、清除氧自由基等生物学活性,通过调控sGC靶点,激活H2O2-sGC通路,从而改善大鼠肺动脉高压,进而对系列褐藻胶寡糖构效与量效进行对比研究,筛选拟应用于肺动脉高压防治的最佳药物,为肺动脉高压临床治疗提供更安全、更有效的方法。方法:1.采用一次性腹腔注射野百合碱（MCT）60 mg/kg,制备大鼠肺动脉高压模型,5周后,应用Vevo2100型超高分辨率小动物超声实时分子影像系统测量大鼠肺动脉加速时间（PAT）、肺动脉射血时间（ET）、肺动脉内径（PAD）、舒张末期右心室内径（RVIDd）、收缩末期右心室内径（RVIDs）,计算PAT/ET,取平均值,并应用右心导管法对大鼠进行血流动力学检测,评估造模情况。2.首先检测不同结构褐藻胶寡糖对大鼠肺动脉高压的影响,将大鼠随机分组:PAH组（与PAH+M-3K-H组等量生理盐水）、PAH+PGE1组(前列地尔5ug·kg-1·d-1)、PAH+M-3K-H group(M-3K 20mg·kg-1·d-1)、PAH+M-6K-H group(M-6K20mg·kg-1·d-1)、PAH+G-3K-H group(G-3K 20mg·kg-1·d-1)、PAH+G-6K-H group(G-6K 20mg·kg-1·d-1)和Control组(生理盐水1ml·只-1·d-1),其次检测不同剂量褐藻胶寡糖对大鼠肺动脉高压的影响,将大鼠随机分组:PAH组（与PAH+M-3K-H组等量生理盐水）、PAH+PGE1组(前列地尔5ug·kg-1·d-1)、PAH+M-3K-L group(M-3K 5mg·kg-1·d-1)、PAH+M-3K-M group(M-3K 10mg·kg-1·d-1)、PAH+M-3K-H group(M-3K 20mg·kg-1·d-1)和Control组(生理盐水1ml·只-1·d-1),通过检测各组大鼠右心室肥厚指数、大鼠心脏超声指标,HE染色法、透射电镜观察肺组织和肺动脉超微结构,并通过Masson染色、Van Gieson染色、弹力纤维染色观察肺组织及肺动脉血管重构状况,对各组指标进行统计学比较,评价褐藻胶寡糖对大鼠肺动脉高压的影响,并观察不同结构、不同剂量的褐藻胶寡糖对大鼠肺动脉高压有何不同的影响。3.采用免疫组化、原位杂交、Westernblot、ELISA等方法,分别研究不同结构、不同剂量褐藻胶寡糖是否可以通过调控sGC靶点改善大鼠肺动脉高压,并观察其对sGC靶点的激活有何不同。结果:1.腹腔注射野百合碱5周后,大鼠出现喘息、口唇紫绀、呼吸声粗、活动耐力下降等症状。心脏超声结果显示,与Control组相比,MCT组中PAT、PAT/ET明显降低,差异有统计学意义(**P<0.01),MCT组中RVIDd、RVIDs、PAD明显升高,差异有统计学意义(**P<0.01、*P<0.05)。右心导管实验结果显示,Control组右心室收缩压（RVSP）是14.64±1.096 mmHg,MCT组RVSP是56.30±1.243 mmHg,与Control组相比,MCT组RVSP明显升高,差异有统计学意义(**P<0.01)。2.右心室肥厚指数检测结果显示,与Control组相比较,PAH组右心室肥厚指数（RVHI）明显升高,**P<0.01,与PAH组相比较,各给药组RVHI不同程度地降低,##P<0.01,其中,以PAH+M-3K-H组RVHI降低最为明显。心脏超声指标比较结果显示,与Control组相比较,PAH组PAD、RVIDd、RVIDs明显升高,**P<0.01或*P<0.05,PAT、PAT/ET明显降低,**P<0.01,与PAH组相比较,各给药组上述指标均有不同程度地改善,其中,以PAH+M-3K-H组改善最为明显。组织学观察结果显示,褐藻胶寡糖可以改善肺动脉高压大鼠肺组织和肺动脉的结构紊乱,降低肺动脉血管壁厚度,使血管腔扩大,减少原位血栓形成,减轻炎性细胞浸润及胶原纤维增生,降低血管重构程度,且该作用与寡糖组分和分子量有关系,M组分效果优于G组分,分子量3K效果优于分子量6K。3.免疫组化、原位杂交实验结果显示,与Control组相比较,PAH组sGCα1、sGCβ1蛋白表达明显降低,**P<0.01,与PAH组相比较,各给药组sGCα1、sGCβ1蛋白表达不同程度地升高,##P<0.01或#P<0.05,其中,以PAH+M-3K-H组升高最为显着。Westernblot、ELISA等实验结果显示,与Control组相比较,PAH组SOD水平、CAT水平、sGCα1及sGCβ1蛋白表达、cGMP含量明显降低,**P<0.01,与PAH组相比较,各给药组SOD水平、CAT水平、sGCα1及sGCβ1蛋白表达、cGMP含量不同程度地增加,##P<0.01或#P<0.05,其中,以PAH+M-3K-H组增加最为显着,且该作用与寡糖组分和分子量有关系,M组分效果优于G组分,分子量3K效果优于分子量6K。结论:1.褐藻胶寡糖可以改善肺动脉高压大鼠肺组织的结构紊乱、肺动脉血管重构,进而降低肺动脉压力,降低右心负荷,改善右心室重构。2.褐藻胶寡糖通过发挥清除氧自由基、抗氧化的生物学活性,可以增加肺组织SOD、CAT含量,进而激活sGC靶点及H2O2-sGC-cGMP通路,使肺泡血管平滑肌松弛,降低肺动脉压力,改善肺泡通气/血流比,从而缓解肺动脉高压症状。3.褐藻胶寡糖的作用效果与寡糖组分和分子量有关系,M组分效果优于G组分,分子量3K效果优于分子量6K。
张峰[10]（2017）在《肠道菌群的日粮铜水平响应对大鼠和苏淮哺乳仔猪生长及机体健康的影响》文中研究说明自1950s始,抗生素类促生长饲料添加剂广泛用于养猪生产,在改善动物健康、提高动物生产性能的同时,也加剧了细菌的抗生素耐药问题。欧盟于2006年全面禁止抗生素用于动物促生长,饲料高铜成为一个广泛采用的替代措施,欧盟规定在开食至12周龄仔猪饲料中可添加170-175 mg·kg-1的铜。但是近年来越来越多的研究发现,饲料高铜有可能通过选择与耐药基因共享遗传元件的铜抗性基因,而增强对动物肠道和环境中耐药菌的选择,促进细菌耐药性的维持与传播,仔猪日粮中高铜使用的合理性再次引起广泛关注。长时间采食高铜会产生铜中毒,危害动物健康。我国当前养猪生产中以促生长为目的抗生素和高铜添加普遍同时存在,高铜对猪生长健康和猪源细菌耐药性的影响也因此更为复杂。本文应用微生物、离子和代谢组学技术,综合评价日粮铜水平对大鼠和苏淮哺乳仔猪生长及肠道微生物的影响,为我国养猪业后抗生素时代饲料中铜的合理添加提供科学依据。1日粮铜水平对大鼠生长及肠道健康的影响本研究选择60只雄性SD大鼠随机分为三组,分别饲喂八周的6、120和240 mg·kg-1铜水平纯合日粮,记录大鼠采食和体重数据、观察肠道形态、测定血清生化指标及肠道组织氧化标记物和抗氧化酶水平,以研究日粮铜水平对大鼠生长和肠道健康的影响。试验结果表明,高铜（120和240 mg·kg-1）日粮前四周有促进大鼠平均日增重的趋势（P=0.07）,但后四周有降低平均日增重的趋势（P=0.08）,平均日采食量和饲料转化效率表现相同的变化规律,但差异不显着。240 mg·kg-1日粮铜显着提高了大鼠血清中胰岛素、胃饥饿素、促炎因子TNF-α和IL-6的水平（P<0.05）,但日粮铜水平对大鼠血液铜、铜转运相关蛋白等的含量无显着影响。日粮高铜极显着提高了大鼠回、结肠食糜的铜含量（P<0.01）。240 mg·kg-1日粮铜显着降低了大鼠回肠绒毛高度和隐窝深度,6和240 mg·kg-1日粮铜显着升高了大鼠回肠V/C比值（P<0.05）。日粮高铜（120和240 mg·kg-1）降低了大鼠空、回肠组织中NO水平（P<0.05）、回肠组织中超氧化物歧化酶（SOD）（P<0.05）、过氧化氢酶（P=0.08）和谷胱甘肽（GSH）（P=0.07）的水平,降低了空肠组织中铜锌超氧化物歧化酶水平（p=0.07）,但提高了空肠组织中氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平（P<0.05）。综上所述,日粮高铜（120和240 mg·kg-1）对大鼠生长的影响呈现短期促进、长期抑制的趋势。高铜（120和240 mg·kg-1）日粮的长期摄入使得铜元素在大鼠肠道食糜中显着积累,这种积累改变小肠组织氧化还原状态,降低了肠道组织的抗氧化能力,打破活性氧物质产生与清除之间的平衡,引起大鼠机体炎症反应,不利于大鼠的健康。2日粮铜水平对大鼠肝脏铜离子代谢和氧化还原平衡的影响肝脏是代谢和储存铜的主要器官,为研究日粮铜水平对大鼠肝脏铜离子代谢和氧化还原状态的影响,本章对第一章的试验大鼠进行肝脏组织形态学分析、铜含量、铜转运相关基因mRNA表达水平以及氧化标记物和抗氧化酶水平的测定。结果表明,日粮高铜（120和240 mg·kg-1）对大鼠肝脏组织细胞产生较明显的结构破坏,肝脏细胞出现胞浆浑浊以及细胞间隙变大出现空洞。