一、HPLC法测定蒜酶催化蒜氨酸生成大蒜辣素的配比及稳定性研究（论文文献综述）
杨亮[1]（2019）在《大蒜辣素及相关硫醚化合物分析方法的建立与应用研究》文中提出大蒜作为药食两用植物具有重要的研究价值。本研究运用超高效液相色谱技术、高效液相色谱技术、超高效液相色谱-质谱联用技术,建立分离分析大蒜辣素、二烯丙基三硫醚、二烯丙基二硫醚等成分的相关方法并应用于食品与药物分析,为高效完成大蒜辣素分析任务提供技术支持,为消费者合理选择大蒜食用方式和有效购买大蒜制品提供科学依据,为进一步完善大蒜质量分析和监控体系及大蒜复合制剂的合理用药提供实践参考。主要研究内容如下:（1）基于UPLC建立了一种以羟苯乙酯为替代对照品,快速测定鲜蒜中大蒜辣素的方法。采用Waters Acquity BEH C18（2.1 mm×100 mm,1.7μm）色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水溶液（30:70）为流动相,等度洗脱,检测波长:242 nm,流速:0.3 m L/min,进样量:1μL,柱温:30℃。结果表明,在优化的色谱条件下,大蒜辣素与羟苯乙酯在4 min内实现基线分离,在一定质量浓度范围内呈现良好的线性关系（r≥0.9998）,不同条件下相对校正因子的重现性良好,加标回收率为98.8-100.9%,定量下限为1.73～2.03 mg/kg,与HPLC法相比,分析时间明显缩短,分析效率更高,外标法与替代对照品法测定结果无显着性差异（P>0.05）。该方法的样品前处理简单,结果准确可靠,解决了因大蒜辣素对照品不稳定而测定困难的问题,极大地缩短了样品测定时间,为开发利用药用大蒜植物资源和完善药用大蒜质量分析体系提供了新的技术支持。（2）基于HPLC建立了一种以羟苯乙酯为替代对照品,同时检测大蒜及其制品中大蒜辣素、二烯丙基三硫醚、二烯丙基二硫醚3种功效成分的方法。采用反相C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,乙腈-0.02%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长:242 nm,流速:1.0 m L/min,柱温24℃。结果表明,通过优化流动相组成、洗脱方式、检测波长及柱温等参数,可使包括羟苯乙酯在内的4种物质在64 min内实现基线分离,并在一定质量浓度范围内呈现良好的线性关系（r≥0.9996）,不同条件下相对校正因子的重现性良好,加标回收率为98.5%～103.3%,定量下限为2.5～10.0 mg/kg。首次建立了一种基于HPLC同时检测大蒜及其制品中大蒜辣素、二烯丙基三硫醚、二烯丙基二硫醚3种功效成分的替代对照品法,该方法结果准确可靠,适用于多种大蒜制品的检测。（3）基于HPLC及UPLC-MS/MS研究大蒜辣素在体内与二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚的相关性以及肠溶微丸中蒜氨酸在体内生成大蒜辣素的可能性及转化率。HPLC法,采用反相C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,分别以乙腈-水（53∶47）、（65∶35）为流动相,等度洗脱,检测波长:242 nm,柱温:25℃,流速分别为:1 m L/min、1.2 m L/min。UPLC-MS/MS法,采用反相C18色谱柱（Waters ICQUITY UPLC?BEH,100×2.1 mm,1.7μm）,柱温:40℃,流速:0.15 m L/min,进样量:2μl,流动相:0.1%甲酸（A）-乙腈（B）,梯度洗脱;质谱离子化方式:ESI+,离子极性:正离子;毛细管电压:2 KV;锥孔电压:22 V;源温度:150℃;脱溶温度:350℃;氩气流速:50 L/Hr;氮气流速:600 L/Hr。大鼠灌胃给药大蒜辣素后,在大鼠血浆中未检测到二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚;灌胃给药相同蒜氨酸含量的蒜氨酸溶液和大蒜肠溶微丸溶液后,分别测得两种药物中蒜氨酸在大鼠体内的药代动力学参数,结果表明,肠溶微丸中约有34%的蒜氨酸被直接吸收,另有约66%的蒜氨酸在体内被转化。给药蒜氨酸溶液或大蒜肠溶微丸,在血浆中均未发现硫化氢相对于内源性硫化氢有明显增加,进一步给药24 h后测定大鼠组织中硫化氢水平,发现给药组的组织内的硫化氢水平普遍高于空白组,各组硫化氢水平的总体趋势为:大蒜肠溶微丸组>蒜氨酸溶液组>空白组。建立了用于定性测定大鼠血浆中二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚的HPLC方法和定量测定体内血浆及组织中蒜氨酸和硫化氢的UPLC-MS/MS方法;无法通过追踪测定二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚的含量而间接研究大蒜辣素的体内代谢过程;肠溶微丸中66%的蒜氨酸在体内的转化过程可能是先被蒜酶催化生成大蒜辣素,再经过一系列反应代谢为硫化氢。
宋百灵[2]（2017）在《大蒜蒜氨酸质量评价及小鼠静脉给药体内过程研究》文中认为目的:采用多国药典方法测定大蒜中化学成分含量,探讨测定指标之间的相关性;优化大蒜蒜氨酸分离纯化工艺;建立大蒜蒜氨酸及蒜氨酸的HPLC指纹图谱并对相关物质进行研究;研究小鼠注射蒜氨酸的体内过程,阐明蒜氨酸与H2S的相关性。方法:1.分别参照美国药典、印度药典、欧洲药典、英国药典、中国药典及课题组方法测定大蒜中指标成分含量并分析测定结果之间的相关性。2.在原有工艺的基础上,考察了树脂型号、上样液浓度和pH、洗脱液浓度对蒜氨酸分离的影响,并以乙醇重结晶,采用UV、IR、MS、NMR对所得的纯化产物进行结构确证并采用HPLC法测定纯度。3.采用HPLC柱前衍生化法建立大蒜蒜氨酸及蒜氨酸指纹图谱,并分析其中氨基酸类有关物质含量。4.建立生物样品中蒜氨酸与H2S同时测定的UPLC-MS/MS法,通过测定蒜氨酸经小鼠尾静脉注射后各时间点血浆及组织中蒜氨酸和H2S的含量,研究蒜氨酸在小鼠体内的药代动力学与组织分布及其与H2S的相关性。结果:1.美国药典、印度药典、课题组方法测得该批大蒜的蒜氨酸含量分别为2.97%、1.47%、3.10%,欧洲药典方法测得该批大蒜的潜在大蒜辣素含量为1.29%,中国药典方法测得该批大蒜的大蒜辣素含量为0.273%。2.以阳离子交换树脂为填料,将大蒜提取液浓缩并调节pH,上样,先用水洗脱,再用氨水洗脱,收集pH<7部分洗脱液,收率为74%。