一、人胃癌组织中端粒酶活性研究（论文文献综述）
夏红[1]（2020）在《DADS下调DJ-1对人胃癌SGC7901细胞EMT、侵袭和抗药性的影响及其作用机制》文中认为二烯丙基二硫（diallyl disulfide,DADS）是大蒜中烯丙基硫化物的一种疏水性的有效药用成分,对多种肿瘤有明显的抑制作用,是一种很有开发潜力的抗肿瘤候选药物。人类DJ-1基因,又名RS/PARK7/CAP1,是PARK7基因编码的属于肽酶C56的蛋白质家族的一个成员。参与转录调控、氧化应激反应、线粒体调节、炎症以及糖基化损伤等许多生物学过程,在多种肿瘤中高表达,调控肿瘤进展、临床侵袭性、分化、癌细胞形态和药物敏感性,在癌症中扮演着关键角色。我们前期在鉴定二烯丙基二硫（diallyl disulfide,DADS）诱导白血病HL-60细胞分化的差异蛋白质中,发现DJ-1蛋白明显下调。本研究在DADS抑制人胃癌细胞增殖与迁移侵袭的基础上,进一步探讨DADS下调DJ-1负调控PTEN/Akt通路抑制人胃癌细胞EMT与侵袭和抗药性,证实DJ-1是DADS抑制人胃癌细胞EMT与侵袭和抗药性的作用靶点之一,为临床胃癌分子靶向治疗提供理论依据。第一部分:DJ-1、PTEN与p-Akt在胃癌中的表达及临床病理意义目的:探讨DJ-1、PTEN与p-Akt在胃癌中的表达及相应的临床病理意义。方法:采用免疫组织化学方法分别检测组织芯片中胃癌组织、癌旁组织以及正常胃粘膜组织中DJ-1、PTEN与p-AKT的表达。结果:DJ-1和p-Akt在胃癌组织中均呈高表达,与正常胃黏膜与癌旁组织相比,差异具有显着性意义（P<0.05）。并且,在癌旁组织表达明显高于正常胃黏膜（P<0.05）。在淋巴结转移组表达明显高于无淋巴结转移组（P<0.05）。在Ⅰ+Ⅱ期表达明显低于Ⅲ+Ⅳ期（P<0.05）。但在高分化、中分化、低分化胃腺癌中表达无显着性差异（P>0.05）。PTEN在正常胃粘膜组织中表达明显高于癌旁组织与胃癌组织（P<0.05）,在癌旁组织表达显着高于胃癌组织（P<0.05）。在淋巴结转移组明显低于无淋巴结转移组（P<0.05）。在Ⅰ+Ⅱ期表达明显高于Ⅲ+Ⅳ期（P<0.05）。而在高分化、中分化、低分化胃腺癌的表达具有显着差异（P<0.05）。三种蛋白在不同年龄和性别间表达无显着性差异（P>0.05）。Kaplan-Meier生存分析表明,DJ-1高表达与胃癌患者的5年总体生存率呈负相关（P<0.05）。而PTEN高表达与胃癌患者的5年总体生存率呈正相关（P<0.05）。小结:1.DJ-1与p-Akt蛋白在胃癌组织中的表达与胃癌发生、淋巴结转移和TNM分期有关。2.PTEN在胃癌组织中的表达与胃癌分化、淋巴结转移和TNM分期有关。3.DJ-1在胃癌组织中的表达与胃癌患者的生存率呈负相关;PTEN在胃癌组织中的表达与胃癌患者的生存率呈正相关。第二部分:DADS下调DJ-1负调控PTEN/Akt通路抑制SGC-7901细胞增殖、EMT与侵袭目的:探讨DADS对DJ-1高表达人胃癌SGC-7901细胞系增殖、EMT和侵袭的影响。方法:建立DJ-1稳定高表达的SGC-7901细胞系,分别采用CCK-8、划痕实验、侵袭实验、q RT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光等分析DADS对DJ-1高表达人胃癌SGC-7901细胞增殖、EMT和侵袭的作用。结果:Western blot检测发现,经DADS 30mg/l处理24h后的各组胃癌细胞,和对照组相比,DJ-1的表达显着降低,其中,以SGC7901细胞差异最明显,以此选定SGC7901为后续试验的研究对象。进一步通过q RT-PCR与Western blot证实成功构建DJ-1稳定高表达的SGC-7901细胞系。CCK8检测发现,处理前,DJ-1高表达组24h、48h、72h与96h的增殖活性分别为0.579±0.082、0.886±0.153、1.138±0.124与1.344±0.194,较Vector组0.436±0.045、0.557±0.059、0.667±0.057与0.715±0.075呈时间依赖性增加（P<0.05）,表明高表达DJ-1可显着提高SGC7901细胞的增殖能力。而用DADS30mg/L处理24h、28h、72h与96h后,DJ-1高表达组的增殖活性分别为0.560±0.031、0.873±0.017、0.910±0.014与0.936±0.019,较DADS处理前显着降低（P<0.05）,表明DADS可部分抑制DJ-1的表达从而抑制SGC 7901细胞的增殖能力。划痕实验表明,DJ-1高表达能增强SGC-7901细胞的迁移能力。而用30 mg/l DADS处理48h后,DJ-1高表达组和空载体组细胞迁移能力均减弱,表明DADS能减弱DJ-1高表达对SGC7901细胞迁移的影响。Transwell侵袭实验发现,未加DADS组,DJ-1高表达组和空载体组穿过Matrigel基质胶的细胞数分别为179.7±6.0,251.3±4.0（P<0.05）,表明DJ-1高表达可明显促进S G C 7 9 01细胞的侵袭,而DADS 30mg/l处理24h后穿过基质胶的细胞数分别为87.3±7.1,130.0±8.5（P<0.05）,与未处理组相比明显减少。表明DADS能拮抗DJ-1高表达对SGC7901细胞侵袭能力的影响。Western blot证实,与空载体组相比,DJ-1高表达组中DJ-1和p-AKT蛋白表达显着增高,而PTEN表达显着降低,AKT表达无明显差异,EMT相关蛋白E-cadherin、TIMP3显着降低,Vimentin、Snail和MMP-9的表达则显着升高,提示DJ-1可通过抑制PTEN表达促进Akt的活化,进而启动EMT进程。而经DADS30mg/l处理24h后,DJ-1高表达组和空载体组的DJ-1表达明显下调,PTEN表达显着升高,p-Akt显着降低,而Akt水平无明显改变,EMT相关蛋白E-cadherin和TIMP3显着升高,Vimentin、Snail和MMP-9表达显着降低。证实DADS下调DJ-1可调控PTEN/Akt通路抑制人胃癌细胞EMT。进一步的免疫荧光试验发现,与空载体组相比,DJ-1、Vimentin、TIMP3、MMP-9蛋白在DJ-1高表达组的荧光强度显着增强,表明DJ-1高表达促进EMT相关蛋白Vimentin、TIMP3、MMP-9的表达,而PTEN、E-cadherin在DJ-1高表达组的荧光强度显着减弱,表明DJ-1高表达可抑制PTEN、E-cadherin这两种蛋白的表达;而经DADS 30mg/l处理24h后,与未处理组相比较,各组DJ-1、Vimentin、MMP-9、TIMP3蛋白的细胞染色减弱,而PTEN、E-cadherin蛋白染色增加,表明DADS通过抑制DJ-1的表达从而影响PTEN及EMT相关蛋白表达的变化。小结:DADS可通过下调DJ-1负调控PTEN/Akt通路从而抑制SGC-7901细胞增殖、EMT与侵袭。第三部分DADS下调DJ-1抑制SGC7901细胞对5-Fu的抗药性目的:探讨DADS下调DJ-1对SGC7901细胞增殖、凋亡与5-Fu敏感性的作用。方法:MTT分析与流式细胞术分别检测DADS在5-Fu不同浓度的情况下,对SGC7901细胞增殖与凋亡能力的影响。q RT-PCR、Western blot与免疫荧光分别检测DADS对各组SGC7901细胞中Bcl-2、XIAP、Caspase-3、MDR-1、P-gp表达水平的变化。结果:在不同浓度5-Fu处理24h后,DADS 30mg/l处理后的各组细胞其增殖抑制率分别较处理前明显提高（P<0.05）。但SGC7901/DJ-1细胞增殖抑制程度没有SGC7901与SGC7901/VCR细胞明显。表明DADS可抑制SGC7901与SGC7901/VCR细胞增殖能力和提高对5-Fu的敏感性。流式细胞术检测显示SGC7901/DJ-1细胞凋亡水平分别低于SGC7901与SGC7901/VCR（P<0.05）,SG C7901凋亡率高于SGC7901/VCR（P<0.05）。DADS处理后,各组凋亡水平分别较对照组凋亡水平均明显升高（P<0.05）。q RT-PCR与Western blot显示,SGC7901/DJ-1细胞MDR-1、P-gp、Bcl-2、XIAP较SGC7901及SGC7901/VCR细胞明显提高（P<0.05）,Caspase-3明显抑制（P<0.05）,DADS处理后,SGC7901、SGC7901/VCR和SGC 7901/DJ-1细胞中MDR-1、P-gp、Bc l-2及XIA P明显降低（P<0.05）。Caspase-3明显上调（P<0.05）。免疫荧光显示,在对照组中,SGC7901/DJ-1细胞P-gp、Bcl-2、XIAP的荧光强度较SGC7901及SGC7901/VCR细胞明显增强,而Caspase-3荧光强度则显着减弱;DADS处理后,三组细胞中P-gp、Bcl-2及XIAP蛋白与相对应的未处理组相比细胞染色降低,而Caspase-3染色增强。结果与q RT-PCR、Western Blot结果一致。小结:DADS下调DJ-1可促进SGC7901细胞对5-Fu的敏感性,与抑制P-gp、MDR-1、Bcl-2及XIAP和促进Caspase-3有关。结论:1.DJ-1、PTEN、p-Akt蛋白在胃癌组织中的表达与胃癌发生、淋巴结转移和TNM分期有关。2.DADS通过下调DJ-1负调控PTEN/Akt通路抑制SGC-7901细胞增殖、EMT与侵袭。3.DADS下调DJ-1促进SGC7901细胞对5-Fu的敏感性,与抑制P-gp、MDR-1、Bcl-2及XIAP和促进Caspase-3有关。4.DJ-1可能是DADS抑制人胃癌细胞EMT与侵袭和抗药性的作用靶点之一。