日粮高铜（120和240 mg·kg-1）提高总超氧化物歧化酶（T-SOD）（P<0.05）、锰-超氧化物歧化酶（Mn-SOD）（P<0.05）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）（P<0.05）及氧化型谷胱甘肽（GSSG）（P<0.05）水平;120 mg·kg-1日粮铜提高铜锌-超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）水平（P<0.05）。240 mg·kg-1日粮铜下调铜转运蛋白（Ctr1）基因mRNA表达水平（P<0.05）;120 mg·kg-1日粮铜上调铜锌超氧化物歧化酶（Soad1）（P<0.05）、金属硫蛋白（Mt1a）（P<0.05）、铜蓝蛋白（Cp）（P<0.05）及铜锌超氧化物歧化酶伴侣蛋白（Ccs）（P=0.09）基因mRNA表达水平。相关性分析结果表明,肝脏铜含量与铜锌超氧化物歧化酶伴侣蛋白（Ccs）、铜蓝蛋白（Cp）基因的mRNA表达水平、总超氧化物歧化酶（T-SOD）及铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）水平显着正相关（P<0.05）,与血清中IL-6水平显着负相关（P<0.05）。综上所述,大鼠长期摄入高铜（120和240 mg·kg-1）日粮,对肝脏细胞造成形态学损伤,120 mg·kg-1日粮铜上调肝脏组织金属硫蛋白（Mt1a）和铜蓝蛋白（Cp）基因表达水平,并提高肝脏组织抗氧化能力（CuZn-SOD和GSSG水平升高）,提高大鼠对持续日粮高铜的适应性和耐受性,维持肝细胞内铜的稳态。240 mg·kg-1日粮铜只能下调肝细胞Ctr1基因表达水平,不能通过其它适应性基因表达调控来提高肝细胞对高铜的耐受性,进而导致肝细胞形态学损伤严重。3日粮铜水平对大鼠肠道菌群的影响及其与机体炎症和氧化还原平衡的相关性大鼠长时间采食高铜日粮,食糜中高浓度铜环境对肠道微生物也存在影响,本章采集第一章中试验大鼠粪便样品,运用16S rRNA基因高通量测序技术研究日粮铜水平对大鼠粪样微生物的影响。试验结果表明,日粮高铜（120和240 mg·kg-1）提高微生物丰度（ACE和Chaol）和多样性（Shannon）指数（P<0.05）,Simpson指数存在降低趋势（P=0.07）。相对于低铜（6 mg·kg-1）处理组,日粮高铜（120和240 mg·kg-1）提高产丁酸（多尔氏菌属Dorea、布劳特氏菌Blautia、粪球菌属Coprococcus等）菌群、肠道健康相关菌群（克里斯藤森菌科Christensenellaceae、颤杆菌克属Oscillibacter、别样杆菌属Alistipes）及潜在病原菌（丹丝毒菌科Erysipelotrichaceae和紫单胞菌属Parabacteroides）相对丰度（P<0.05）。相关性结果表明,粪样微生物丰度和多样性指数与回、结肠食糜铜含量及血清TNF-α显着正相关（P<0.05）,与空肠一氧化氮（NO）水平显着负相关（P<0.05）;微生物丰度指数与回肠抗氧化酶（T-SOD和Mn-SOD）水平显着负相关（P<0.05）。Anaerotruncus相对丰度与血清TNF-α显着正相关（P<0.05）,与空肠一氧化氮（NO）及回肠抗氧化酶（T-SOD和Mn-SOD）水平均显着负相关（P<0.05）,Parasutterella相对丰度的相关性与之相反;OTU402（粪球菌属Coprococcus）与OTU52（普通拟杆菌Bacteroides vulgatus）相对丰度与血清TNF-α水平显着正相关（P<0.05）;OTU99（紫单胞菌属PParabacteroides）及 OTU273（别样杆菌属Alistipes）相对丰度与血清TNF-α水平显着负相关（P<0.05）;布劳特氏菌Blautia（OTU88）与OTU69（克里斯藤森菌科Christensenellaceae）相对丰度与空、回肠一氧化氮（NO）水平及回肠抗氧化酶（T-SOD和Mn-SOD）显着正相关（P<0.05）;OTU368（布劳特氏菌 Blautia）、OTU402（粪球菌属 Coprococcus）及 OTU145（颤杆菌克属 Oscillibacter）相对丰度与空、回肠一氧化氮（NO）水平及回肠T-SOD显着负相关（P<0.05）。综上所述,长时间摄入高铜（120和240 mg·kg-1）日粮,大鼠回、结肠食糜中铜显着积累,提高粪样微生物丰度和多样性,改变某些优势菌群丰度,导致菌群结构和组成改变,打破大鼠肠道组织氧化还原平衡状态,引起大鼠机体炎症反应,对大鼠健康不利。4无抗日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪生长健康及离子组谱的影响本章研究以苏淮哺乳仔猪作为动物模型,探究无抗日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪生长性能、血清生化指标和机体离子平衡的影响,并通过相关性分析研究日粮铜水平对仔猪健康的影响。试验选择来自18头二胎次母猪的哺乳阶段14日龄仔猪172头,分为6、20和300 mg·kg-1（CuSO4）三个处理组。饲喂周期为仔猪14日龄至40日龄。结果表明,相对于低铜（6 mg·kg-1）组,日粮高铜（300 mg·kg-1）提高仔猪平均日增重（P<0.05）及平均日采食量（P<0.05）（14至28日龄）,在29至40日龄降低仔猪平均日增重（P<0.05）和饲料转化率（P<0.05）。仔猪腹泻率随着日粮铜水平增加显着下降（P<0.05）。相对于低铜（6 mg·kg-1）组,日粮20 mg·kg-1铜水平降低丙二醛（MDA）（P<0.05）、谷丙、谷草转氨酶（P<0.05）及总胆酸（P<0.05）水平;日粮高铜（300 mg·kg-1）提高生长激素（GH）（P<0.05）、降低肿瘤坏死因子-α（TNF-α）（P<0.05）、总胆酸（P<0.05）、白蛋白（P<0.05）及金属硫蛋白（P<0.05）水平,超氧化物歧化酶（SOD）有降低趋势（P=0.09）。相对于低铜（6 mg·kg-1）组,日粮20 mg·kg-1铜水平提高毛发及血清Mg含量（P<0.05）,日粮高铜（300 mg·kg-1）提高毛发Na和K、血清Ca和P及粪样Cu含量（P<0.05）;相对于20 mg·kg-1铜水平,日粮高铜（300 mg·kg-1）提高毛发Na和K含量（P<0.05）,降低毛发Mg、P及Mn含量（P<0.05）。元素间相关性结果表明各元素之间均显着正相关（P<0.05）。相关性模式结果表明,饲喂300 mg·kg-1铜水平日粮仔猪毛发中Ca、Mg、P、Na、K与Cu、Mn、Zn之间相关性消失。毛发Na和K含量与IGF-1和总抗氧化能力（T-AOC）显着正相关（P<0.05）,与TNF-α、金属硫蛋白（Metallothionein）显着负相关（P<0.05）;毛发、血清及粪样Fe含量与金属硫蛋白（Metallothionein）、谷丙转氨酶（ALT）及白蛋白（Albumin）显着正相关（P<0.05）,与丙二醛（MDA）显着负相关（P<0.05）;毛发、血清及粪样Cu含量与丙二醛（MDA）、总胆汁酸（TBA）及尿素氮（BUN）显着负相关（P<0.05）。综上所述,日粮高铜（300 mg·kg-1）短时间内促进了哺乳仔猪生长,仔猪的肝、肾功能和氧化还原平衡状态受损;20 mg·kg-1日粮铜组仔猪饲料转化率较高,腹泻率也在可接受范围,机体的抗氧化能力和肝、肾功能改善,满足仔猪营养需求;日粮高铜（300 mg·kg-1）改变Na、K和Fe、Cu、Zn体内平衡状态,损伤机体氧化还原平衡状态和肝肾功能。5无抗日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪肠道菌群的影响及其与机体炎症和氧化还原平衡的相关性肠道微生物在影响动物宿主健康方面存在重要的作用。本章试验设计同第四章,采集39日龄仔猪粪便样品,利用16s rRNA测序分析粪样微生物菌群。仔猪粪样微生物菌群分析结果显示,日粮铜水平对粪样微生物的丰度和多样性指数无显着影响,粪样中肠球菌（Enterococcus）、大肠杆菌（Escherichia coli）、乳酸杆菌（Lactobacillus）和葡萄球菌（Staphylococcus）相对丰度均无显着影响（P>0.05）。高铜（300 mg·kg-1）日粮提高纤维杆菌门（Fibrobacteres）相对丰度及链球菌（Streptococcus）相对丰度（P<0.05）,降低产丁酸菌粪球菌属（Coprococcus）、氨基酸球菌属（Acidaminococcus）及罗氏菌属（Roseburia）相对丰度（P<0.05）。