经两次重结晶得到的纯化产物经结构确证与蒜氨酸分子结构相符,熔点、旋光度等参数测定结果与文献报道一致,采用HPLC法测得蒜氨酸纯度达99.0%以上,总收率为2.8%。3.建立了大蒜蒜氨酸指纹图谱,确定了14个共有峰并指认了9个色谱峰,10批次大蒜蒜氨酸色谱图与典型指纹图谱的相似度>0.97;建立了蒜氨酸指纹图谱,确定了12个共有峰并指认了8个色谱峰,10批次蒜氨酸色谱图与典型指纹图谱的相似度>0.99。各批次大蒜蒜氨酸及蒜氨酸中氨基酸类有关物质含量差异较大。4.采用UPLC-MS/MS法同时测定小鼠血液及组织中蒜氨酸和H2S含量,蒜氨酸主要药动学参数为Ke:4.79×10-3min-1,T1/2:148.03min,Cmax:266.61μmol/L,AUC（0-120min）:9217.71min·μmol/L,AUC（0-∞）:13365.49min·μmol/L,Vd:6.99L/kg,CL:0.03L/min/kg。H2S主要药动学参数为Ke:4.59×10-3min-1,T1/2:154.34min,Cmax:0.452μmol/L,Tmax:20min,AUC（0-120min）:34.79min·μmol/L,AUC（0-∞）:79.33min·μmol/L,Vd:1208.22L/kg,CL:5.48L/min/kg。给药后小鼠血浆及各组织中均可测到蒜氨酸且H2S含量有不同程度增加,各组织中蒜氨酸含量在给药后1020min达最高值,峰值时各组织中蒜氨酸含量依次为:肾>心>肺>脾>脑>肝,给药后20min血浆中H2S含量达到峰值,给药后1535min相应组织中H2S含量达到峰值,达峰时各部位H2S增加量依次为:肾>肝>脑>脾>心>肺>血浆。结论:1.蒜氨酸是大蒜本身存在的指标性成分,课题组建立的方法与美国药典方法测定蒜氨酸含量,结果没有显着性差异,印度药典方法前处理灭酶不完全,蒜氨酸测定结果偏低,欧洲药典和英国药典与美国药典方法测定结果有相关性,大蒜辣素测定结果可间接反映大蒜中蒜氨酸含量,中国药典方法测定大蒜素的含量与蒜氨酸含量无相关性,不能反映大蒜中蒜氨酸含量,因此选择适宜的方法以蒜氨酸或大蒜辣素为指标控制大蒜品质更合理。2.本研究确定了最佳树脂型号、上样液浓度和pH、洗脱液浓度,明确了上样液调节pH的必要性,提高了蒜氨酸收率,采用乙醇重结晶纯化大蒜蒜氨酸,重结晶由原工艺的3次减少到2次,且提高了收率,降低了成本,为蒜氨酸申报新药的产业化奠定基础。3.本研究所建立的大蒜蒜氨酸及蒜氨酸指纹图谱符合提取物指纹图谱的技术要求,可用于大蒜蒜氨酸的生产过程控制及质量评价,研究的10批大蒜蒜氨酸中有关物质除氨基酸类外还有糖类,氨基酸类有关物质含量差异较大。4.本研究建立了UPLC-MS/MS法同时测定小鼠血液及组织中蒜氨酸和H2S含量,结果表明蒜氨酸可在小鼠体内代谢生成H2S,为后续蒜氨酸药效学研究奠定基础。
宋百灵,张唯,史荣梅,黄琼,李新霞,陈坚[3]（2016）在《大蒜化学成分不同测定方法比较及相关性探讨》文中提出目的:采用不同方法测定大蒜中化学成分含量并进行相关性探讨。方法:本实验参考美国药典大蒜中蒜氨酸含量测定方法,采用C18色谱柱,以乙腈-1,4-二氧六环-四氢呋喃-0.045 mol·L-1磷酸二氢钠溶液（25∶2.9∶2.2∶69.9）为流动相,供试品经灭酶、衍生化处理后在337 nm下测定蒜氨酸含量;参考印度药典大蒜中蒜氨酸含量测定方法,采用C18色谱柱,以0.1%磷酸为流动相,供试品经热水灭酶处理后,直接在210 nm下测定蒜氨酸含量;采用课题组建立的大蒜中蒜氨酸含量测定方法,采用C18色谱柱,以0.04%三氟乙酸为流动相,供试品经微波灭酶处理后,直接在214 nm下测定蒜氨酸含量;参考欧洲药典和英国药典大蒜粉中大蒜辣素含量测定方法,采用C18色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸（60∶40）为流动相,将供试品捣碎后,在254 nm下测定大蒜中大蒜辣素含量;参考中国药典大蒜中大蒜素含量测定方法,采用C18色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸（75∶25）为流动相,将供试品捣碎、回流处理后在210 nm下测定大蒜中大蒜素含量。结果:课题组建立方法与美国药典方法测得蒜氨酸含量没有显着性差异,印度药典方法灭酶不完全,蒜氨酸测定结果偏低,欧洲药典方法合理可行,大蒜辣素测定值可反应真实情况,中国药典方法测定大蒜素的结果与多种因素相关。结论:5种方法测定的指标不同,欧盟药典和英国药典以大蒜辣素为测定指标,中国药典以大蒜素为测定指标,美国药典、印度药典和课题组自建方法都以蒜氨酸为测定指标;但方法之间仍具有一定差异,灭酶方法不同:美国药典采用蒜酶抑制剂灭酶,印度药典用热水灭酶,课题组方法采用微波灭酶;方法原理不同:美国药典采用柱前衍生化法,印度药典和课题组方法则直接测定蒜氨酸含量。
马雪红[4]（2016）在《大蒜辣素与血液中蛋白相互作用及在大鼠的肠吸收特性研究》文中研究指明目的:从鲜蒜中提取大蒜辣素并进行分离纯化,与采用蒜氨酸与蒜酶合成大蒜辣素的方法进行比较,并对欧盟药典（EP8.0）中收载的大蒜辣素含量测定方法进行方法学验证;测定大蒜辣素与大鼠及人的血浆蛋白结合率;研究大蒜辣素在大鼠血液中的分布及与血液中蛋白相互作用;研究大蒜辣素在在大鼠不同肠段吸收特性。方法:1.取2kg鲜蒜去皮匀浆后,加入95%乙醇沉淀蛋白后,经过一系列浓缩提取分离纯化后得到较高浓度的大蒜辣素,采用欧盟药典中色谱方法,测定大蒜辣素注射液中大蒜辣素的含量并进行完整的方法学验证。2.以羟苯乙酯为替代对照品、甲醇和1%甲酸水溶液梯度洗脱,建立生物样品中大蒜辣素含量测定方法,采用超滤法测定大蒜辣素与大鼠及人的血浆蛋白结合率。3.采用荧光光谱法及同步荧光光谱法,以280nm为激发波长,扫描大蒜辣素与牛血红蛋白（Bovine Hemoglobin,BHB）、牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）及人血清白蛋白（Human Serum Albumin,HSA）作用后的荧光光谱图,并分别设定波长差Δλ=15及60nm扫描同步荧光光谱图,计算作用参数。4.采用尤斯室装置测定大蒜辣素在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收特性。结果:1.从鲜蒜中提取的大蒜辣素浓度最高可达8.27mg·mL-1;欧盟药典中测定大蒜辣素含量方法经方法学验证结果良好。2.