熊佳惠[2]（2020）在《基于网络药理学方法研究附子理中汤治疗晚期胃癌的作用机制》文中研究表明目的:基于网络药理学的方法,探讨附子理中汤对于晚期胃癌的作用机制。方法:首先,通过TCMSP数据库、Drug Bank数据库和Pharm Mapper平台对附子理中汤所含化学活性成分进行筛选并获取其作用靶点,再利用GAD、OMIM及CTD数据库获得胃癌的相关靶点;然后,利用Draw Ven Diagram平台制作韦恩图,获得两者的交集靶点蛋白,通过Cytoscape3.5.1软件构建出蛋白互作图;再通过DAVID分析工具和KOBAS3.0软件对搜集到的靶点蛋白从生物过程（biological process,BP）、分子功能（molecular function,MF）和细胞组分（cellular component,CC）三个方向进行基因本体功能富集分析和KEGG通路分析;最后,利用PDB数据库、Systems Dock Web Site数据库集进行受体-配体的分子对接,并分析docking scores,验证附子理中汤治疗晚期胃癌的有效性。结果:从TCMSP数据库筛选出附子理中汤的147种化学成分,其中预测到4791个靶点,通过CTD、OMIM筛选出28006个与胃癌相关的靶点,最后韦恩图确定附子理中汤治疗晚期胃癌存在346个潜在靶标;其中附子理中汤与胃癌相互作用的关键靶标有TP53（肿瘤抑制蛋白p53）、AKT1（蛋白激酶B）、CDKN1A（细胞周期素依赖性激酶抑制因子1A）、STAT3（信号转导子与转录激活因子3）、BCL2L1（促生存因子）、JUN（核内癌基因）、CCND1（细胞周期素D1）、EGF（表皮生长因子）等,主要作用机制可能涉及2-Oxocarboxylicacid metabolism（2-氧羧酸代谢）信号通路和Propanoate metabolism（丙酸盐代谢）信号通路等分子通路,分子对接结果中表明STAT3对接分数最高,与附子理中汤有较好的结合性。结论:附子理中汤治疗晚期胃癌的关键靶点包括TP53（肿瘤抑制蛋白p53）、AKT1（蛋白激酶B）、CDKN1A（细胞周期素依赖性激酶抑制因子1A）、STAT3（信号转导子与转录激活因子3）、BCL2L1（促生存因子）、JUN（核内癌基因）、CCND1（细胞周期素D1）、EGF（表皮生长因子）等,其主要作用机制可能涉及2-Oxocarboxylicacid metabolism（2-氧羧酸代谢）信号通路和Propanoate metabolism（丙酸盐代谢）信号通路等分子通路等,靶点STAT3与附子理中汤有较好的结合性,可能在附子理中汤治疗晚期胃癌的过程中发挥着至关重要的作用。
刘佳佳[3]（2020）在《热疗联合顺铂抑制人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖及其分子机制的研究》文中提出目的:研究热疗（Hyperthermia,HT）联合顺铂（Cisplatin,DDP）对体外培养的人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP增殖的影响,并探讨其可能的分子机制。为热疗联合顺铂在胃癌耐药患者体内的研究和临床治疗提供依据。方法:在体外对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP进行常规培养,分为对照组、顺铂组、热疗组与热疗联合顺铂组。采用相差显微镜观察该细胞株分别在41℃、44℃、47℃及50℃下培养12 h、24 h、36 h后的细胞形态;MTT实验检测SGC-7901/DDP在不同时间和温度下的增殖情况,41℃、44℃、47℃与1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml顺铂在最适热疗时间下联合作用后的增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测对照组、顺铂组（2μg/ml）、热疗组（47℃）及热疗联合顺铂组（47℃和2μg/ml）SGC-7901/DDP细胞在最适热疗时间下的早期凋亡情况。采用高通量芯片技术检测对照组、顺铂组及热疗联合顺铂组细胞中的mRNA表达谱、lncRNA表达谱变化;通过实时荧光定量聚合酶链式反应验证热疗联合顺铂组比对照组中TCONS00018082、TCONS00015171、ENST00000584911.1、ENST00000412526.1和ENST00000592460.1的表达。结果:（1）MTT实验结果显示,经47℃热疗联合2μg/ml顺铂作用后SGC-7901/DDP细胞增殖受抑制情况较单独干预组和对照组明显增强（P<0.05）,二者联合具有协同作用效果;（2）在相同作用条件下,Annexin V-FITC/PI双染法检测结果显示,热疗联合顺铂与单独热疗组和顺铂组相比明显促进SGC-7901/DDP细胞的早期凋亡;（3）LncRNA高通量芯片表达谱显示,热疗联合顺铂组细胞中出现大量与对照组表达相反的lncRNA和mRNA;（4）RT-PCR检测发现,TCONS00018082和ENST00000412526.1表达较对照组和顺铂组显着上调（P<0.01）,而TCONS00015171和ENST00000584911.1的相对表达量显着下降（P<0.01）。结论:（1）培养24 h后,47℃热疗协同2μg/ml顺铂能够有效抑制人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP的增殖,并增强细胞早期凋亡。（2）47℃热疗联合2μg/ml顺铂逆转了人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP中的大量mRNA和lncRNA的表达。（3）47℃热疗联合2μg/ml顺铂抑制人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP细胞增殖的分子机制可能与上调TCONS00018082和ENST00000412526.1,下调TCONS00015171和ENST00000584911.1密切相关。
梁明坤,梁杏秋,钟静,黄钲凯,梁健[4]（2020）在《以DNA甲基化为靶标的中药治疗胃癌研究进展》文中研究指明胃癌是常见的恶性肿瘤,居消化道恶性肿瘤的首位,其发生发展的一个重要原因在于DNA甲基化等表观遗传修饰异常导致抑癌基因的失活。与化学药物相比较,中医药治疗胃癌具有多途径、多方式及多靶点的作用优势,且其有效性已得到广泛的证实,如通过影响癌基因和抑癌基因,影响肿瘤微环境,影响肿瘤细胞端粒酶活性,以及调节关键靶标的甲基化等。为了从DNA甲基化水平更加深入研究中医药治疗胃癌的作用机制,阐明治病机理,为挖掘治疗胃癌的中医药提供合理设计和筛选依据,就近年来以DNA甲基化为靶标,中药治疗胃癌的相关研究进行综述。
吴爽[5]（2018）在《冬凌草甲素阻滞人胃癌SGC-7901细胞于M期的机理研究》文中研究指明冬凌草甲素（Oridonin）,是从唇形科（Labtea）香茶菜属（Rabdosia）植物中分离出的一种贝壳杉烯二萜类（Ent-kaurene diterpenoid）天然有机化合物。研究发现冬凌草甲素能显着抑制肿瘤细胞的活性,对人肝癌、乳腺癌、胆囊癌等细胞均有显着的抑制增殖作用,并且有较低的毒性,对人体的重要脏器没有明显的损伤。本课题组前期研究发现冬凌草甲素可能阻滞人胃癌SGC-7901细胞于M期,本论文是在此基础上对这一实验结论进行进一步验证。首先对冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞增殖作用进行考察,其次对其诱导肿瘤细胞发生周期阻滞的机制进行研究,最后对细胞周期的特异性周期阻滞机理进行研究。本实验主要有三大内容,分别为1)冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,其中包含五个内容,（1）MTT法测定冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞生长曲线的影响,（2）冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞平板克隆形成能力的影响,（3）倒置显微镜观察冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞形态的影响,（4）PI单染测定冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞阳性染色细胞率的影响,（5）Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞浆中caspase-8、caspase-9、caspase-3和PARP活性的影响;2)冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的影响,其中包含两个内容,（1）流式细胞术检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的影响,（2）Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞CDK4和cyclinD1蛋白表达的影响,（3）Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞CDK2和cyclinA蛋白表达的影响;3)冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞的影响,其中包含三个内容,荧光显微镜法和Western Blotting法检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞中磷酸化Ser10组蛋白H3表达的影响,Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901 细胞 G2/M 期转换因子 cyclinB1 和 CDK1（cdc2）表达的影响。