仔猪粪样微生物与血清代谢产物相关性分析结果表明,毛螺菌科Lachnospiraceae（NK4A136和PCS020 group）相对丰度与丙二醛（MDA）、白蛋白（ALB）显着正相关（P<0.05）,与总抗氧化能力（T-AOC）显着负相关（P<0.05）;瘤胃球菌属（Ruminococcus）相对丰度与血清TNF-α显着正相关（P<0.05）;盐单胞菌属（Halomonas）及产甲烷短杆菌属（Methanobrevibacter）相对丰度与血清TNF-α、白蛋白（ALB）及尿素氮（BUN）显着正相关（P<0.05）;棒状杆菌属（Corynebacterium）相对丰度与血清TNF-α及白蛋白（ALB）显着正相关。综上所述,高铜（300 mg·kg-1）日粮显着降低了仔猪肠道中产丁酸菌相对丰度,潜在病原菌（Streptococcus）的相对丰度上升,高铜（300 mg·kg-1）日粮改变了仔猪肠道微生物的结构和组成,进而改变机体炎症反应、氧化还原状态以及肝肾功能,不利于仔猪健康。6无抗日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪粪样代谢产物的影响及其与机体离子平衡和肠道微生物相关性本章试验利用非靶向代谢组学手段研究无抗日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪粪样代谢产物的影响。试验设计同第四章,采集39日龄仔猪粪便样品用于代谢组学分析。代谢组分析共检测到91种代谢产物,三个处理组之间差异代谢产物47种,日粮低铜（6 mg·kg-1）上调粪样中必需氨基酸（亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸和精氨酸）及条件性必需氨基酸（脯氨酸和酪氨酸）,单糖（阿拉伯糖和甘露糖）和磷酸糖（葡萄糖-6-磷酸、甘露糖-6-磷酸和果糖-6-磷酸）水平（P<0.05）。日粮铜水平影响碳水化合物代谢（半乳糖代谢、糖异生）及含氮小分子代谢（蛋白质生物合成、尿素循环、精氨酸、脯氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸和蛋氨酸代谢）（P<0.05）。毛发中Na、K和Cu含量与嘌呤代谢（肌苷）、苯丙氨酸和酪氨酸代谢及线粒体电子传递链（延胡索酸）显着负相关（P<0.05）;血清中Ca、Mg和P含量与尿素循环以及精氨酸和脯氨酸代谢（鸟氨酸和精氨酸）显着负相关（P<0.05）;粪样中Cu含量与甜菜碱代谢（蛋氨酸）及泛酸和辅酶A生物合成（泛酸）显着负相关（P<0.05）。普雷沃氏菌（Prevotellaceae UCG-004）相对丰度与半乳糖代谢（葡萄糖、甘露糖、肌醇）及葡萄糖-丙氨酸循环（葡萄糖）显着正相关（P<0.05）;粪球菌属（Coprococcus）、氨基酸球菌属（Acidaminococcus）及瘤胃球菌属Ruminococcus（OTU18）相对丰度与碳水化合物代谢途径（柠檬酸循环、苹果酸穿梭、糖异生、磷酸戊糖途径以及糖酵解）显着正相关（P<0.05）;链球菌属（Streptococcus）相对丰度与含氮小分子代谢（蛋白质生物合成、苯丙氨酸、酪氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸）显着负相关（P<0.05）。综上所述,日粮铜水平影响仔猪粪样中代谢产物水平,改变后肠代谢物组成和结构。低铜（6mg·kg-1）日粮降低了仔猪蛋白质和碳水化合物的消化吸收利用率。高铜（300mg·kg-1）组仔猪毛发、血清和粪样中元素水平变化改变机体离子平衡,影响碳水化合物、脂肪和氨基酸以及能量代谢。肠道中菌群丰度的改变,也可改变仔猪后肠微生物代谢通路,改变仔猪机体代谢稳态,而影响仔猪健康。
二、一氧化氮吸入对大鼠肝脏抗氧化能力的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、一氧化氮吸入对大鼠肝脏抗氧化能力的影响（论文提纲范文）
（1）间歇运动对PM2.5暴露致Wistar大鼠心脏损伤的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 中英缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献综述:运动、可吸入颗粒物与心脏健康的研究进展 |
| 1 可吸入颗粒物PM_(2.5) |
| 1.1 可吸入颗粒物PM_(2.5)和空气污染 |
| 1.2 可吸入颗粒物PM_(2.5)的来源、成分和污染现状 |
| 2 可吸入颗粒物PM_(2.5)暴露危害的研究 |
| 2.1 可吸入颗粒物PM_(2.5)暴露危害的流行病学研究 |
| 2.2 可吸入颗粒物PM_(2.5)暴露浓度的限定标准 |
| 3 可吸入颗粒物PM_(2.5)暴露对心脏的影响 |
| 4 可吸入颗粒物PM_(2.5)诱导心脏相关疾病的作用途径 |
| 4.1 氧化应激反应 |
| 4.2 心肌线粒体超微结构 |
| 5 间歇运动和健康促进效应 |
| 5.1 间歇运动 |
| 5.2 间歇运动的健康促进作用 |
| 6 运动和空气污染对健康影响的关联作用 |
| 参考文献 |
| 研究一:间歇运动干预和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对心脏功能影响的研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 实验流程 |
| 2.2 实验动物及分组 |
| 2.3 Wistar大鼠最大摄氧量测试和间歇运动干预方案 |
| 2.4 可吸入颗粒物PM_(2.5)急性暴露方案和暴露成分分析 |
| 2.5 Wistar大鼠超声心动检测 |
| 2.6 Wistar大鼠取材和组织样本制备 |
| 2.6.1 Wistar大鼠心肌组织样本取材 |
| 2.6.2 Wistar大鼠心肌组织匀浆的制备 |
| 2.7 研究相关指标检测 |
| 2.7.1 心肌组织HE染色切片的制备和观察分析 |
| 2.7.2 心肌线粒体透射电镜切片的制备和观察分析 |
| 2.7.3 氧化应激标志物的检测 |
| 2.8 实验仪器和试剂 |
| 2.8.1 急性研究中所用测试仪器 |
| 2.8.2 急性研究中所用实验试剂 |
| 2.9 实验数据分析 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 可吸入颗粒物PM_(2.5)浓度分析 |
| 3.2 间歇运动和可颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wistar大鼠心脏功能的影响 |
| 3.2.1 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠左心室舒张功能的影响(E、A、E/A、DT、DT/E、Decel、MVA、PHT) |
| 3.2.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠左心室顺应性的影响(S、SR、E/SR) |
| 3.2.3 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠左心室收缩功能的影响(FS、EF、SV、CO) |
| 3.2.4 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠左心室形态结构的影响(LVM/c、LVPWd/s、PVAWd/s、LVIDd/s、LVVold/s) |
| 3.3 间歇运动和颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wistar大鼠心肌组织形态学和超微结构的影响 |
| 3.3.1 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠心肌组织形态学的影响 |
| 3.3.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠心肌线粒体超微结构的影响 |
| 3.4 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wistar大鼠心脏氧化应激标志物的影响 |
| 3.4.1 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠心脏SOD和 MDA的影响 |