在本实验色谱条件下测得1 mg羟苯乙酯相当于10.8 mg大蒜辣素,低、中、高三个浓度大蒜辣素溶液与大鼠和人血浆蛋白结合率分别为23.2%,19.8%,28.1%;15.5%,25.8%,40.0%,统计学检验结果表明大蒜辣素大鼠与人血浆蛋白结合率有有显着性差异（p<0.05）。3.大蒜辣素和蒜氨酸均不与直接与BHB作用,硫化氢可与BHB作用,结合常数在298和310 K时分别为Ksv:1.00×104 L·mol-1,R=0.9969;Ksv=1.94×104 L·mol-1,R=0.9979,最大动态荧光猝灭速率常数Kq分别是1.00×1012（298 K）和1.94×1012 L·（mol·s）-1（310 K）;大蒜辣素、蒜氨酸及硫化氢均可与BSA和HSA相互作用。4.大蒜辣素在大鼠四个肠段的表观渗透系数Papp>1×10-6 cm·s-1,不受药物浓度的影响,各肠段的吸收速率常数Ka随大蒜辣素浓度的增加而增加。结论:1.可直接从鲜蒜中提取分离得到较高浓度的大蒜辣素,后续再采用分子蒸馏的方式进一步纯化,相比于蒜氨酸蒜酶合成法,直接提取的方法可明显提高大蒜辣素溶液的浓度,EP8.0中大蒜辣素含量测定方法可用于本实验室测定。2.大蒜辣素的人血浆蛋白结合率大于大鼠的血浆蛋白结合率,大蒜辣素属于低度蛋白结合药物,有明显的种属差异。3.大蒜辣素及其前体物质蒜氨酸不直接与血红蛋白相互作用;大蒜辣素进入血液后部分进入红细胞后转化为硫化氢后与血红蛋白相互作用,部分与血浆蛋白结合。4.大蒜辣素在大鼠不同肠段中均有吸收,其中回肠为主要吸收部位,推测大蒜辣素的吸收率在20-70%之间。
李金芳[5]（2016）在《大蒜含硫化合物药动学及与H2S作用的相关性研究》文中进行了进一步梳理目的:通过研究大蒜含硫化合物,包括蒜氨酸（alliin）、大蒜辣素（allicin）、一硫二丙烯（DAS）、二硫二丙烯（DADS）、三硫二丙烯（DATS）在大鼠血液中的代谢、分布及药代动力学,确定其代谢产物及有无H2S产生,并比较各大蒜含硫化合物在大鼠血液中代谢产生的H2S的量,进一步阐明大蒜含硫化合物在体内的作用是经H2S介导的。方法:采用邻苯二甲醛（o-phthalaldehyde,OPA）-叔丁基硫醇柱前衍生高效液相荧光法,结合清醒动物采血系统,研究蒜氨酸经颈静脉注射后在清醒大鼠体内的药代动力学;建立HPLC-亚甲蓝法,将蒜氨酸及系列浓度大蒜辣素、DAS、DADS、DATS,分别加入大鼠血细胞中,37℃孵育10min后,检测各大蒜含硫化合物能否代谢为H2S,并比较产生的H2S的量;建立生物样品中H2S含量测定的UPLC-MS/MS法,大蒜辣素经小鼠尾静脉注射后,不同时间点取血液及组织,通过测定各时间点血浆及组织中H2S的含量,研究大蒜辣素在小鼠的药代动力学及其在小鼠组织中的分布情况。结果:1.大鼠以蒜氨酸50mg/kg颈静脉注射给药后,血浆中蒜氨酸的主要药动学参数为K:0.02min-1,T1/2:34.62min,Cmax:96.51μg/m L,Tmax:5.00min,AUC（0-120min）:4004.63min·μg/m L,AUC（0-∞）:4347.93min·μg/mL,Vd:615.35mL/kg,CL:12.60mL/min/kg。2.HPLC-亚甲蓝法用于血液中H2S的测定专属性较好,H2S的线性范围为0.880μmol/L,定量限为0.8μmol/L。将大蒜含硫化合物加入大鼠血细胞中孵育10min后,除蒜氨酸外均可产生H2S。产生H2S效率依次为:DATS>DADS=大蒜辣素>DAS。3.UPLC-MS/MS法较HPLC-亚甲蓝法灵敏度更高,可检测到血液中内源性H2S,H2S的线性范围为0.159.60μmol/L,定量限为0.15μmol/L。预实验时大蒜辣素经小鼠尾静脉注射后,血浆样品经质谱初步检测,大蒜辣素、DAS、DADS和DATS均未检测到,但衍生化后可检测到H2S,因此以H2S为指标进行大蒜辣素药代动力学及组织分布研究。大蒜辣素代谢产物H2S的主要药动学参数为K:0.086min-1,T1/2:8.926min,Cmax:0.968μmol/L,Tmax:15.000min,AUC（0-45min）:375.617min·μg/m L,AUC（0-∞）:376.233min·μg/m L,Vd:3808.050mL/kg,CL:320.561m L/min/kg。给药后,小鼠血浆和各组织中H2S的含量均有增加,15min后达血药浓度峰值,20min后各组织H2S含量也达最高值,H2S含量依次为:肾脏>脑>脾>肝脏>肺>心,肾脏H2S增加了367.35%。结论:本研究获得的蒜氨酸的药动学参数可用于后续蒜氨酸体内分布、代谢等动力学及生物利用度的研究。大蒜含硫化合物体外实验结果表明蒜氨酸在血液中不能代谢成H2S,而蒜氨酸与蒜酶反应后产生的大蒜辣素及其进一步降解产生的DAS、DADS和DATS可在血液中代谢产生H2S。体内实验进一步证实H2S是大蒜辣素代谢产物,推测大蒜辣素等含硫化合物通过H2S发挥生物活性作用,大蒜含硫化合物有望成为H2S供体的天然含硫化合物。
张海波[6]（2014）在《蒜氨酸/蒜酶二元释药体系相关研究》文中认为目的：本研究按照国家标准委的要求建立了蒜氨酸标准物质定值方法。国际上公认的大蒜的主要功效成分是蒜酶（EC4.1.1.4）催化蒜氨酸产生的大蒜辣素及其他大蒜所特有的含硫化合物。为了提高蒜酶的反应效率,本研究采用光纤传感过程分析技术研究蒜氨酸/蒜酶催化动力学。基于蒜氨酸/蒜酶催化动力学原理及二元释药系统研究思路,研制了蒜氨酸/蒜酶肠溶片,为了有效控制其质量,本研究建立了蒜氨酸/蒜酶肠溶片有效的质量控制方法。为阐明其作用过程和机理,本研究于体外对蒜氨酸在大鼠血液中的分布进行研究。方法：1.应用高效液相色谱面积归一化法确定蒜氨酸标准物质的纯度。对样品进行均匀性检验及长期稳定性检验,以此为基础采取9个实验室协作定值的方法对样品进行检测定值。2.采用光纤传感过程分析技术研究蒜氨酸/蒜酶催化动力学,根据朗伯—比北尔定律,建立了两种数学模型,一种是测定反应中各物质的吸光系数,另一种是将产物看作整体。根据紫外光谱,确定检测波长及探头规格,进一步测定各参数值。将参数录入工作站,系列浓度蒜氨酸与固定浓度蒜酶以体积比1：1进行混合反应,动态监测蒜氨酸浓度变化。导出数据,经Origin7.5软件及双倒数法处理最终求得催化动力学参数Km及Vmax。所测结果同HPLC方法求得的值进行比较。3.采用TLC法对蒜氨酸/蒜酶肠溶片中的蒜氨酸、潜在大蒜辣素进行定性鉴别；参照中国药典2010版,采用篮法检查制剂的体外释放度；采用HPLC法对制剂中的蒜氨酸、潜在大蒜辣素进行含量测定。4.采用邻苯二甲醛为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱建立血浆样品中蒜氨酸含量测定方法。