实验研究结果表明,1)冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,（1）MTT法检测不同浓度的冬凌草甲素16、32、64、128、256 μM能抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,并随着作用时间的延长和药物浓度的增加,抑制作用明显增强,呈时间-剂量依赖性,（2）平板克隆实验检测不同冬凌草甲素作用于人胃癌SGC-7901细胞24 h后,实验发现冬凌草甲素可明显抑制人胃癌SGC-7901细胞克隆形成,分别以终浓度为2、4、8 μM的冬凌草甲素作用于人胃癌SGC-7901细胞后,与阴性对照组相比,细胞形成克隆的数量明显减少并且形成单个克隆的直径更小,（3）倒置显微镜下观察可见,阴性对照组细胞密度大,细胞形态呈多边形,边缘清晰,培养液中几乎没有悬浮的细胞。随着冬凌草甲素浓度的增加,细胞大量悬浮在培养液中,细胞胞体缩小,胞质浓缩,有少数细胞体积增大,细胞破裂,呈细胞坏死状,（4）流式细胞仪检测不同浓度的冬凌草甲素作用于人胃癌SGC-7901细胞48 h后的PI染色阳性率,检测结果显示,分别以终浓度为30、40、50 μM的冬凌草甲素作用于人胃癌SGC-7901细胞后,与阴性对照组（4.03±2.77）%相比,其PI染色阳性率逐渐上升,分别为（7.63±4.29）%、（36.57±2.77）%、（43.20±8.27）%,与阴性对照组相比具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,（5）Western blotting 分析冬凌草甲素对 caspase-8、caspase-9、caspase-3 和PARP表达的影响结果表明,冬凌草甲素可上调cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的表达,各剂量组与阴性对照组比较具有统计学差异（P<0.05或P<0.01）,以上结果表明冬凌草甲素能抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖并产生凋亡;2)冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的影响,（1）PI单染,流式细胞术检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞的周期影响,分别加入终浓度为8、16、32μM的冬凌草甲素,给药48 h后与阴性对照组（10.18±0.69）%比较,G2/M期比例明显升高,百分比分别为（11.64±0.33）%、（25.60±0.47）%、（37.36±1.73）%,与阴性对照组比较具有统计学差异（P<0.05或P<0.01）,（2）Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞CDK4和cyclinD1蛋白表达的影响结果显示,随着冬凌草甲素浓度的增加,可以上调CDK4和cyclinD1的表达,促使处在G0/G1期的细胞逐渐向S期细胞转变,（3）Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞CDK2和cyclinA蛋白表达的影响结果显示,随着冬凌草甲素浓度的增加,可以上调CDK2和cyclinA的表达,促使处在S期的细胞逐渐向G2期转变,3)冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901 细胞 M 期阻滞的影响,（1）荧光显微镜观察冬凌草甲素对人胃癌 SGC-7901 细胞中磷酸化Ser10组蛋白H3表达的影响,经荧光染色后,被PI染色的细胞呈红色,被Alexa Flour 488染色的细胞呈绿色,红色细胞代表细胞的总数量,绿色细胞代表M期（p-H3阳性）细胞的数量,随着冬凌草甲素浓度的增加,绿色细胞的数量逐渐增加,本研究结果表明冬凌草甲素可将人胃癌SGC-7901细胞阻滞在M期而不是G2期,从而抑制细胞的增殖。（2）Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞cyclinB1和CDK1（cdc2）表达的影响结果显示,随着冬凌草甲素浓度的增加,可以上调cyclinB1和CDK1（cdc2）的蛋白表达,提示冬凌草甲素可促进人胃癌SGC-7901细胞由G2期向M期过渡。（3）Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞胞浆中磷酸化Ser10组蛋白H3表达的影响结果显示,随着冬凌草甲素浓度的增加作用48h后,p-H3的表达升高,与阴性对照组比较具有统计学差异（P<0.05或P<0.01）,进一步验证冬凌草甲素将人胃癌SGC-7901细胞阻滞在M期而不是G2期。通过以上实验结果表明冬凌草甲素通过将人胃癌SGC-7901细胞阻滞在M期而不是G2期来抑制其增殖。
何寄琴,李东芳[6]（2016）在《中药复方防治胃癌的实验研究机制概述》文中研究指明胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,死亡率居所有肿瘤第2位[1]。胃癌早期症状隐匿,容易被误诊为胃炎及胃溃疡等,我国大部分胃癌患者就诊时已属中晚期。目前我国胃癌的主要治疗方法为手术、化疗、放疗。近年来术前新辅助化疗及分子靶向药物治疗延长了进展期胃癌患者生存期,但术后5年生存率仅30%左右[2]。中医药是我国独有的传统的医疗优势。中药复方具有化学成分复杂、药理作用多靶点多层次多环节的特点,且干扰因素众多、剂型多样。运用中药复
曲笑莹[7]（2014）在《基于细胞周期同步化的冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的研究》文中认为冬凌草甲素（oridonin）是从冬凌草中分离出来的天然化合物,是冬凌草中最重要的抗癌活性成分,对乳腺癌、前列腺癌、消化道系统癌症和血液系统癌症等细胞具有显着的抑制生长作用,并且其毒性较低,对肝、肾、骨髓等人体重要脏器无明显损伤。研究者在冬凌草甲素对肿瘤细胞周期阻滞方面进行了许多研究,在这些研究中都是直接对细胞进行给药处理,所得到的结果总是差强人意。其原因就在于,当直接给药时,细胞所处时期不同,就会出现细胞敏感程度差异、作用机制有差异、重复性差的问题,导致最终的阻滞效果不能完全体现出药物的作用效果。采用同步化方法研究细胞周期阻滞可以将细胞同步于一个狭窄的时期内,药物对细胞的作用效高度的统一,因而可以准确研究药物的周期阻滞作用,进而深入研究药物对周期内关键点的调控作用。所以本实验基于细胞周期同步化方法,研究冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞的阻滞并进一步确定阻滞时期。本实验主要开展了三大方面内容,分别为:（1）建立人胃癌SGC-7901细胞周期同步化模型,其中包括三个小方面,分别是1)采用生长曲线法结合公式推导,测定人胃癌SGC-7901细胞周期时长,2)BrdU-FITC/PI双染,流式细胞术测定S期细胞比例进而推测S期时长,3)PI单染,流式细胞术测定TdR双阻断同步法对细胞周期的同步化作用效果;（2）PI单染,流式细胞术检测冬凌草甲素对细胞周期同步化后的人胃癌SGC-7901细胞的周期影响;（3）Westem Blotting法分析冬凌草甲素对细胞周期相关蛋白Cyclin A和Cyclin B1的影响以确定冬凌草甲素阻滞人胃癌SGC-7901细胞的具体期。实验研究结果表明,（1）计数法分别记录0、24、48、72、96、120、144和168h人胃癌SGC-7901细胞总数,通过Excel制作拟合生长曲曲线与对数期生长曲线,由公式Tc=△t×24h ×Lg2/（LgNt-LgN0）]推导得到Tc=24h/b,计算得出人胃癌SGC-7901细胞对数期细胞周期时长为Tc=30.63h;（2）BrdU-FITC/PI双染,流式细胞仪检测人胃癌SGC-7901细胞S期细胞百分比结果表明,加入BrdU试剂1、3、5和7h后S期的百分比分别为18.5%,20.9%,24.6%,27.8%,据公式推算出S期时长为10.53h;（3）PI单染,流式细胞术测定TdR双阻断法细胞周期同步结果显示,加入终浓度为2mmol/L的TdR于人胃癌SGC-7901细胞,其被同步于G0/G1期,成功建立同步化模型;（4）PI单.