| 3.4.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠GSH-Px和 LPO的影响 |
| 3.4.3 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wi st ar大鼠NO和 i NOS的影响 |
| 4 讨论分析 |
| 4.1 可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露成分的分析 |
| 4.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wistar大鼠心脏功能影响变化的分析 |
| 4.3 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)不同浓度急性暴露对Wistar大鼠心脏形态学与氧化应激相关机制的分析 |
| 5 研究小结 |
| 研究二:间歇运动干预和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对心脏功能影响及其作用机制的研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 实验流程 |
| 2.2 实验动物及分组 |
| 2.3 Wistar大鼠最大摄氧量测试和间歇运动干预方案 |
| 2.4 可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露方案和暴露成分分析 |
| 2.5 Wistar大鼠超声心动检测 |
| 2.6 Wistar大鼠取材和组织样本制备 |
| 2.6.1 Wistar大鼠心肌组织样本取材 |
| 2.6.2 Wistar大鼠心肌组织中蛋白质的提取 |
| 2.7 研究相关指标检测 |
| 2.7.1 心肌组织HE染色切片的制备和观察分析 |
| 2.7.2 心肌线粒体透射电镜切片的制备和观察分析 |
| 2.7.3 ERK-JNK-P53信号通路和线粒体融合/分裂蛋白表达检测 |
| 2.8 实验仪器和试剂 |
| 2.8.1 亚急性研究中所用实验试剂 |
| 2.8.2 亚急性研究中所用实验仪器 |
| 2.9 实验数据分析 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 可吸入颗粒物PM_(2.5)化学特性、来源和浓度分析 |
| 3.2 间歇运动和可颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心脏功能的影响 |
| 3.2.1 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠左心室舒张功能的影响(E、A、E/A、DT、DT/E、Decel、MVA、P H T) |
| 3.2.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠左心室顺应性的影响(S、SR、E/SR) |
| 3.2.3 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠左心室舒张功能的影响(FS、EF、SV、CO) |
| 3.2.4 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠左心室心态结构的影响(LVM/c、LVPWd/s、PVAWd/s、LVIDd/s、LVVold/s) |
| 3.3 间歇运动和颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌组织形态学和超微结构的影响 |
| 3.3.1 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌组织形态学的影响 |
| 3.3.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌线粒体超微结构的影响 |
| 3.4 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌线粒体融合/分裂蛋白的影响 |
| 3.4.1 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌线粒体融合蛋白的影响 |
| 3.4.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌线粒体分裂蛋白的影响 |
| 3.5 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌组织中ERK-JNK-P53 信号通路蛋白的影响 |
| 3.5.1 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌组织中ERK-JNK-P53 蛋白的影响 |
| 3.5.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌组织中PGC-1α蛋白影响 |
| 4 讨论分析 |
| 4.1 可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露浓度和成分分析 |
| 4.2 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心脏功能影响变化的分析 |
| 4.3 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌线粒体融合/分裂蛋白影响的机制分析 |
| 4.4 间歇运动和可吸入颗粒物PM_(2.5)亚急性暴露对Wistar大鼠心肌组织中ERK-JNK-P53 信号通路影响的机制分析 |
| 5 研究小结 |
| 研究结论 |
| 研究主要创新之处 |
| 不足之处及后续研究设想 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 一、学习经历 |
| 二、博士在读期间论文发表与课题参与情况 |
| 期刊论文发表情况 |
| 相关课题参与情况 |
（2）参附注射液调节NOS/NO信号通路保护LPS损伤的脐静脉血管内皮细胞的作用及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 主要的实验试剂 |
| 2.1.2 主要的实验设备 |
| 2.1.3 主要的试剂配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 原代HUVEC的培养及鉴定 |
| 2.2.2 MTT法检测筛选LPS诱导HUVEC细胞损伤的合适剂量 |
| 2.2.3 不同浓度SFI对 LPS损伤HUVEC生长的影响 |
| 2.2.4 Griess法检测HUVEC上清液中NO含量检测 |
| 2.2.5 Q-PCR检测SFI对 LPS诱导的 HUVEC中 e NOS、iNOS的 mRNA表达的影响 |
| 2.2.6 流式细胞仪检测HUVEC凋亡 |
| 2.2.7 罗丹明123(RH-123)染色法测定HUVEC的线粒体膜电位 |
| 2.2.8 二氢乙锭(DHE)染色检测HUVEC细胞活性氧水平 |
| 2.2.9 统计学分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 原代培养HUVEC细胞形态学情况 |
| 3.2 LPS对脐静脉内皮细胞生存率的影响 |
| 3.3 SFI对 LPS诱导的脐静脉内皮细胞生存率的影响 |
| 3.4 SFI对 LPS诱导的HUVEC上清液中NO含量的影响 |
| 3.5 SFI对 LPS诱导的 HUVECs中 eNOS的 m RNA表达的影响 |
| 3.6 SFI对 LPS诱导的 HUVECs中 iNOS的 m RNA表达的影响 |
| 3.7 流式细胞仪检测SFI对 LPS诱导的HUVEC细胞凋亡的影响 |
| 3.8 RH-123 染色法检测SFI对 LPS诱导损伤的HUVEC线粒体膜电位的影响 |
| 3.9 DHE染色评价SFI对 LPS诱导损伤的HUVEC细胞活性氧水平的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述一 中药对血栓闭塞性脉管炎相关因子的作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 一氧化氮信号通路与动脉粥样硬化 |
| 参考文献 |