分别用超滤法及微透析法测定蒜氨酸与大鼠体外血浆蛋白结合率,评价体内微透析取样的可行性。蒜氨酸加入大鼠血液中,经孵育后,分别测定全血、血浆及血细胞中蒜氨酸的含量,考察蒜氨酸在血液中的分布情况。结果：1.均匀性检验数据经F检验,样品均匀性良好。长期稳定性检验数据经t检验,表明在4℃C条件下蒜氨酸至少稳定43个月。最终定值结果由标准值和不确定度表示为（99.5±0.95）%。2.检测波长为230nm,探头规格为5mm。建立的数学模型可以有效地获取蒜氨酸／蒜酶催化反应过程曲线。3种方法Km值无显着性差异,HPLC方法测得的Vmax同数学模型测定结果有显着性差异。3.薄层色谱中蒜氨酸、潜在大蒜辣素特征斑点清晰；制剂在pH1.0盐酸溶液中2h未检出大蒜辣素,在pH6.8的磷酸盐缓冲液中开始释放,2h的累计释放度达70%以上；二批样品含蒜氨酸分别为51.58mg/片、55.24mg片,含大蒜辣素分别为13.73mg片、21.08mg片。辅料在整个研究中不干扰测定。4.经系统的方法学考察,所建立的含量测定方法具有较好的稳定性和重现性。超滤法与微透析方法测定的蛋白结合率无显着性差异,且与浓度呈依赖关系。血浆及血细胞中均有蒜氨酸分布,且血浆中的浓度较高；全血中浓度较加入量有所降低。结论：1.研制的蒜氨酸标准物质通过了国家标准委的审评并获得蒜氨酸国家标准样品证书,填补了国内空白。2.蒜氨酸／蒜酶系统催化反应很快,采用光纤传感过程分析技术实时监测催化反应过程,较传统取样分析操作简便,引入人为误差较小,提供了催化动力学研究的新方法。3.按照制剂规范建立了蒜氨酸／蒜酶肠溶片质量标准草案,可用于制剂研发及质量控制。4.体内微透析采样是可行的。蒜氨酸入血后可能存在代谢的情况,其代谢与血细胞的关联性及代谢产物有待进一步研究。
赵东升[7]（2012）在《大蒜药材物质群特征成分分析及质量研究》文中指出目的：大蒜（Allium Sativum L.）是具有数千年历史的药食两用植物，作为药材、食品补充剂、草药列入各国药典，但其质量控制标准存在较大差异，特别是中国药典中大蒜质量标准与国际标准还存在较大差距。本研究参照国外药典对大蒜质量进行研究，为2010版《中国药典》中大蒜质量标准修订提供参考；根据国内外公认的活性成分群，研究大蒜药材氨基酸类和含硫化合物类物质群TLC、HPLC指纹图谱，采用几种数学模式提取与表达指纹图谱提供的物质群特征成分信息，筛选出能够对不同葱属植物之间的真伪、不同产地大蒜之间的品质优劣进行评价的有效方法；探讨大蒜微乳薄层鉴别方法，并用于大蒜二维薄层研究，为大蒜薄层鉴别提供新技术。方法：1.采用TLC分别建立大蒜中氨基酸类和含硫化合物类物质群薄层指纹图谱，并对不同葱属植物、不同产地大蒜的物质群TLC指纹图谱进行相似度分析、聚类分析、主成分分析、数值分类法分析，提取与表达大蒜物质群TLC指纹特征。2.采用HPLC分别建立大蒜中氨基酸类和含硫化合物类物质群HPLC指纹图谱，采用相同的几种数学模型对两类物质群HPLC指纹图谱进行分析。3.参照国外药典分别建立大蒜薄层鉴别和含量测定方法，增加水分、总灰分、酸不溶性灰分检查项。撰写大蒜质量标准（草案）及起草说明。4.采用微乳薄层鉴别大蒜中氨基酸，并用于大蒜二维薄层。结果：1.大蒜氨基酸类和含硫化合物类物质群TLC指纹图谱的条件分别为正丁醇：冰醋酸：水=4：1：1和甲苯：乙酸乙酯=10：3，各化合物群得到有效分离。但各种数学方法对特征成分提取后未能有效分类。2.大蒜氨基酸类化合物采用异硫氰酸苯酯衍生化，18种氨基酸均达到有效分离；含硫化合物类物质在1%甲酸-甲醇梯度洗脱条件下获得10个有效分离色谱峰；各种数学方法提取数据进行分析，氨基酸类物质群夜相指纹图谱的数学表达未能将大蒜和其它葱属植物有效区分，但含硫化合物类物质群液相指纹图谱的数学表达可有效区分大蒜和其它葱属植物，且数值分类数学模型可以用于大蒜品质优劣的比较。3.分别以潜在大蒜辣素、蒜氨酸和精氨酸为指标成分建立了质量标准中薄层鉴别和含量测定方法；建立水分测定方法，规定含水量不超过65.0%；规定以干重计算，蒜氨酸、精氨酸、大蒜辣素含量分别不少于1.5%、1.0%、0.60%。4.大蒜微乳薄层鉴别最佳条件为20%SDS-正丁醇–正己烷（3.0g-17.3ml-3.0ml）-水微乳液展开系统；大蒜二维薄层鉴别以有机展开剂-微乳展开剂展开方式，各成分得到有效分离。结论：1.针对大蒜富含硫化物物质成分及具有特殊酶体系的特点，根据国内外研究现状，将酶灭活的氨基酸系统和酶激活的含硫化合物系统作为研究的活性物质群是合理的。建立的薄层和液相色谱条件可以分离大蒜中的氨基酸类物质和含硫化合物类物质，指纹图谱的建立和方法学验证符合指导原则。2.采用常用的几种数学模式对指纹图谱共有信息进行提取和表达，发现不同产地大蒜的氨基酸类物质群有高度相似性，且与同属植物也有一定相似性，但采用氨基酸类物质群的指纹特征不足以对大蒜进行区分。3.特征性蒜酶参与反应后产生的含硫化合物指纹图谱可以有效区分大蒜与其它葱属植物，甚至可以区分不同产地的大蒜，并可用于品质优劣的评价，有效区分大蒜与其它种植物应采用大蒜酶激活系统中含硫化合物的HPLC指纹特征。4.若要对氨基酸类物质群指纹图谱进行有效区分，应该提取指纹图谱中的差异特征信息，采用适当的数学模型或建立可行的数学模型对差异性信息进行提取和数字化表达。5.本研究中建立的大蒜药材质量标准与国际接轨，可以为中国药典中大蒜质量标准修订提供依据和参考。
周圆,郑春丽,朱家壁[8]（2011）在《大蒜辣素前体包芯片的制备》文中提出目的:制备大蒜辣素前体包芯片,使其口服后在短时间内促发酶促反应,生成大蒜辣素。方法:以蒜氨酸和蒜酶双层片为片芯,控酸颗粒为外层压制得到包芯片。并以人工胃液为介质小杯法考察包芯片大蒜辣素产率。结果:大蒜辣素前体包芯片在人工胃液中10 min内大蒜辣素产率>70%。结论:以蒜氨酸、蒜酶及控酸盐组合制备包芯片能够有效避免蒜酶在胃酸条件下失活,达到在体内获得较高产率大蒜辣素目的。