染,流式细胞术检测冬凌草甲素同步化于G0/G1,期的人胃癌SGC-7901细胞的细胞周期影响,将细胞同步化后分别加入终浓度为1、2、4、8、16μmol/L的冬凌草甲素,给药24h组与阴性对照组相比,S期细胞比例逐渐升高,百分比分别为28.60%,27.7%,52.6%,60.0%%,59.7%,给药48h组与阴性对照组相比,G2/M期细胞比例逐渐升高,百分比分别为41.5%、46.5%、47.6%、53.7%、56.9%、63.4%,与阴性对照组相比具有统计学意义。表明冬凌草甲素能够对人胃癌SGC-7901细胞的周期产生影响,将SGC-7901细胞阻滞在G2/M期。（5）Westem Blotting法分析冬凌草甲素对细胞周期相关蛋白Cyclin A和Cyclin B1表达的影响结果表明,冬凌草甲素能够影响Cyclin A和Cyclin B1表达,Cyclin B1均表达,而CyclinA则没有表达,表明冬凌草甲素将人胃癌3GC-7901细胞阻滞于M期而不是G2期。本文通过建立细胞周期同步化模型后更清楚地观察了冬凌草甲素能够将人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞于G2/M期,并且进一步明确了将人胃癌SGC-7901细胞阻滞于M期。
冯建英,邵建国[8]（2011）在《中药抑制消化道恶性肿瘤端粒酶活性作用研究进展》文中指出消化道恶性肿瘤为临床上最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着人类的健康。我国是世界上食管癌的高发国家,也是世界上食管癌死亡率最高的国家之一。胃癌是我国最常见的肿瘤之一,每年新诊断的癌症病例中,胃癌位居第四位,在癌症病死率中排列第二位,
申载薰[9]（2011）在《芪莲舒痞颗粒影响端粒酶活性、端粒长度、DNA含量及NF-κB表达的实验研究》文中认为目的：通过研究芪莲舒痞颗粒对CAG癌前病变大鼠胃黏膜组织端粒酶活性、端粒长度、DNA含量及NF-κB表达的影响,探讨芪莲舒痞颗粒逆转CAG癌前病变的作用机理。方法：采用‘’MNNG+雷尼替丁+乙醇+饥饱失调”的综合方法复制Wistar大鼠CAG癌前病变模型,按体重随机分为正常组、模型组、芪莲舒痞大、中、小剂量组和胃复春阳性对照组,分别给予药物干预后观察：免疫组化、TRAP-ELISA法检测端粒酶活性、端粒长度及NF-κB的表达,用流式细胞仪检测DNA含量。结果：①胃黏膜病理变化：造模各组大鼠胃黏膜炎症、萎缩、肠上皮化生、异型增生发生例数与正常组比较,均显着增加（P<0.01或P<0.05）；与模型组相比,QLSP大、中剂量组胃黏膜炎症发生例数均显着减少（P<0.01或P<0.05）, QLSP大剂量组萎缩、肠上皮化生的发生例数显着减少（P<0.05）；药物干预各组间异型增生的发生例数无统计学差异。②胃黏膜端粒长度：正常组为20.01±1.40bp,模型组13.32±1.62bp,胃复春组16.91±1.88bp,QLSP大、中、小剂量组分别为19.27±1.94bp、17.91±1.63bp、16.23±2.16bp。经统计学分析,模型组、胃复春组、QLSP中、小剂量组端粒长度较正常组明显缩短（P<0.01）；经胃复春、QLSP治疗后,端粒长度较模型组均明显增长（P<0.01）。与胃复春组比较,QLSP大剂量组端粒长度显着增长（P<0.01）,QLSP中、小剂量组则无明显差异。③胃黏膜端粒酶活性比较：正常组端粒酶阳性率为0（0/20）,模型组为66.7%（10/15）,胃复春组为33.3%（5/15）,QLSP大、中、小剂量组分别为0（0/15）、26.7%（4/15）、33.3%（5/15）。经统计学分析,模型组、胃复春组、QLSP中小剂量组端粒酶活性与正常组比较明显增强（P<0.01或P<0.05）；QLSP大剂量组端粒酶活性较模型组明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。QLSP中剂量组端粒酶阳性率较胃复春组下降,但无统计学差异。④DNA含量比较：正常组为11.49±2.65μg,模型组36.48±4.81μg,胃复春组26.39±5.85μg,QLSP大、中、小剂量组分别为16.99±4.62μg、20.37±4.70μg、28.41±4.53μg。经统计学分析,模型组、胃复春组、QLSP大、中、小剂量组DNA含量较正常组明显增加（P<0.01）；经胃复春、QLSP治疗后,DNA含量较模型组明显减少（P<0.01）。与胃复春组比较,QLSP大、中剂量组DNA含量显着减少（P<0.01）,QLSP小剂量组则无明显差异。⑤胃黏膜NF-κB的表达：正常组阳性表达率为0（0/20）,模型组为80%（12/15）,胃复春组为33.3%（5/15）,QLSP大、中、小剂量组分别为26.7%（4/15）、40%（6/15）、60%（9/15）。经统计学分析,模型组、胃复春组、QLSP大、中、小剂量组胃黏膜NF-KB表达阳性表达率较正常组显着升高（P<0.01或P<0.05）；胃复春组和QLSP大剂量组胃黏膜NF-κB表达阳性表达率较模型组显着下降（P<0.01或P<0.05）；胃复春组、QLSP各剂量组胃黏膜NF-KB表达阳性表达率未见明显差异。结论：实验结果表明芪莲舒痞方能有效逆转CAG癌前病变,从而证明运脾益肾、化瘀解毒是治疗CAG癌前病变的有效方法。芪莲舒痞颗粒的作用机理可能与其抑制CAG癌前病变大鼠胃黏膜组织端粒长度的缩短,抑制端粒酶的活性及DNA含量的增加,降低DNA多倍体的比例,抑制NF-κB的表达等有关。芪莲舒痞颗粒可能从多个环节、多个靶点阻断和逆转胃黏膜癌前病变。
葛莲英[10]（2010）在《端粒酶与大肠癌相关性及RNAi沉默hTERT基因治疗大肠癌的研究》文中指出在我国,消化道恶性肿瘤中大肠癌发病占有很高的比率。目前以手术治疗为主的综合治疗仍存在局限性,疗效不尽人意。因此,能否找到一个有效的分子治疗靶点,是丰富大肠癌治疗方法和最终应用于临床提高综合疗效的关键。有研究表明,大肠癌标本中端粒酶活性表达高达85%以上,而正常组织表达仅5%左右。端粒酶全酶由端粒酶RNA （hTR）、端粒酶相关蛋白（TPI）和端粒酶催化亚基（hTERT）三部分组成。hTR和TPI在正常组织和肿瘤组织均有表达,与端粒酶活性无相关性。而hTERT与端粒酶的活性相一致,hTERT基因是合成端粒酶全酶的限速因素,与肿瘤的关系尤为密切,因此将端粒酶作为肿瘤分子靶点的研究是极有意义的研究领域。本研究从本院临床收集30例大肠癌组织、癌旁组织及正常大肠组织,通过对端粒酶活性的检测,探讨端粒酶与大肠癌的相关性,并进一步验证端粒酶催化亚基（hTERT）的表达是否与端粒酶活性一致。同时回顾性分析本院178例大肠癌患者病理标本中hTERT表达水平和临床病理学参数之间的相关性；通过临床随访资料分析,阐明影响大肠癌患者生存预后的风险因素,明确hTERT能否作为判断大肠癌预后的标志物及作为大肠癌治疗的分子靶点。通过RNAi沉默技术,观察hTERT沉默对大肠癌细胞生长增殖和凋亡的影响,最终阐明hTERT基因RNAi沉默技术对大肠癌靶向治疗的可行性。本研究将从细胞、分子和整体水平上,为开展大肠癌hTERT基因靶向治疗提供实验和临床依据。第一部分端粒酶与大肠癌相关性研究第一章端粒酶活性与大肠癌相关性研究目的探讨端粒酶与大肠癌相关性,进一步验证端粒酶催化亚基（hTERT）的表达是否与端粒酶活性一致。方法运用PCR-TRAP-ELISA及免疫组织化学方法对大肠癌组织及其癌旁组织、大肠正常组织各30例检测端粒酶活性、hTERT的表达水平,并研究端粒酶与临床病理学特征之间的关系。结果（1）端粒酶阳性检出率在大肠癌组织、癌旁组织、大肠正常组织分别为83.33%13.33%3.33%,癌组织中检出率明显高于其他组织（P<0.05）。（2）大肠癌组织端粒酶活性随组织分化程度变低而升高,低分化大肠癌组织中的端粒酶阳性表达率高于中分化及高分化大肠癌（P<0.05）。（3）通过用免疫组化检测hTERT的表达与PCR-TRAP-ELISA法检测得端粒酶活性相比较,显示端粒酶活性与hTERT表达具有一致性,两法检测无显着差异。结论（1）大肠癌组织端粒酶阳性率明显高于癌旁组织及正常大肠组织,大肠癌组织中hTERT表达高于癌旁组织及正常组织。（2） hTERT的表达与端粒酶活性一致。第二章端粒酶催化亚基与大肠癌预后因素分析目的通过对178例大肠癌患者的临床资料回顾性分析,阐明hTERT表达水平与大肠癌临床病理特征及预后的关系,为大肠癌患者的预后评估提供一定的理论指导。方法选取有完整临床资料的178例大肠癌石蜡包埋组织标本及60例癌旁组织标本作为实验组,30例大肠正常组织石蜡包埋标本作为对照组。采用免疫组化的方法检测大肠癌组织中hTERT蛋白表达水平。查阅病例获得相关临床参数资料及随访资料,分析hTERT表达水平与大肠癌进展及临床预后的关系。结果（1） hTERT蛋白在大肠癌组、癌旁组与大肠正常组中阳性率分别为94.4%、6.67%、3.33%,其差异有统计学意义（P<0.001）;（2） hTERT在大肠癌组织中的表达与性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤直径无关（P>0.05）,与肿瘤分化程度、浸润深度、Dukes分期、临床分期及远处转移有关（P<0.05）。