（3）大蒜素调控氧化应激及内质网应激改善膳食丙烯酰胺肝毒性机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 丙烯酰胺(Acrylamide)的研究进展 |
| 1.1.1 丙烯酰胺的基本性质及来源 |
| 1.1.2 丙烯酰胺日膳食暴露评估 |
| 1.1.3 丙烯酰胺的代谢与吸收 |
| 1.1.4 丙烯酰胺毒理学研究 |
| 1.2 大蒜素(Allicin)的研究进展 |
| 1.2.1 大蒜素的理化性质 |
| 1.2.2 大蒜素的主要生理功能 |
| 1.3 NLRP3炎性小体的研究进展 |
| 1.3.1 NLRP3炎性小体的结构 |
| 1.3.2 NLRP3炎性小体的活化机制研究 |
| 1.3.3 NLRP3炎性小体的分布情况 |
| 1.3.4 NLRP3炎性小体与疾病的相互关系 |
| 1.4 氧化应激相关通路研究 |
| 1.4.1 MAPK信号通路调控NLRP3 炎性小体 |
| 1.4.2 NF-κB信号通路调控NLRP3 炎性小体 |
| 1.5 内质网应激相关通路研究 |
| 1.5.1 内质网应激与未折叠蛋白反应 |
| 1.5.2 内质网应激调控NLRP3 炎性小体 |
| 1.6 论文研究目的、意义和内容 |
| 1.6.1 研究目的和意义 |
| 1.6.2 研究内容 |
| 1.6.3 技术路线 |
| 第2章 丙烯酰胺对Kupffer和HepG2细胞NLRP3炎性小体激活的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与仪器 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.2.3 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养 |
| 2.3.2 药物的配制及给药方法 |
| 2.3.3 Kupffer和 HepG2细胞活力的测定 |
| 2.3.4 SOD和GSH-Px酶活力的检测 |
| 2.3.5 ROS荧光强度的检测 |
| 2.3.6 RT-qPCR检测mRNA表达 |
| 2.3.7 Western Blot检测蛋白表达 |
| 2.3.8 ELISA检测细胞因子 |
| 2.3.9 数据处理与统计 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1AA对Kupffer和HepG2细胞活力的影响 |
| 2.4.2AA对Kupffer和HepG2细胞氧化应激反应的影响 |
| 2.4.3AA对Kupffer和HepG2细胞内质网应激反应的影响 |
| 2.4.4AA对Kupffer和HepG2细胞NLRP3炎性小体激活的影响 |
| 2.4.5AA对Kupffer和HepG2细胞MAPK信号通路的影响 |
| 2.4.6AA对Kupffer和HepG2细胞NF-κB信号通路的影响 |
| 2.4.7 ROS清除剂(NAC)对AA诱导的Kupffer和HepG2细胞MAPK信号通路及NLRP3 炎性小体激活的影响 |
| 2.4.8 内质网应激抑制剂(4-PBA)对AA诱导的Kupffer和HepG2细胞MAPK信号通路及NLRP3 炎性小体激活的影响 |
| 2.4.9 MAPK选择性抑制剂对AA诱导的Kupffer和HepG2细胞NLRP3炎性小体激活的影响 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 本章小结 |
| 第3章 大蒜素对丙烯酰胺诱导的Kupffer和HepG2细胞NLRP3炎性小体激活的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 本章小结 |
| 第4章 大蒜素对丙烯酰胺诱导的SD大鼠肝脏损伤的保护作用研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与仪器 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验试剂 |
| 4.2.3 实验仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 动物试验 |
| 4.3.2 生理生化指标检测 |
| 4.3.3 RT-qPCR检测mRNA表达 |
| 4.3.4 Western Blot检测蛋白表达 |
| 4.3.5 ELISA检测细胞因子 |
| 4.3.6 数据处理与统计 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 Allicin对AA诱导的SD大鼠肝脏损伤的影响 |
| 4.4.2 Allicin对AA诱导的SD大鼠肝脏氧化应激反应的影响 |
| 4.4.3 Allicin对AA诱导的SD大鼠肝脏内质网应激反应的影响 |
| 4.4.4 Allicin对AA诱导的SD大鼠肝脏NLRP3炎性小体激活的影响 |
| 4.4.5 Allicin对AA诱导的SD大鼠肝脏MAPK信号通路的影响 |
| 4.4.6 Allicin对AA诱导的SD大鼠肝脏NF-κB信号通路的影响 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 本章小结 |
| 第5章 大蒜素对丙烯酰胺诱导的SD大鼠脾脏损伤的保护作用研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与仪器 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.2 实验试剂 |
| 5.2.3 实验仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 动物试验设计 |
| 5.3.2 生理生化指标检测 |
| 5.3.3 RT-qPCR检测mRNA表达 |
| 5.3.4 Western Blot检测蛋白表达 |
| 5.3.5 ELISA检测细胞因子 |
| 5.3.6 数据处理与统计 |
| 5.4 结果与分析 |
| 5.4.1 Allicin对AA诱导的SD大鼠脾脏表观状态的影响 |
| 5.4.2 Allicin对AA诱导的SD大鼠脾脏氧化应激反应的影响 |
| 5.4.3 Allicin对AA诱导的SD大鼠脾脏内质网应激反应的影响 |
| 5.4.4 Allicin对AA诱导的SD大鼠脾脏NLRP3炎性小体激活的影响 |
| 5.4.5 Allicin对AA诱导的SD大鼠脾脏MAPK信号通路的影响 |
| 5.4.6 Allicin对AA诱导的SD大鼠脾脏NF-κB信号通路的影响 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 本章小结 |
| 第6 章 结论 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 6.3 创新点 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（4）不同浓度艾烟环境对大鼠鼻粘膜OMP、iNOS蛋白表达及嗅觉功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词对照表 |
| 1 前言 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 专用实验用品 |
| 1.3 实验主要仪器 |
| 1.4 实验试剂 |
| 1.5 实验用品 |
| 1.6 软件 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 模拟的艾烟环境(高、中、低艾烟浓度) |
| 2.2 动物分组与干预 |
| 2.3 大鼠嗅觉行为学检测 |
| 2.4 取材于测定 |
| 3 统计学处理方法 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 大鼠一般状态观察 |
| 4.2 大鼠行为学检测 |
| 4.3 各组大鼠鼻粘膜结构变化观察 |
| 4.4 TUNEL检测各组大鼠鼻粘膜细胞凋亡 |
| 4.5 ELISA检测各组大鼠血清、鼻粘膜炎性因子含量比较及相关性分析 |
| 4.6 免疫组化方法观察OMP蛋白的表达 |
| 4.7 Real-time PCR检测OMP、iNOS mRNA的表达 |
| 4.8 免疫印迹法检测OMP、iNOS蛋白表达情况 |
| 5.讨论 |