关明[9]（2011）在《新疆大蒜种质资源鉴定及规范化种植研究》文中研究指明目的:大蒜（Allium sativum L.）具有多重功效,是国内外医药保健品、食品加工等领域的研究热点。新疆地处大蒜的原产地——中亚,其地产大蒜是优势药用植物资源,在国际上被称为“高蒜氨酸大蒜”。本研究旨在阐明新疆地产大蒜与内地部分省区大蒜以及新疆不同品种大蒜之间的亲缘关系,为新疆优势药用大蒜的筛选提供分子水平的佐证;比较不同品种大蒜的品质优劣和差异,为筛选优质种质提供参考;制订操作规程,为大蒜规范化种植提供借鉴;为新疆优势药用大蒜的GAP规范化种植、优良育种及种质资源保护提供依据。方法:1)大蒜种质资源RAPD遗传多样性分析采用CTAB法提取大蒜基因组DNA,利用核酸蛋白分析仪与琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量;PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳筛选RAPD随机引物;优化PCR反应条件和反应程序,建立大蒜RAPD-PCR优化反应体系;利用Quantity One软件结合人工方法读带,建立0、1二元原始数据矩阵;采用POPGENE1.32软件计算样品的多态性位点比率、有效等位基因数（Ne）、Nei基因多样性指数（H）和Shannon信息指数（I）;采用NTSYSpc 2.10e软件计算样品的遗传相似系数,按UPGMA法进行聚类分析,建立树状图,并进行主成分分析,建立二维散点图。2)不同品种大蒜化学组分分析采用高效液相色谱法测定不同品种大蒜中蒜氨酸、潜在大蒜辣素的含量,并测定含水量,对测定结果进行聚类分析;采用傅里叶变换红外光谱仪获取各样品的红外谱图及不同波数下的透过率数据,运用主成分分析及聚类分析对谱图数据进行分析;筛选和优化高效薄层色谱条件,建立大蒜高效薄层色谱指纹图谱,利用指纹图谱解决方案软件确认共有峰,结合主成分分析与聚类分析进行相似度比较。3)不同品种大蒜的显微鉴别制作石蜡切片,借助显微照片对大蒜鳞芽组织细胞及鳞芽表皮细胞进行观察和比较鉴别。4)大蒜规范化种植初步研究采用环境监测方法和仪器分析技术对吉木萨尔县大蒜种植基地进行环境质量监测与评价;采用高效液相色谱法对大蒜活性成分进行动态检测;采用高效液相色谱法、高效薄层色谱法等修订大蒜药材质量标准（草案）的部分内容;通过田间跟踪记录并结合上述实验结果与长期实践经验制订大蒜规范化种植操作规程（草案）。结果:1)大蒜种质资源RAPD遗传多样性分析PCR反应总体积25μl,模板DNA 50 ng,引物10 pmol,dNTP 10μmol,MgCl2 50μmol,Taq DNA聚合酶1.5U,10xPCR反应缓冲液2.5μl,以重蒸馏水补充至25μl;反应程序为94℃预变性3 min,（94℃变性45 s,36℃退火1min,72℃延伸l.5min）,共40个循环,72℃最终延伸7min,4℃保存;从47个RAPD随机引物筛选出条带清晰、多态性明显、重复性好的10个引物,多态性比率为68.29%,Ne =1.2993,H = 0.1916,I = 0.2942;通过分析大蒜RAPD指纹图谱中的条带,可将样品聚为第Ⅰ和第Ⅱ两大类。新疆地产大蒜样品聚为第Ⅰ大类,包括四类:第一类以天山以北地区的样品为主,蒜氨酸含量一般;第二类以天山以南地区的样品为主,蒜氨酸含量高;第三类仍以天山以南地区的样品为主,蒜氨酸含量较高;第四类以新疆东部地区的样品为主,蒜氨酸含量较低;山东、河南等内地大蒜样品聚为第Ⅱ大类,即第五类。2)不同品种大蒜化学组分分析不同品种大蒜的蒜氨酸、潜在大蒜辣素等活性成分含量差异显着,新疆天山以南地区阿合奇县与乌什县的大蒜样品活性成分含量最高,为优势药用大蒜,按蒜氨酸、潜在大蒜辣素含量的高低可聚为四至五类;傅里叶变换红外谱图数据分析显示不同品种大蒜化学组分整体信息的相似度为76.3%～99.8%,样品可分为五大类,新疆天山以北伊犁地区样品聚为一类,天山以南地区样品聚为一类,东部地区样品聚为一类,内地样品基本聚为一类;确定正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水（3:1:1:1）为高效薄层色谱展开剂,共指认9个特征色谱峰,不同品种大蒜在化学组分相对含量和比例上有不同程度差异,样品可分为五大类,新疆境内的大蒜样品基本以天山山脉为分化基础。3)不同品种大蒜的显微鉴别通过显微照片观察和测量发现:天山以南地区大蒜样品的鳞芽表皮细胞及气孔较大,天山以北地区大蒜样品的鳞芽表皮细胞及气孔大小居中,而新疆东部地区与内地大蒜样品则偏小;大蒜鳞芽组织细胞的大小呈现相同规律。4)大蒜规范化种植初步研究吉木萨尔县大蒜种植基地环境质量良好,达到大气环境质量一级标准、土壤质量二级标准、农用灌溉水质量标准,大蒜样品中Ca、Se含量高,As含量未超过国家标准限值,Mn、Cr含量低,未检出Pb、Cd;动态检测结果表明,大蒜逐渐成熟的8月至10月间,9月时的蒜氨酸含量达到了最高值,含水量降至最低,储存期内的12月,潜在大蒜辣素的含量达到最高值;确定0.04%三氟乙酸为高效液相色谱流动相,蒜氨酸为对照品,大蒜供试品高效薄层色谱中,在与蒜氨酸及L-精氨酸对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,大蒜药材水分均值为58.2%,酸不溶性灰分均值为0.38%;初步实施操作规程后,效果良好,三年间大蒜中蒜氨酸的含量有所回升。结论:1)地理和环境因素是影响大蒜遗传变异的主要因素。不同品种的大蒜具有较为丰富的遗传多样性,新疆境内的大蒜样品保持较近的遗传关系,并主要以天山山脉为分化基础,而山东、河南等内地大蒜样品与新疆境内大蒜样品的亲缘关系较远。2)化学组分分析的聚类结果与RAPD分子标记遗传多样性分析的聚类结果保持一致。新疆境内天山以南地区乌什县和阿合奇县的大蒜样品药用优势明显,可以作为优质种质进行进一步研究开发。3)吉木萨尔县大蒜种植基地符合GAP规定的基地环境质量要求,适宜发展成为大蒜GAP种植基地;建议9月进行大蒜采收,12月进行原料加工;大蒜药材质量标准应以蒜氨酸为对照品,并需增加水分和酸性不溶性灰分两项检查内容;操作规程规范了吉木萨尔县大蒜种植基地的生态环境和大蒜栽培技术等技术要求,可以继续完善并推广。
徐颖,尹宗宁[10]（2011）在《蒜氨酸、蒜酶及其混合物的体外抗氧化活性研究》文中认为目的研究蒜氨酸、蒜酶及其混合物的体外抗氧化活性。方法建立超氧阴离子自由基（.O2-）和羟基自由基（.OH）产生体系,应用Fe2+引发的卵磷脂过氧化体系,分别采用羟胺法、水杨酸法及硫代巴比妥酸法测定蒜氨酸、蒜酶及其混合物对.O2-和.OH的清除能力及抗脂质过氧化能力。结果蒜氨酸,蒜酶及其混合物对.O2-和.OH具有良好的清除作用,其最大清除率分别为40.94%、55.75%、88.47%及21.65%、99.38%、98.72%;对脂质过氧化有良好的抑制作用,最大抑制率分别为10.82%、33.88%、79.88%。结论蒜氨酸、蒜酶及其混合物有较强的体外抗氧化活性,混合物比分别单独使用的抗氧化作用更强。
二、HPLC法测定蒜酶催化蒜氨酸生成大蒜辣素的配比及稳定性研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、HPLC法测定蒜酶催化蒜氨酸生成大蒜辣素的配比及稳定性研究（论文提纲范文）