（3）经多因素Cox模型分析,不同浸润深度、远处转移、淋巴结转移、hTERT表达4项指标是影响大肠癌患者术后预后的独立危险因子；hTERT表达水平与患者术后无瘤生存时间呈负相关。结论hTERT在大肠癌组织中呈高表达。经多因素Cox分析,大肠癌浸润深度、远处转移、淋巴转移、hTERT表达与大肠癌患者预后存在显着性相关,是影响预后的危险因子。大肠癌组织中hTERT高表达者预后相对较差,低表达者预后相对较好。第二部分RNAi沉默hTERT基因治疗大肠癌的实验研究第一章hTERT基因shRNA真核表达载体的构建目的构建人端粒酶催化亚基（hTERT）基因shRNA真核表达载体质粒,为大肠癌RNAi介导的基因治疗打下基础。方法化学合成3条hTERT基因siRNA,通过脂质体转染大肠癌细胞SW480,48h后采用RT-PCR方法筛选出一条对hTERT mRNA有明显沉默作用的siRNA。将筛选出的siRNA设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链后,插入到pGPU6/GFP/Neo真核表达载体中,并进行酶切和测序鉴定。结果酶切和DNA测序证实构建的ShRNA已插入载体中。结论成功构建的hTERT基因shRNA真核表达载体pGPU6/GFP/Neo-hTERT shRNA,为进一步开展hTERT基因在人大肠癌细胞中的作用机制及体内外RNAi实验研究奠定了基础。第二章RNAi沉默hTERT基因对大肠癌SW480细胞生物学特性的影响目的观察hTERT基因对SW480细胞生物学特性的影响。方法将重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT shRNA （hTERT-shRNA）用脂质体转染法导入SW480大肠癌细胞,含无效序列的pGPU6/GFP/Neo-NC shRNA （NC-shRNA）作为阴性对照,单纯SW480细胞作为空白对照,等量转染试剂脂质体作为脂质体对照组,分别于转染后24h、48h、72h,在荧光显微镜下观察重组质粒转染效率和细胞形态学变化。采用MTT法检测各组细胞的生长增殖情况,RT-PCR法检测不同转染时间细胞hTERT mRNA的表达水平,免疫细胞化学法检测hTERT特异性蛋白表达；PCR-TRAP-ELISA法检测转染后48小时端粒酶活性；流式细胞仪检测转染后细胞周期分布,TUNEL法和透射电镜观察转染后细胞凋亡变化及线粒体膜电位（MMP）的改变检测。结果（1） hTERT-shRNA质粒转染24h、48h及72h比较,转染48h其转染效率明显高于24h和72h的转染效率,质粒与脂质体比例为1：2.5时,其转染效率显着高于其它各组,转染率达59%。（2）MTT检测结果显示：hTERT-shRNA质粒转染组对SW480细胞的生长增殖有明显抑制作用,于转染后第2d达到峰值,增殖率减少达28.22%,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。（3）半定量RT-PCR结果显示,转染48小时的hTERT-shRNA组的hTERT mRNA表达量明显低于转染24h和72h组的表达量。转染48小时的hTERT-shRNA组和空白对照组、脂质体对照组、NC-shRNA组比较,其抑制率分别是39.20%,33.28%,27.95%。（4）免疫细胞化学结果示：hTERT-shRNA组染色阳性细胞明显少于对照组。经病理图像分析软件进行灰度测量后比较发现,转染48h的hTERT-shRNA组较空白对照组灰度值下降约30.2%,同时和脂质体对照组和NC-shRNA组相比,差异均有明显统计学意义（P<0.01）。（5）PCR-TRAP-ELISA端粒酶活性检测显示：较空白对照组相比,hTERT-shRNA转染组细胞端粒酶活性下降了18.7%,与较其它三组之间差别均有显着性意义（P<0.05）。（6）流式细胞术检测：与对照组比较,hTERT-shRNA组G0/G1期细胞显着增加。与NC-shRNA组比较,hTERT-shRNA组增殖指数（PI）下降14.2%,差别有显着学意义（P<0.05）。（7） TUNEL法检测：hTERT-shRNA组凋亡细胞数显着多于对照组,因而其凋亡指数较其它组也明显增高,hTERT-shRNA组较空白对照组AI增高20%。（8）转染48h后透射电镜观察：可见凋亡细胞体积明显缩小,表面突起和微绒毛减少,甚至消失,染色质不均匀地地沿核膜下聚集。部分可见细胞核新月体,空泡形成增多。（9）与空白对照组相比,转染48h后线粒体跨膜电位（MMP）显示：hTERT-shRNA组线粒体Rhodamine123荧光强度明显增强（增加约24.2%）,MMP显着下降,与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.01）。结论RNAi沉默hTERT基因能有效抑抑制SW480肿瘤细胞生长和增殖,并降低端粒酶活性,诱导肿瘤细胞凋亡。第三章RNAi沉默hTERT基因治疗大肠癌移植瘤的动物实验研究目的探讨重组pGPU6/GFP/Neo-hTERT shRNA质粒对SW480细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法（1）经皮下接种SW480细胞株（1×107个细胞/只）建立裸鼠人大肠癌细胞移植瘤模型。（2）24只裸鼠随机地分为3组,每组8只。以瘤内接种pGPU6/GFP/Neo-hTERT shRNA简称hTERT-shRNA)质粒组为实验组,以瘤内注射pGPU6/GFP/Neo-NC shRNANC （简称NC-shRNA）作为阴性对照,以瘤内注射生理盐水作为空白对照组。（3）观察各组裸鼠皮下肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤抑制率。（4）治疗结束后取标本进行病理学检查、hTERT mRNA及hTERT蛋白表达分析,端粒酶活性及组织凋亡检测。结果（1）所有裸鼠均于7天后可见皮下肿瘤形成。（2） hTERT-shRNA组裸鼠肿瘤生长较慢,生理盐水对照组和NC-shRNA阴性对照组裸鼠肿瘤仍较快增大。（3）hTERT-shRNA组肿瘤组织切片HE染色,部分肿瘤可见大片坏死区,细胞结构消失。生理盐水组和NC-shRNA组肿瘤生长良好,细胞形态不规则,可见病理性核分裂相。（4）半定量RT-PCR检测hTERT mRNA水平,发现hTERT-shRNA组较生理盐水对照组和NC-shRNA阴性对照组分别下降52.1%和48.3%,差异具有显着性意义（P<0.01）。（5）免疫组化结果表明：hTERT-shRNA组肿瘤组织中hTERT阳性细胞明显减少,蛋白表达下调。hTERT蛋白平均灰度较生理盐水组和NC-shRNA组分别降低19.9%和14%。（6）端粒酶活性检测表明,pGPU6/GFP/Neo-hTERT组较生理盐水组和NC-shRNA组端粒酶活性明显降低,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。端粒酶活性抑制率分别为48.5%和53.0%。（7）TUNEL法检测发现,hTERT-shRNA组肿瘤细胞凋亡明显多于对照组,AI（凋亡指数）较生理盐水组和NC-shRNA组增加29.4%,31.1%,差异有统计学意义（P<0.01）。结论hTERT基因的shRNA瘤内注射能延缓大肠癌细胞SW480裸鼠皮下移植瘤的生长,其机理可能是通过抑制hTERT mRNA和蛋白的表达、抑制端粒酶的活性、促进肿瘤细胞凋亡而发挥作用。
二、人胃癌组织中端粒酶活性研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、人胃癌组织中端粒酶活性研究（论文提纲范文）
（1）DADS下调DJ-1对人胃癌SGC7901细胞EMT、侵袭和抗药性的影响及其作用机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要英文缩略语索引 |
| 第一部分 DJ-1、PTEN、p-Akt在胃癌中的表达及临床病理意义 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 病例资料 |
| 2.1.2 主要实验仪器 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 主要溶液配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 免疫组化染色 |
| 2.2.2 结果判定 |
| 2.2.3 统计学分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 DJ-1 蛋白在胃癌中的表达及临床病理意义 |
| 3.1.1 DJ-1 蛋白在胃正常组织、癌旁组织与胃癌中的表达 |
| 3.1.2 DJ-1 表达与胃癌临床病理指标的关系 |
| 3.1.3 DJ-1 表达与胃癌预后的关系 |
| 3.2 PTEN蛋白在胃癌中的表达及临床病理意义 |
| 3.2.1 PTEN在在胃正常组织、癌旁组织与胃癌中的表达 |
| 3.2.2 PTEN表达与临床胃癌病理指标的关系 |
| 3.2.3 PTEN表达与胃癌预后的关系 |