| 5.1 对艾烟安全性的认识 |
| 5.2 艾烟与嗅觉系统的关系 |
| 5.3 实验方案的选择依据 |
| 5.4 实验指标选择依据 |
| 6 结论 |
| 7 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 艾烟的安全性效应研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）不同处理方式艾燃烧生成物调控ApoE-/-小鼠的血管内皮功能和机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 艾燃烧生成物的研究概况 |
| 综述二 艾灸及艾燃烧生成物治疗高脂血症并动脉粥样硬化的研究进展 |
| 综述三 血管内皮功能障碍与动脉粥样硬化的研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一章 不同处理方式艾燃烧生成物对ApoE~(-/-)小鼠脂质代谢影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二章 不同处理方式艾燃烧生成物对ApoE~(-/-)小鼠主动脉病理影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三章 不同处理方式艾燃烧生成物调控ApoE~(-/-)小鼠血管内皮功能影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第四章 不同处理方式艾燃烧生成物对eNOS活化相关信号通路影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 1. 关于本研究方案设计依据的讨论 |
| 1.1 关于实验动物的选择 |
| 1.2 艾烟组、滤过艾烟组、艾绒挥发组、艾叶精油组及相关参数的设置 |
| 2. 艾烟、滤过艾烟、艾绒挥发物及艾叶精油对AS疗效比较及分析 |
| 2.1 艾烟与滤过艾烟比较 |
| 2.2 艾烟与艾叶精油比较 |
| 2.3 艾烟与艾绒挥发物比较 |
| 结语 |
| 创新与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（6）三种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂对斑马鱼的毒性效应研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 农药对水体环境的污染 |
| 1.3 农药对水生生物的毒性 |
| 1.4 琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂 |
| 1.4.1 概述 |
| 1.4.2 苯并烯氟菌唑 |
| 1.4.3 吡唑萘菌胺 |
| 1.4.4 氟唑环菌胺 |
| 1.4.5 琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的毒理学研究情况 |
| 1.5 斑马鱼及其胚胎在毒理学中的应用 |
| 1.5.1 水生模式生物斑马鱼 |
| 1.5.2 斑马鱼在水生毒理学研究中的应用 |
| 1.6 课题目标和主要研究内容 |
| 第二章 三种杀菌剂对斑马鱼胚胎的急性毒性 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与仪器设备 |
| 2.2.1 实验试剂 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 斑马鱼的培养 |
| 2.3.2 斑马鱼胚胎的获取 |
| 2.3.3 胚胎急性暴露试验 |
| 2.3.4 统计方法 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 胚胎形态 |
| 2.4.2 胚胎孵化 |
| 2.4.3 胚胎存活率 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 三种杀菌剂对斑马鱼胚胎的发育毒性及机制 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与仪器设备 |
| 3.2.1 实验试剂 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 斑马鱼的培养与胚胎的获取 |
| 3.3.2 仔鱼体长 |
| 3.3.3 胚胎运动 |
| 3.3.4 胚胎心脏 |
| 3.3.5 胚胎细胞凋亡 |
| 3.3.6 胚胎氧化应激 |
| 3.3.7 胚胎琥珀酸脱氢酶 |
| 3.3.8 胚胎甲状腺激素 |
| 3.3.9 胚胎免疫相关基因 |
| 3.3.10 统计方法 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 仔鱼体长 |
| 3.4.2 胚胎运动 |
| 3.4.3 胚胎心脏 |
| 3.4.4 胚胎细胞凋亡 |
| 3.4.5 胚胎氧化应激 |
| 3.4.6 胚胎琥珀酸脱氢酶 |
| 3.4.7 胚胎甲状腺激素 |
| 3.4.8 胚胎免疫相关基因 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 三种杀菌剂对斑马鱼成鱼的急性毒性 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与仪器设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 斑马鱼的培养 |
| 4.3.2 成鱼急性致死试验 |
| 4.3.3 成鱼氧化应激 |
| 4.3.4 统计方法 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 成鱼存活率 |
| 4.4.2 成鱼氧化应激 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 三种杀菌剂对斑马鱼成年雌鱼的慢性毒性及机制 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与仪器设备 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 斑马鱼的培养 |
| 5.3.2 雌鱼慢性暴露试验 |
| 5.3.3 雌鱼氧化应激 |
| 5.3.4 雌鱼甲状腺激素 |
| 5.3.5 雌鱼性激素 |
| 5.3.6 雌鱼神经系统 |
| 5.3.7 雌鱼琥珀酸脱氢酶 |
| 5.3.8 组织病理学观察 |
| 5.3.9 统计方法 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 雌鱼氧化应激 |
| 5.4.2 雌鱼甲状腺激素 |
| 5.4.3 雌鱼性激素 |
| 5.4.4 雌鱼神经系统 |
| 5.4.5 雌鱼琥珀酸脱氢酶 |
| 5.4.6 雌鱼肠道组织形态 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 1 作者简历 |
| 2 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
| 学位论文数据集 |
（7）出生体重对仔猪免疫功能的影响及精氨酸的营养效应研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略符号表 |
| 第一部分 前言 |
| 第二部分 文献综述 |
| 1 低出生体重对养猪生产的影响 |
| 1.1 低出生体重的定义 |
| 1.2 低出生体重对生长性能和死亡率的影响 |
| 1.3 低出生体重对肠道健康的影响 |
| 1.4 低出生体重对免疫功能的影响 |
| 2 断奶对仔猪的影响 |
| 2.1 断奶应激发生的原因 |
| 2.2 断奶应激对仔猪肠道健康的影响 |
| 2.3 断奶应激对仔猪免疫功能的影响 |
| 2.4 断奶应激对仔猪抗氧化能力的影响 |
| 3 精氨酸在仔猪上的研究进展 |
| 3.1 精氨酸的结构、理化性质与代谢 |
| 3.2 仔猪精氨酸需要量研究 |
| 3.3 精氨酸对仔猪免疫功能的影响 |
| 第三部分 有待研究的问题、本研究的内容、目的意义和技术路线 |
| 1 有待研究的问题 |
| 2 本研究的内容、目的与意义 |
| 2.1 研究内容 |
| 2.2 研究目的 |
| 2.3 研究意义 |
| 3 试验技术路线 |