（1）大蒜辣素及相关硫醚化合物分析方法的建立与应用研究（论文提纲范文）
| 中英文缩写词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 大蒜 |
| 1.2 大蒜的活性作用 |
| 1.3 大蒜的主要活性成分 |
| 1.3.1 蒜氨酸(Alliin) |
| 1.3.2 蒜酶(Alliinase) |
| 1.3.3 大蒜辣素(Allicin) |
| 1.3.4 二烯丙基三硫醚(Allitrid) |
| 1.3.5 二烯丙基二硫醚(Diallyl disulfide) |
| 1.3.6 二烯丙基硫醚(Diallyl sulfide) |
| 1.3.7 硫化氢 |
| 1.4 大蒜辣素及相关硫醚化合物检测方法 |
| 1.4.1 大蒜辣素 |
| 1.4.2 二烯丙基三硫醚及其它硫醚化合物 |
| 1.5 大蒜辣素体内代谢研究 |
| 1.6 蒜氨酸体内代谢研究 |
| 1.7 研究目的及意义 |
| 2 大蒜辣素UPLC替代对照品检测方法的建立及实际样品测定 |
| 2.1 实验部分 |
| 2.1.1 仪器、材料与试剂 |
| 2.1.2 对照品溶液的制备 |
| 2.1.3 色谱条件 |
| 2.1.4 鲜蒜供试品溶液的制备 |
| 2.2 结果与讨论 |
| 2.2.1 色谱条件的优化 |
| 2.2.2 线性范围与定量下限 |
| 2.2.3 相对校正因子的测定 |
| 2.2.4 加标回收率与精密度 |
| 2.2.5 重复性试验 |
| 2.2.6 稳定性试验 |
| 2.2.7 相对校正因子耐用性考察 |
| 2.2.8 相对保留时间校正因子的测定 |
| 2.2.9 样品测定 |
| 2.3 小结 |
| 3 基于HPLC同时测定大蒜及其制品中三种功效成分 |
| 3.1 实验部分 |
| 3.1.1 仪器、材料与试剂 |
| 3.1.2 对照品溶液的制备 |
| 3.1.3 色谱条件 |
| 3.1.4 供试品溶液的制备 |
| 3.2 结果与讨论 |
| 3.2.1 色谱条件的优化 |
| 3.2.2 线性范围与定量下限 |
| 3.2.3 相对校正因子的测定 |
| 3.2.4 相对校正因子耐用性考察 |
| 3.2.5 相对保留时间校正因子的测定 |
| 3.2.6 加标回收率与精密度 |
| 3.2.7 实际样品分析 |
| 3.3 小结 |
| 4 大蒜肠溶制剂在大鼠体内代谢研究 |
| 4.1 实验部分 |
| 4.1.1 仪器、材料与试剂 |
| 4.1.2 溶液的制备 |
| 4.1.3 动物实验 |
| 4.1.4 样品前处理 |
| 4.1.5 色谱、质谱条件 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 UPLC-MS-MS方法学验证 |
| 4.2.2 样品测定 |
| 4.2.3 组织样品中H_2S测定 |
| 4.3 小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的论文 |
| 在校期间参与的科研项目 |
| 致谢 |
（2）大蒜蒜氨酸质量评价及小鼠静脉给药体内过程研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容 |
| 1 大蒜化学成分5种测定方法比较及相关性探讨 |
| 1.1 仪器、药品与试剂 |
| 1.2 方法与结果 |
| 1.3 讨论 |
| 2 大蒜蒜氨酸分离纯化工艺优化 |
| 2.1 仪器、药品与试剂 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.3 讨论 |
| 3 大蒜蒜氨酸、蒜氨酸指纹图谱及有关物质研究 |
| 3.1 仪器、药品与试剂 |
| 3.2 方法与结果 |
| 3.3 讨论 |
| 4 UPLC-MS/MS法研究蒜氨酸体内过程 |
| 4.1 仪器、药品与试剂 |
| 4.2 方法与结果 |
| 4.3 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 新疆医科大学硕士研究生学位论文 导师评阅表 |
（3）大蒜化学成分不同测定方法比较及相关性探讨（论文提纲范文）
| 1 仪器与试药 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 水分测定 |
| 2.2 欧洲药典与英国药典方法测定 |
| 2.2.1羟苯丁酯替代对照品溶液的配制 |
| 2.2.2供试品溶液的制备 |
| 2.2.3色谱条件 |
| 2.2.4测定方法与结果 |
| 2.2.5蒜氨酸反应程度的考察 |
| 2.3 美国药典方法测定 |
| 2.3.1试液的配制 |
| 2.3.2对照品溶液的配制 |
| 2.3.3供试品溶液的配制 |
| 2.3.4 色谱条件 |
| 2.3.5结果 |
| 2.3.6蒜酶抑制剂灭酶效果的考察 |
| 2.4 印度药典方法测定[15] |
| 2.4.1对照品溶液的制备 |
| 2.4.2供试品溶液的制备 |
| 2.4.3色谱条件 |
| 2.4.4结果 |
| 2.4.5蒜酶灭活程度考察 |
| 2.5 中国药典方法测定[14] |
| 2.5.1对照品溶液的制备 |
| 2.5.2供试品溶液的制备 |
| 2.5.3色谱条件 |
| 2.5.4测定结果 |
| 2.5.5大蒜素转化量的考察 |
| 2.5.6生成大蒜辣素条件的考察 |
| 2.6 课题组建立方法测定[18] |
| 2.6.1对照品溶液的制备 |
| 2.6.2供试品溶液的制备 |
| 2.6.3色谱条件 |
| 2.6.4 测定方法 |
| 2.6.5 微波灭酶效果的考察 |
| 3 讨论 |
| 3.1 测定指标之间的相关性及差异分析 |
| 3.2 灭酶方法比较 |
| 3.3 有关蒜氨酸的转化率 |
| 4 小结 |
（4）大蒜辣素与血液中蛋白相互作用及在大鼠的肠吸收特性研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容 |
| 1. 鲜蒜中大蒜辣素的提取分离纯化及含量测定方法学验证 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.2 方法与结果 |
| 1.3 讨论 |
| 2. 替代对照品HPLC法测定大蒜辣素大鼠及人血浆蛋白结合率 |
| 2.1 仪器、试药和动物 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.3 讨论 |