| 3.3 p-Akt蛋白在胃癌中的表达及临床病理意义 |
| 3.3.1 p-Akt在胃正常组织、癌旁组织与胃癌中的表达 |
| 3.3.2 p-Akt表达与胃癌临床病理指标的关系 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 DADS下调DJ-1 负调控PTEN/Akt通路抑制人胃癌SGC-7901 细胞EMT与侵袭 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 细胞系 |
| 2.1.2 实验质粒、载体、细胞株、菌株及慢病毒系统 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 关键试剂的配置 |
| 2.1.5 主要仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养与传代 |
| 2.2.2 DJ-1 过表达慢病毒载体构建及病毒包装 |
| 2.2.3 慢病毒转染SGC-7901 细胞以及稳定转染细胞株的筛选 |
| 2.2.4 q RT-PCR(荧光定量PCR) |
| 2.2.5 Western blot检测 |
| 2.2.6 CCK8 增殖实验 |
| 2.2.7 划痕愈合实验 |
| 2.2.8 Transwell侵袭实验 |
| 2.2.9 细胞免疫荧光 |
| 2.2.10 统计学分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 DADS对各胃癌细胞系DJ-1 表达的影响 |
| 3.2 慢病毒载体构建及病毒包装 |
| 3.3 DJ-1 高表达稳定细胞系的构建 |
| 3.4 qPCR检测DADS处理和转染细胞DJ-1 的表达水平 |
| 3.5 DJ-1与DADS对人胃癌SGC7901 细胞增殖能力的影响 |
| 3.6 DJ-1与DADS对人胃癌SGC7901 细胞迁移能力的影响 |
| 3.7 DJ-1与DADS对人胃癌SGC7901 细胞侵袭能力的影响 |
| 3.8 DADS与 DJ-1 高表达对人胃癌细胞DJ-1/PTEN/AKt信号通路的影响 |
| 3.8.1 DADS与 DJ-1 高表达对SGC7901 细胞PTENm RNA表达的影响 |
| 3.8.2 DADS 与DJ-1高表达对SGC7901细胞PTEN/AKt信号通路蛋白表达的影响 |
| 3.9 DADS与 DJ-1 高表达对人胃癌SGC7901 细胞EMT相关分子的影响 |
| 3.9.1 DADS与 DJ-1 高表达对SGC7901 细胞EMT相关分子m RNA的影响 |
| 3.9.2 DADS与 DJ-1 高表达对SGC7901 细胞EMT相关分子蛋白表达的影响 |
| 3.10 细胞免疫荧光检测DJ-1、PTEN及 EMT相关蛋白的定位与表达 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 DADS下调DJ-1 抑制人胃癌SGC7901 细胞对5-Fu的抗药性 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 细胞系 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 常用试剂的配置 |
| 2.1.4 主要仪器与设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养与传代 |
| 2.2.2 qRT‐PCR(荧光定量 PCR) |
| 2.2.3 Western Blot检测 |
| 2.2.4 MTT法检测细胞增殖能力 |
| 2.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡 |
| 2.2.6 细胞免疫荧光实验 |
| 2.2.7 统计学分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 DADS与 DJ-1 高表达对各种SGC7901 细胞增殖的影响 |
| 3.2 DADS与 DJ-1 高表达对人胃癌细胞SGC7901 凋亡的影响 |
| 3.3 DADS与 DJ-1 高表达对各组细胞凋亡相关分子表达的影响 |
| 3.3.1 DADS 与 DJ‐1 高表达对各组细胞 Bcl‐2 表达的影响 |
| 3.3.2 DADS 与 DJ‐1 高表达对各组细胞 XIAP 表达的影响 |
| 3.3.3 DADS 与 DJ‐1 高表达对各组细胞 Caspase‐3 表达的影响 |
| 3.4 DADS与 DJ-1 高表达对人胃癌细胞抗药性的影响 |
| 3.5 免疫荧光检测P-gp、Bcl-2、XIAP及 Caspase-3 定位与表达 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 小结 |
| 参考文献 |
| 全部结论 |
| 综述 Role of DJ-1 in cancer: Recent advance |
| References |
| 攻读博士期间的主要科研成果 |
| 致谢 |
（2）基于网络药理学方法研究附子理中汤治疗晚期胃癌的作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 1 文献研究 |
| 1.1 中医病因病机 |
| 1.2 西医发病机制 |
| 1.3 晚期胃癌的中西医治疗概述 |
| 1.4 附子理中汤对晚期胃癌的作用 |
| 2 数据分析与成果讨论 |
| 2.1 资料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 晚期胃癌的中西医治疗进展 |
| 1 中西医对晚期胃癌的认识 |
| 1.1 中医病因病机 |
| 1.2 西医发病机制 |
| 2 中西医治疗晚期胃癌 |
| 2.1 中医治疗 |
| 2.2 西医治疗 |
| 2.3 中西医联合治疗 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）热疗联合顺铂抑制人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖及其分子机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 细胞 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要实验仪器及设备 |
| 1.4 常用试剂配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 技术路线 |
| 2.2 细胞培养 |
| 2.3 耐药细胞分组与干预 |
| 2.4 人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP形态观察 |
| 2.5 细胞活力实验检测细胞增殖情况 |
| 2.6 等效线图解法检测协同作用 |
| 2.7 流式细胞技术检测SGC-7901/DDP细胞早期凋亡率 |
| 2.8 高通量芯片技术检测lncRNA表达谱 |
| 2.9 RT-PCR挑选验证lncRNA |
| 2.10 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 不同热疗时间和温度下SGC-7901/DDP细胞形态改变 |
| 3.2 不同热疗时间和温度下SGC-7901/DDP细胞增殖情况 |
| 3.3 HT联合DDP对SGC-7901/DDP细胞增殖的协同作用 |
| 3.4 HT联合DDP影响SGC-7901/DDP细胞早期凋亡 |
| 3.5 HT联合DDP组比对照组SGC-7901/DDP细胞的RNA表达谱改变情况 |
| 3.6 HT联合DDP组比对照组DE-mRNA功能富集情况 |
| 3.7 HT联合DDP组比对照组DE-lncRNA的亚群分布 |
| 3.8 lncRNA-RBP共表达网络分析 |
| 3.9 HT联合DDP组比对照组DE-lncRNA验证结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 HT联合DDP对 SGC-7901/DDP增殖和早期凋亡的影响 |
| 4.2 HT联合DDP对 SGC-7901/DDP中 DE-mRNA富集功能及信号通路的影响 |
| 4.3 DE-lncRNA在 SGC-7901/DDP的亚群分布及热疗联合顺铂对其表达的影响 |
| 结语 |
| 1 研究结论 |
| 2 研究意义 |
| 3 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（4）以DNA甲基化为靶标的中药治疗胃癌研究进展（论文提纲范文）
| 1 甲基化与胃癌 |
| 1.1 胃癌与DNA甲基化的关系 |
| 2 中医药治疗胃癌与DNA甲基化 |
| 2.1 中医药治疗胃癌的疗效 |
| 2.2 中药对DNA甲基化诱导的胃癌的逆转作用 |
| 2.3 中医药治疗胃癌的机制 |
| 2.3.1 直接杀伤胃癌细胞 |
| 2.3.2 通过诱导胃癌细胞的凋亡及分化达到抗癌作用 |
| 2.3.3 通过调控细胞信号通路来发挥抗癌作用 |