| 第四部分 试验研究 |
| 试验一 出生体重对新生仔猪免疫功能和肝脏抗氧化能力的影响研究 |
| 1 材料及方法 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 样品采集与处理 |
| 1.3 测定指标与方法 |
| 1.4 数据统计分析 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 出生体重对新生仔猪脏器指数的影响 |
| 2.2 出生体重对新生仔猪血清游离氨基酸含量的影响 |
| 2.3 出生体重对新生仔猪血清免疫球蛋白含量的影响 |
| 2.4 出生体重对新生仔猪肝脏抗氧化能力的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 出生体重对新生仔猪脏器指数的影响 |
| 3.2 出生体重对新生仔猪血清游离氨基酸含量的影响 |
| 3.3 出生体重对新生仔猪血清免疫球蛋白含量的影响 |
| 3.4 出生体重对新生仔猪肝脏抗氧化能力的影响 |
| 4 小结 |
| 试验二 出生体重和断奶对仔猪免疫功能、肠道健康和抗氧化能力的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物及设计 |
| 1.2 样品采集与处理 |
| 1.3 测定指标与方法 |
| 1.4 数据统计分析 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 出生体重和断奶对仔猪体重的影响 |
| 2.2 出生体重和断奶对仔猪血清指标的影响 |
| 2.3 出生体重和断奶对仔猪肝脏和空肠抗氧化基因的影响 |
| 2.4 出生体重和断奶对仔猪空肠形态的影响 |
| 2.5 出生体重和断奶对仔猪空肠紧密连接蛋白基因表达量的影响 |
| 2.6 出生体重和断奶对仔猪氨基酸转运的影响 |
| 2.7 出生体重和断奶对仔猪空肠免疫相关基因基因表达量的影响 |
| 2.8 出生体重和断奶对仔猪脾脏免疫相关基因基因表达量的影响 |
| 2.9 出生体重和断奶对仔猪胸腺免疫相关基因基因表达量的影响 |
| 2.10 出生体重和断奶对仔猪肝脏细胞因子的影响 |
| 2.11 出生体重和断奶对仔猪盲肠和结肠食糜微生物菌群的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 出生体重和断奶对仔猪免疫功能的影响 |
| 3.2 出生体重和断奶对仔猪肠道健康的影响 |
| 3.3 出生体重和断奶对仔猪抗氧化能力的影响 |
| 4 小结 |
| 试验三 饲粮添加ARG对LBW哺乳仔猪免疫功能和肝脏抗氧化能力的营养效应研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物与试验设计 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.3 试验饲粮 |
| 1.4 饲养管理 |
| 1.5 样品的采集与处理 |
| 1.6 测定指标与方法 |
| 1.7 数据统计分析 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪脏器指数的影响 |
| 2.2 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪血清免疫球蛋白的影响 |
| 2.3 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪脾脏和胸腺细胞因子基因表达的影响 |
| 2.4 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪脾脏和胸腺免疫相关基因表达的影响 |
| 2.5 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪脾脏和胸腺精氨酸代谢基因表达的影响 |
| 2.6 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪肝脏抗氧化能力的影响 |
| 2.7 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪肝脏抗氧化相关基因表达的影响 |
| 2.8 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪肝脏细胞因子基因表达的影响 |
| 2.9 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪脾脏精胺含量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪脏器指数的影响 |
| 3.2 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪免疫功能的影响 |
| 3.3 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪肝脏抗氧化功能的影响 |
| 3.4 饲粮添加Arg对LBW哺乳仔猪脾脏和胸腺精氨酸代谢的影响 |
| 4 小结 |
| 第五部分 本研究的全文讨论和结论 |
| 1 全文讨论 |
| 2 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）吸烟对雄性大鼠生殖毒性及子代学习记忆的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 吸烟对雄性大鼠的生殖毒性 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验材料 |
| 1.3 实验仪器和主要实验试剂 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 实验步骤 |
| 1.6 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 吸烟对雄性大鼠生殖毒性的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验材料 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 主要实验试剂 |
| 1.5 实验方法 |
| 1.6 实验步骤 |
| 1.7 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 吸烟对子代生长发育和学习记忆的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验材料 |
| 1.3 实验仪器和主要实验试剂 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 实验步骤 |
| 1.6 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四部分 吸烟对子代学习记忆的影响机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验材料 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 主要实验试剂 |
| 1.5 实验方法 |
| 1.6 实验步骤 |
| 1.7 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（9）系列褐藻胶寡糖通过调控sGC表达对大鼠肺动脉高压影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 大鼠肺动脉高压模型的建立 |
| 1 材料 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 仪器与设备 |
| 1.3 实验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物造模 |
| 2.2 大鼠心脏超声检测 |
| 2.3 大鼠血流动力学检测 |
| 2.3.1 右心导管的制备 |
| 2.3.2 插管步骤 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 造模情况 |
| 3.2 大鼠心脏超声检测结果 |
| 3.3 大鼠血流动力学检测结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 系列褐藻胶寡糖对大鼠肺动脉高压的影响研究 |