| 3. 大蒜辣素在大鼠血液中分布及与蛋白的相互作用研究 |
| 3.1 仪器与试剂 |
| 3.2 方法与结果 |
| 3.3 讨论 |
| 4. 尤斯灌流模型研究大蒜辣素在大鼠肠道的吸收 |
| 4.1 仪器、试药和动物 |
| 4.2 方法与结果 |
| 4.3 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学位论文 |
| 导师评阅表 |
（5）大蒜含硫化合物药动学及与H2S作用的相关性研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容 |
| 1.蒜氨酸在清醒大鼠体内的药动学研究 |
| 1.1 仪器、药品与试剂 |
| 1.2 方法与结果 |
| 1.3 讨论 |
| 2.大蒜含硫化合物在大鼠血液中代谢H_2S的比较 |
| 2.1 仪器、药品与试剂 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.3 讨论 |
| 3.以H_2S为指标UPLC-MS/MS研究大蒜辣素在小鼠血液中药动学及组织分布 |
| 3.1 药品、试剂与仪器 |
| 3.2 方法与结果 |
| 3.3 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学位论文 |
| 导师评阅表 |
（6）蒜氨酸/蒜酶二元释药体系相关研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究内容 |
| 1 蒜氨酸标准物质的定值研究 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 方法与结果 |
| 1.3 讨论 |
| 2 光纤传感过程分析技术研究蒜氨酸/蒜酶催化动力学 |
| 2.1 仪器与试药 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.3 讨论 |
| 3 蒜氨酸/蒜酶肠溶片质量研究及质量标准建立 |
| 3.1 仪器、试药 |
| 3.2 方法与结果 |
| 3.3 讨论 |
| 4 体外研究蒜氨酸在大鼠血液中的分布 |
| 4.1 仪器、试药和动物 |
| 4.2 方法与结果 |
| 4.3 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（7）大蒜药材物质群特征成分分析及质量研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究内容 |
| 1. 大蒜药材物质群薄层色谱指纹特征的提取与表达 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 方法与结果 |
| 1.2.1 大蒜药材物质群薄层色谱鉴别方法的建立 |
| 1.2.1.1 硅胶 G 薄层板的制备 |
| 1.2.1.2 大蒜药材氨基酸类物质群薄层色谱鉴别方法的建立 |
| 1.2.1.3 大蒜药材含硫化合物类物质群薄层色谱鉴别方法的建立 |
| 1.2.2 大蒜药材物质群薄层色谱指纹图谱的建立 |
| 1.2.3 大蒜药材物质群薄层色谱指纹特征的提取与表达 |
| 1.2.3.1 相似度分析 |
| 1.2.3.2 聚类分析 |
| 1.2.3.3 主成分分析 |
| 1.2.3.4 数值分类法分析 |
| 1.3 讨论 |
| 2. 大蒜药材物质群高效液相色谱色谱指纹特征的提取与表达 |
| 2.1 仪器与试药 |
| 2.2 方法与结果 |
| 2.2.1 大蒜药材物质群高效液相色谱方法的建立 |
| 2.2.1.1 大蒜药材氨基酸类物质群高效液相色谱方法的建立 |
| 2.2.1.2 大蒜药材含硫化合物类物质群高效液相色谱方法的建立 |
| 2.2.2 大蒜药材物质群高效液相色谱指纹图谱的建立 |
| 2.2.3 大蒜药材物质群高效液相色谱指纹特征的提取与表达 |
| 2.2.3.1. 相似度分析 |
| 2.2.3.2 聚类分析 |
| 2.2.3.3 主成分分析 |
| 2.3 讨论 |
| 3. 大蒜药材质量研究 |
| 3.1 仪器与试药 |
| 3.2 方法与结果 |
| 3.3 讨论 |
| 4. 大蒜药材微乳薄层色谱鉴别及其二维薄层色谱研究 |
| 4.1 仪器与试药 |
| 4.2 方法与结果 |
| 4.3 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（8）大蒜辣素前体包芯片的制备（论文提纲范文）
| 仪器与试药 |
| 方法与结果 |
| 1 包芯片的制备 |
| 1.1 蒜氨酸和蒜酶双层片芯的制备 |
| 1.2 外层控酸颗粒的制备 |
| 1.2.1 控酸层颗粒处方筛选 |
| 1.2.2 控酸层颗粒的制备 |
| 1.2.3 Rossett-Rice体外抗酸实验 |
| 1.3 包芯片制备 |
| 2 包芯片体外溶出考察 |
| 2.1 蒜氨酸分析方法[19-20] |
| 2.1.1 色谱条件 |
| 2.1.2 标准曲线的建立 |
| 2.1.3 方法精密度和回收率试验 |
| 2.1.4 外标溶液的配制 |
| 2.2 大蒜辣素分析方法[21] |
| 2.2.1 色谱条件 |
| 2.2.2 内标溶液的配制 |
| 2.2.3 计算方法 |
| 2.3 蒜氨酸-蒜酶片芯溶出试验 |
| 2.4 包芯片溶出试验 |
| 3 溶出试验结果 |
| 3.1 蒜氨酸-蒜酶片芯溶出结果 |
| 3.2 包芯片溶出结果 |
| 讨 论 |
（9）新疆大蒜种质资源鉴定及规范化种植研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 大蒜种质资源RAPD 遗传多样性分析 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 基因组DNA 的提取及质量与浓度检测 |
| 2.2 PCR 反应条件与反应程序的确定 |
| 2.3 随机引物的筛选 |
| 2.4 大蒜RAPD 遗传多样性分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 基因组DNA 提取方法的选择 |
| 3.2 分子标记技术RAPD 的可靠性 |
| 3.3 与相关文献报道的比较 |
| 4 小结 |
| 第二部分 不同品种大蒜化学组分分析 |
| 一、不同品种大蒜中活性成分比较分析 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 色谱分离与分析 |