| 2.3.4 通过抑制胃癌组织血管生成 |
| 2.3.5 中医药抗胃癌的作用机制是通过调控细胞周期 |
| 2.3.6 通过调节机体免疫作用发挥抗肿瘤作用 |
| 2.3.7 通过干扰DNA甲基化达到抗癌作用 |
| 2.3.8 通过影响端粒及端粒酶发挥抗癌作用 |
| 3 讨论 |
（5）冬凌草甲素阻滞人胃癌SGC-7901细胞于M期的机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 中药抗肿瘤的概述 |
| 1.2 组蛋白H3 Ser10磷酸化 |
| 1.3 肿瘤细胞周期测定方法 |
| 1.3.1 区别G_0/G_1期细胞的测定方法 |
| 1.3.2 S期细胞的鉴定方法 |
| 1.3.3 G_2/M期的区分方法 |
| 1.4 冬凌草甲素的研究现状 |
| 1.4.1 冬凌草甲素诱导肿瘤细胞凋亡 |
| 1.4.2 冬凌草甲素抑制肿瘤细胞增殖 |
| 1.4.3 冬凌草甲素抗突变作用 |
| 1.4.4 冬凌草甲素促进活性氧的产生 |
| 1.4.5 冬凌草甲素增强吞噬细胞吞噬作用 |
| 1.4.6 冬凌草甲素逆转多药耐药 |
| 1.4.7 冬凌草甲素对免疫功能的影响 |
| 1.4.8 冬凌草甲素增强其他抗肿瘤药物的疗效 |
| 1.5 本课题来源及研究意义 |
| 1.5.1 课题来源 |
| 1.5.2 本课题研究的目的与意义 |
| 1.6 论文的研究内容 |
| 2 冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料、仪器及试剂 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 实验试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 MTT法测定冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞生长曲线的影响 |
| 2.3.2 冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞平板克隆形成能力的影响 |
| 2.3.3 倒置显微镜观察冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞凋亡形态的影响 |
| 2.3.4 流式细胞术检测冬凌草甲素作用人胃癌SGC-7901细胞P1阳性率的的影响 |
| 2.3.5 Western Blotting法测定冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞蛋白表达的影响 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 MTT法测定冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞生长曲线的影响 |
| 2.4.2 冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞平板克隆形成能力的影响 |
| 2.4.3 倒置显微镜观察冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞形态的影响 |
| 2.4.4 流式细胞术测定冬凌草甲素作用人胃癌SGC-7901细胞对PI阳性率的影响 |
| 2.4.5 冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞内caspase-8、caspase-9、caspase-3和PARP蛋白表达水平的影响 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料、仪器及试剂 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 实验试剂 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 流式细胞术检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期影响 |
| 3.3.2 Western Blotting法测定冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞蛋白表达的影响 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 流式细胞术检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期的影响 |
| 3.4.2 Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞内cyclin D1和CDK蛋白表达水平的影响 |
| 3.4.3 Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞内cyclinA和CDK2蛋白表达水平的影响 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料、仪器及试剂 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 实验试剂 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 免疫荧光显微镜观察人胃癌SGC-7901细胞p-H3的表达情况 |
| 4.3.2 Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞蛋白cyclin B1和CDK1 (cdc2)表达的影响 |
| 4.3.3 Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞p-H3蛋白表达的影响 |
| 4.4 结果分析 |
| 4.4.1 免疫荧光显微镜观察人胃癌SGC-7901细胞p-H3蛋白的表达情况 |
| 4.4.2 Western Blotting检测冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞内cyclinB1和CDK(cdc2)蛋白表达水平的影响 |
| 4.4.3 Western Blotting法测定冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞内p-H3蛋白表达的情况 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（6）中药复方防治胃癌的实验研究机制概述（论文提纲范文）
| 1 逆转胃癌前病变 |
| 2 抑制胃癌细胞增殖,诱导胃癌细胞凋亡 |
| 3 诱导胃癌细胞分化 |
| 4 调控信号传导 |
| 5 抑制血管生成 |
| 6 抑制基因表达 |
| 7 抑制端粒酶活性 |
| 8 逆转多药耐药性 |
| 9 抑制胃癌细胞侵袭、转移 |
| 10 免疫效应 |
| 11 对化疗增效减毒作用 |
| 12 小结及展望 |
（7）基于细胞周期同步化的冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 中药抗肿瘤的概述 |
| 1.2 细胞周期 |
| 1.2.1 细胞周期调控的核心机制 |
| 1.2.2 细胞周期调控的相关因子 |
| 1.2.3 细胞周期的测定 |
| 1.3 细胞同步化简介 |
| 1.3.1 细胞同步化的应用 |
| 1.3.2 细胞同步化的分类及方法 |
| 1.3.3 部分同步化方法的对比 |
| 1.4 冬凌草甲素来源及性状 |
| 1.5 冬凌草甲素抗肿瘤作用 |
| 1.5.1 冬凌草甲素抑制肿瘤细胞增殖作用 |
| 1.5.2 冬凌草甲素对肿瘤细胞周期的影响 |
| 1.5.3 冬凌草甲素诱导肿瘤细胞凋亡作用 |
| 1.5.4 冬凌草甲素降低肿瘤细胞端粒酶活性的作用 |
| 1.5.5 冬凌草甲素抑制肿瘤细胞DNA、RNA和蛋白质合成作用 |
| 1.5.6 冬凌草甲素对肿瘤基因蛋白及凋亡调控蛋白作用 |
| 1.5.7 冬凌草甲素对肿瘤细胞抗突变作用 |
| 1.5.8 冬凌草甲素降低癌细胞钠泵活性作用 |
| 1.5.9 冬凌草甲素促进活性氧的产生 |
| 1.5.10 冬凌草甲素与其他抗肿瘤药物联用 |
| 1.6 冬凌草药理作用研究进展 |
| 1.6.1 冬凌草的消炎和抗菌作用 |
| 1.6.2 冬凌草的β-受体阻断作用 |
| 1.6.3 冬凌草的调节免疫作用 |
| 1.6.4 冬凌草的抗氧化作用 |
| 1.6.5 冬凌草的保健功能 |
| 1.6.6 冬凌草的临床应用 |
| 1.7 本课题来源及研究意义 |
| 1.7.1 本课题来源 |
| 1.7.2 本课题研究的意义 |
| 1.8 论文的研究内容 |