| 1 不同结构褐藻胶寡糖对大鼠肺动脉高压的影响研究 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 2 不同剂量褐藻胶寡糖对大鼠肺动脉高压的影响研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 系列褐藻胶寡糖改善大鼠肺动脉高压的机制研究 |
| 1 不同结构褐藻胶寡糖改善大鼠肺动脉高压的机制研究 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 2 不同剂量褐藻胶寡糖改善大鼠肺动脉高压的机制研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 结论与创新点 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
（10）肠道菌群的日粮铜水平响应对大鼠和苏淮哺乳仔猪生长及机体健康的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 高铜在畜牧生产中的应用进展 |
| 1 高铜与动物健康 |
| 1.1 铜的生物学意义 |
| 1.2 生理性铜代谢和吸收 |
| 1.3 铜的细胞摄取和分配 |
| 1.4 日粮高铜对动物健康的影响 |
| 2 高铜替代抗生素的使用 |
| 2.1 畜牧业生产中抗生素的使用及产生的问题 |
| 2.2 铜替代抗生素的使用 |
| 第二章 饲料中添加高铜所产生的问题及思考 |
| 1 铜抗性与抗生素耐药性 |
| 1.1 革兰氏阳性菌的铜稳态 |
| 1.2 革兰氏阳性菌的铜抗性 |
| 1.3 革兰氏阴性菌的铜稳态 |
| 1.4 质粒介导的革兰氏阴性菌的铜抗性 |
| 1.5 重金属与抗生素耐药性 |
| 2 思考 |
| 第三章 本研究目的、意义和主要内容 |
| 1 本研究的目的和意义 |
| 2 本研究的主要内容和技术路线 |
| 第二篇 试验部分 |
| 第一章 日粮铜水平对大鼠生长及肠道健康的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 日粮铜水平对大鼠生长性能的影响 |
| 2.2 日粮铜水平对大鼠血清生化指标的影响 |
| 2.3 日粮铜水平对大鼠回肠和结肠食糜铜含量的影响 |
| 2.4 日粮铜水平对大鼠小肠形态的影响 |
| 2.5 日粮铜水平对大鼠空、回肠组织氧化标记物和抗氧化酶活性的影响 |
| 2.6 大鼠血清、肠道食糜铜含量与血清炎症因子、肠道组织氧化标记物及抗氧化酶之间相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 日粮铜水平对大鼠肝脏铜离子代谢和氧化还原平衡的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 日粮铜水平对大鼠肝脏组织形态的影响 |
| 2.2 日粮铜水平对大鼠肝脏组织铜含量及氧化标记物水平、抗氧化酶活性的影响 |
| 2.3 日粮铜水平对大鼠肝脏铜转运相关蛋白基因mRNA表达水平的影响 |
| 2.4 大鼠肝脏及肠道食糜铜含量与血清炎症因子、肝脏铜转运相关蛋白基因mRNA表达水平、氧化标记物及抗氧化酶相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 日粮铜水平对大鼠肠道菌群的影响及其与机体炎症和氧化还原平衡的相关性 |
| 1 材料与方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 日粮铜水平对大鼠粪样微生物菌群丰度和多样性的影响 |
| 2.2 日粮铜水平对大鼠粪样微生物菌群组成和结构的影响 |
| 2.3 大鼠粪样微生物与血清炎症因子、空肠和回肠组织氧化标记物及抗氧化酶相关性分析 |
| 2.4 大鼠粪样微生物菌群多样性指数与肠道食糜铜含量、血清炎症因子、肠道与肝脏氧化标记物及抗氧化酶相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 无抗日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪生长健康及离子组谱的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪生长性能及腹泻率的影响 |
| 2.2 日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪血清生化指标的影响 |
| 2.3 铜水平对苏淮哺乳仔猪毛发、血清和粪便中各元素含量的影响 |
| 2.4 苏淮哺乳仔猪毛发、血清和粪样中各元素之间相关性分析 |
| 2.5 日粮铜水平对哺乳仔猪毛发、血清和粪样元素之间相关性模式的影响 |
| 2.6 仔猪血清生化指标与毛发、血清及粪样元素之间相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第五章 无抗日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪肠道菌群的影响及其与机体炎症和氧化还原平衡的相关性 |
| 1 材料与方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪粪样微生物多样性指数的影响 |
| 2.2 日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪粪样微生物组成和结构的影响 |
| 2.3 苏淮哺乳仔猪粪样微生物与血清炎症因子、氧化标记物及抗氧化酶、肝肾功能指标相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第六章 无抗日粮铜水平对苏淮哺乳仔猪粪样代谢产物的影响及其与机体离子平衡和肠道微生物相关性 |
| 1 材料与方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 粪样代谢物分析模型建立 |
| 2.2 哺乳仔猪粪便样品差异代谢物分析 |
| 2.3 代谢产物富集分析 |
| 2.4 哺乳仔猪离子组谱和粪样差异代谢产物之间相关性及富集分析 |
| 2.5 哺乳仔猪粪样微生物相对丰度和差异代谢产物之间相关性及富集分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第七章 总体讨论与全文结论 |
| 1 动物生产中高铜的使用 |
| 2 大鼠模型纯合日粮中高铜使用的评价 |
| 3 哺乳仔猪模型下无抗日粮高铜使用的评价 |
| 4 结合细菌铜抗性和耐药性的思考 |
| 5 全文结论 |
| 6 本研究的局限性 |
| 参考文献 |
| 本研究创新点 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
四、一氧化氮吸入对大鼠肝脏抗氧化能力的影响（论文参考文献）
- [1]间歇运动对PM2.5暴露致Wistar大鼠心脏损伤的影响及其机制研究[D]. 徐旻霄. 上海体育学院, 2021(09)
- [2]参附注射液调节NOS/NO信号通路保护LPS损伤的脐静脉血管内皮细胞的作用及机制[D]. 万函. 南昌大学, 2021(01)
- [3]大蒜素调控氧化应激及内质网应激改善膳食丙烯酰胺肝毒性机制研究[D]. 南博. 吉林大学, 2021(01)
- [4]不同浓度艾烟环境对大鼠鼻粘膜OMP、iNOS蛋白表达及嗅觉功能的影响[D]. 蒋志明. 安徽中医药大学, 2021(01)
- [5]不同处理方式艾燃烧生成物调控ApoE-/-小鼠的血管内皮功能和机制研究[D]. 姚琴. 北京中医药大学, 2020(04)
- [6]三种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂对斑马鱼的毒性效应研究[D]. 姚鸿州. 浙江工业大学, 2019(02)
- [7]出生体重对仔猪免疫功能的影响及精氨酸的营养效应研究[D]. 田一航. 四川农业大学, 2019
- [8]吸烟对雄性大鼠生殖毒性及子代学习记忆的影响及机制研究[D]. 姚艳玲. 新疆医科大学, 2019(04)
- [9]系列褐藻胶寡糖通过调控sGC表达对大鼠肺动脉高压影响的研究[D]. 胡怡. 青岛大学, 2018(07)
- [10]肠道菌群的日粮铜水平响应对大鼠和苏淮哺乳仔猪生长及机体健康的影响[D]. 张峰. 南京农业大学, 2017(07)