| 2.2 含水量测定 |
| 2.3 蒜氨酸含量测定 |
| 2.4 潜在大蒜辣素含量测定 |
| 2.5 聚类分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 蒜氨酸的含量测定 |
| 3.2 潜在大蒜辣素的含量测定 |
| 3.3 鲜蒜水分测定 |
| 3.4 含量测定结果的统计分析 |
| 3.5 与分子标记鉴定结果的比较 |
| 4 小结 |
| 二、不同品种大蒜红外光谱指纹图谱比较分析 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 方法学考察 |
| 2.2 大蒜FTIR 指纹图谱 |
| 2.3 样品FTIR 谱图快速比较 |
| 2.4 数据处理与统计分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 三、不同品种大蒜高效薄层色谱指纹图谱比较分析 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 色谱条件的优化筛选 |
| 2.2 方法学考察 |
| 2.3 薄层色谱指纹图谱及技术参数 |
| 2.4 大蒜药材薄层色谱指纹图谱的相似度分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 不同品种大蒜的显微鉴别 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 大蒜石蜡切片制作工艺的确定 |
| 2.2 不同品种大蒜石蜡切片显微鉴别 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四部分 大蒜规范化种植初步研究 |
| 一、大蒜种植基地环境质量评价 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 种植基地概况及主要仪器与试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 种植基地灌溉水环境质量监测与评价 |
| 2.2 种植基地土壤环境质量监测与评价 |
| 2.3 种植基地空气环境质量监测与评价 |
| 2.4 大蒜中微量元素含量 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 二、大蒜活性成分动态检测 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 含水量变化 |
| 2.2 蒜氨酸含量变化 |
| 2.3 潜在大蒜辣素含量变化 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 三、大蒜药材质量标准（草案）的修订 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 材料、试剂与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 薄层色谱鉴别 |
| 2.2 检查 |
| 2.3 蒜氨酸含量测定 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 四、大蒜规范化种植操作规程（草案） |
| 1 主要内容与适用范围 |
| 1.1 主要内容 |
| 1.2 适用范围 |
| 2 引用标准 |
| 3 生态环境 |
| 3.1 地理位置 |
| 3.2 气候概况 |
| 3.3 土壤概况 |
| 3.4 水资源及水质概况 |
| 3.5 生态环境质量现状评价 |
| 4 种质特性 |
| 4.1 种质来源 |
| 4.2 形态特征 |
| 4.3 生育特性 |
| 4.4 生态适应性 |
| 5 栽培技术 |
| 5.1 播前准备 |
| 5.2 播种 |
| 5.3 田间管理 |
| 5.4 病虫害防治 |
| 6 采收、加工、贮藏与包装运输 |
| 6.1 采收 |
| 6.2 加工 |
| 6.3 留种 |
| 6.4 贮藏 |
| 6.5 包装 |
| 6.6 运输 |
| 7 实施栽培技术的成效 |
| 8 大蒜药材质量标准（草案） |
| 结论 |
| 创新 |
| 不足 |
| 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
| 攻读博士学位期间承担的科研项目 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（10）蒜氨酸、蒜酶及其混合物的体外抗氧化活性研究（论文提纲范文）
| 1 实验部分 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 方法与结果 |
| 1.2.1 超氧阴离子自由基 (·O2-) 清除能力的测定 |
| 1.2.2 羟基自由基 (·OH) 清除能力的测定 |
| 1.2.3 抗脂质过氧化活性的测定 |
| 1.2.4 统计方法 |
| 2 讨论 |
四、HPLC法测定蒜酶催化蒜氨酸生成大蒜辣素的配比及稳定性研究（论文参考文献）
- [1]大蒜辣素及相关硫醚化合物分析方法的建立与应用研究[D]. 杨亮. 新疆师范大学, 2019(05)
- [2]大蒜蒜氨酸质量评价及小鼠静脉给药体内过程研究[D]. 宋百灵. 新疆医科大学, 2017(05)
- [3]大蒜化学成分不同测定方法比较及相关性探讨[J]. 宋百灵,张唯,史荣梅,黄琼,李新霞,陈坚. 药物分析杂志, 2016(04)
- [4]大蒜辣素与血液中蛋白相互作用及在大鼠的肠吸收特性研究[D]. 马雪红. 新疆医科大学, 2016(12)
- [5]大蒜含硫化合物药动学及与H2S作用的相关性研究[D]. 李金芳. 新疆医科大学, 2016(10)
- [6]蒜氨酸/蒜酶二元释药体系相关研究[D]. 张海波. 新疆医科大学, 2014(03)
- [7]大蒜药材物质群特征成分分析及质量研究[D]. 赵东升. 新疆医科大学, 2012(02)
- [8]大蒜辣素前体包芯片的制备[J]. 周圆,郑春丽,朱家壁. 中国新药杂志, 2011(23)
- [9]新疆大蒜种质资源鉴定及规范化种植研究[D]. 关明. 新疆医科大学, 2011(06)
- [10]蒜氨酸、蒜酶及其混合物的体外抗氧化活性研究[J]. 徐颖,尹宗宁. 华西药学杂志, 2011(04)
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