| 2 人胃癌SGC-7901细胞的周期及S期时长测定 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验材料、器材及实验试剂 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 TdR双阻断法建立SGC-7901细胞同步化模型 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 实验材料、器材及实验试剂 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 冬凌草甲素对同步后的SGC-7901细胞周期的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 实验材料、器材及实验试剂 |
| 4.2.2 实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 冬凌草甲素对SGC-7901细胞周期相关蛋白表达的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 实验材料、器材及实验试剂 |
| 5.2.2 实验方法 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.4 本章小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（9）芪莲舒痞颗粒影响端粒酶活性、端粒长度、DNA含量及NF-κB表达的实验研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 实验研究 |
| 实验一 芪莲舒痞颗粒对端粒酶活性、端粒长度的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 造模药物 |
| 1.4 实验仪器 |
| 1.5 主要试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 造模方法 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 给药方法 |
| 2.4 取材方法 |
| 2.5 检测指标及检测方法 |
| 2.6 统计学处理方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 各组大鼠整体情况 |
| 3.2 各组大鼠胃组织变化 |
| 3.3 QLSP颗粒对大鼠端粒长度的影响 |
| 3.4 QLSP颗粒对大鼠端粒酶活性的影响 |
| 4 实验结论 |
| 实验二 芪莲舒痞颗粒对DNA含量的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 造模药物 |
| 1.4 实验仪器 |
| 1.5 主要试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 造模方法 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 给药方法 |
| 2.4 取材方法 |
| 2.5 检测指标及检测方法 |
| 2.6 统计学处理方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 实验结论 |
| 实验三 芪莲舒痞颗粒对核转录因子(NF-κB)的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 造模药物 |
| 1.4 实验仪器 |
| 1.5 主要试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 造模方法 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 给药方法 |
| 2.4 取材方法 |
| 2.5 检测指标及检测方法 |
| 2.6 统计学处理方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 免疫组化检测NF-κB定性表达结果 |
| 3.2 Western blotting检测结果 |
| 4 实验结论 |
| 讨论 |
| 1 慢性萎缩性胃炎的概念 |
| 2 历代医家对痞满的认识 |
| 2.1 《黄帝内经》对痞满的认识 |
| 2.2 《伤寒论》对痞满的认识 |
| 2.3 《诸病源候论》对痞满的认识 |
| 2.4 金元医家对痞满的认识 |
| 2.5 明清医家对痞满的认识 |
| 3 痞满的病因病机 |
| 3.1 中医对痞满病因的认识 |
| 3.2 对痞满病机的认识 |
| 3.3 对痞满临床表现的认识 |
| 4 现代研究对慢性萎缩性胃炎的认识 |
| 4.1 现代研究对病因的认识 |
| 4.2 现代研究对发病机制的认识 |
| 4.3 西医治疗CAG癌前病变的现状 |
| 4.4 西医治疗CAG癌前病变存在的不足 |
| 4.5 国内外研究动态 |
| 5 CAG癌前病变的中医治疗 |
| 6 芪莲舒痞方的方解及组方特点 |
| 6.1 处方组成 |
| 6.2 方解 |
| 6.3 药物的文献研究 |
| 6.4 现代药理研究 |
| 7 芪莲舒痞颗粒逆转CAG癌前病变的作用机理探讨 |
| 7.1 芪莲舒痞颗粒对端粒长度、端粒酶活性的影响 |
| 7.2 芪莲舒痞颗粒对NF-κB的影响 |
| 7.3 芪莲舒痞颗粒对DNA含量的影响 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 个人简历 |
| 详细摘要 |
（10）端粒酶与大肠癌相关性及RNAi沉默hTERT基因治疗大肠癌的研究（论文提纲范文）
| 主要名词的中英文对照缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 端粒酶与大肠癌相关性研究 |
| 前言 |
| 第一章 端粒酶活性与大肠癌相关性研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 端粒酶催化亚基与大肠癌预后因素分析 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 RNAi沉默hTERT基因治疗大肠癌的实验研究 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一章 靶向hTERT基因的RNAi真核表达载体的构建和鉴定 |
| 技术路线 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3.讨论 |
| 4.本章小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 RNAi沉默hTERT基因对大肠癌SW480细胞生物学特性的影响 |
| 技术路线 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 RNAi沉默hTERT基因治疗大肠癌移植瘤的动物实验研究 |
| 技术路线 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.本章小结 |
| 参考文献 |
| 研究的创新性 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 综述 |
| 综述1：大肠癌的治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述2：RNA干扰在肿瘤中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
四、人胃癌组织中端粒酶活性研究（论文参考文献）
- [1]DADS下调DJ-1对人胃癌SGC7901细胞EMT、侵袭和抗药性的影响及其作用机制[D]. 夏红. 南华大学, 2020
- [2]基于网络药理学方法研究附子理中汤治疗晚期胃癌的作用机制[D]. 熊佳惠. 广西中医药大学, 2020(02)
- [3]热疗联合顺铂抑制人胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖及其分子机制的研究[D]. 刘佳佳. 甘肃中医药大学, 2020(10)
- [4]以DNA甲基化为靶标的中药治疗胃癌研究进展[J]. 梁明坤,梁杏秋,钟静,黄钲凯,梁健. 中华中医药学刊, 2020(07)
- [5]冬凌草甲素阻滞人胃癌SGC-7901细胞于M期的机理研究[D]. 吴爽. 哈尔滨商业大学, 2018(12)
- [6]中药复方防治胃癌的实验研究机制概述[J]. 何寄琴,李东芳. 中国中西医结合消化杂志, 2016(01)
- [7]基于细胞周期同步化的冬凌草甲素对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的研究[D]. 曲笑莹. 哈尔滨商业大学, 2014(05)
- [8]中药抑制消化道恶性肿瘤端粒酶活性作用研究进展[J]. 冯建英,邵建国. 上海中医药杂志, 2011(07)
- [9]芪莲舒痞颗粒影响端粒酶活性、端粒长度、DNA含量及NF-κB表达的实验研究[D]. 申载薰. 山东中医药大学, 2011(12)
- [10]端粒酶与大肠癌相关性及RNAi沉默hTERT基因治疗大肠癌的研究[D]. 葛莲英. 广西医科大学, 2010(10)