一、水蛭提取液对实验性脑内血肿吸收的病理学及动物行为的影响（论文文献综述）
王若男[1]（2020）在《基于破血化瘀法的脑出血方干预脑血肿吸收机制的研究》文中研究表明目的:探讨以破血化瘀法为指导的脑出血方对脑血肿及血肿代谢产物吸收的调控作用和分子机制。方法:1.建立胶原酶注射诱导脑出血大鼠模型,根据体重随机分为空白对照组、假手术组、模型组、脑出血方低剂量组、脑出血方中剂量组、脑出血方高剂量组,每组10只大鼠,造模后3h按照时间及组别给予药物灌胃,到达相应时间点（1d、3d、5d、10d）收取样本。观察大鼠神经功能评分、冠状位血肿最大切面面积比和脑血肿体积。通过HE染色观察大鼠血肿周围组织病理情况;Western blot法检测大鼠血肿周围组织中CD47、CD36、CD163、PPARγ、Nrf2、TLR4、NF-κb、MyD88、TRIF、IL-1β蛋白表达的情况。2.将红细胞（RBC）按照40:1的比例与小胶质细胞（Microglial cell）共培养建立脑出血体外模型,分为正常组、模型组、辛伐他汀组、脑出血方低剂量组、脑出血方中剂量组、脑出血方高剂量组,给予相应药物干预。免疫荧光法观察Microglial cell吞噬RBC情况;流式细胞仪检测小胶质细胞吞噬RBC能力;Western Blot检测CD36、CD47、PPARγ、Nrf2、TLR4、NF-κb、MyD88、TRIF蛋白表达;RT-PCR检测CD36基因表达;Elisa法检测TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达。结果:1.在动物实验中,与空白组和假手术组比较,模型组动物Longa评分上升,显示运动神经功能下降,冠状位血肿最大面积比增加,血肿体积增加;与模型组相比,各给药组动物Longa5评分下降,同时冠状位血肿最大面积比减少,血肿体积减小,其疗效与脑出血方给药剂量相关,中剂量组效果较显着。2.在动物实验中,与空白组相比,模型组动物血肿周围组织中CD36、CD163、PPARγ、Nrf2表达上升;CD47、TLR4、NF-κb、TRIF、MyD88、IL-1β表达下降;与模型组比较,各给药组动物血肿周围组织中CD36mRNA表达上升。脑出血方对于CD36相关蛋白及mRNA表达的调节与其给药剂量相关,中剂量组效果较显着。3.在小胶质细胞（Microglial cell）与RBC共培养实验中,与模型组比较,辛伐他汀和脑出血方各剂量组能促进小胶质细胞吞噬清除RBC,对小胶质细胞吞噬RBC的促进作用与脑出血方的给药浓度呈正相关。4.在小胶质细胞与RBC共培养实验中,模型组细胞CD36、CD163、PPARγ、Nrf2表达上升,CD47、TLR4、NF-κb、TRIF、MyD88、TNFα、IL-1β表达下降;与模型组比较,各给药组细胞中CD36、CD163、PPARγ、Nrf2表达上升,CD47、TLR4、NF-κb、TRIF、MyD88、TNFα、IL-1β表达下降。与空白组相比,模型组中CD36mRNA的表达上升;与模型组相比,各给药组动物血肿周围组织中CD36mRNA表达上升。结论:1.脑出血方具有促进脑出血动物模型行为学改善的作用,能够促进小胶质细胞吞噬清除RBC,从而促进血肿吸收,加快脑出血动物神经功能恢复。2.脑出血方能够促进脑出血体内外模型CD36信号通路相关指标CD36、PPARγ、Nrf2的表达,抑制CD47、TLR4、NF-κb、TRIF、MyD88、TNFα、IL-1β表达。说明脑出血方通过激活CD36信号通路,促进脑出血后血肿吸收;抑制TLR4/MYD88炎症通路,减少脑出血后继发炎症损伤,从而改善脑出血后神经功能障碍。3.应用脑出血体外模型验证了脑出血方通过CD36起到促进脑血肿吸收的作用。
田超[2]（2020）在《脑血疏干预Nrf2/CD163诱导小胶质细胞M2型极化促进脑出血血肿吸收的机制》文中研究指明背景:脑出血（Intracerebral hemorrhage,ICH）是指非外伤性脑实质内血管破裂出血,在所有中风病中的比例大约为15%,住院死亡率高达40%。因其发病率高、致残重、致死性强的特点,给患者造成严重的精神和经济负担,是严重威胁人类生命的疾病之一。脑出血后24小时内,进入到脑组织的红细胞开始发生裂解,释放血红蛋白,血红蛋白会进一步分解为血红素,血红素在血红素加氧酶-1（Heme oxygenase-1,HO-1）的作用下降解为胆绿素,一氧化碳和铁。所有血肿来源的副产物都会引起炎症反应,扰乱脑细胞信号通路并最终导致细胞死亡。小胶质细胞被称为大脑巨噬细胞,具有免疫监视、防御、抗原提呈、吞噬和分泌功能。在适当的刺激下,小胶质细胞可以被激活为两个极化状态:经典激活表型M1和激活表型M2。核因子E2相关因2（Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）被激活后可以促进小胶质细胞M2型极化,上调清道夫受体（Scavenger receptor cysteine-rich,SRCR）白细胞分化抗原 163（Cluster of differentiation 163,CD163）在小胶质细胞上的表达,CD163等清道夫受体具有识别血红蛋白的能力,增加小胶质细胞吞噬血红蛋白的能力,促进血肿吸收。在中医理论中,脑出血为离经之血,离经之血既为瘀血,瘀血停于脑脉之外成为压迫脑髓的有形之邪,瘀停脉外使脑髓受压构成了脑出血急性期的最初病机。对于瘀血中医上以活血化瘀为主要治法,而脑血疏口服液属于益气活血化瘀功效的中药制剂,在临床中应用广泛,由于安全性考虑,脑出血急性期不明确是否会再次引发出血,一般在脑出血3天后开始给药。大量的临床研究确定其疗效显着,可以明显促进血肿吸收,减小脑出血后的血肿体积,改善预后,所以我们对脑血疏口服液治疗脑出血用药时间点的安全性评价和其促进血肿吸收的作用机制研究具有重要的研究意义。目的:1.探讨脑血疏口服液用药时间点的安全性评价,为在“益气活血”理论指导下脑血疏口服液在临床治疗出血性中风病提供理论和实验依据。2.探讨脑血疏口服液干预Nrf2/CD163通路诱导小胶质细胞M2型极化促进脑出血血肿吸收的机制,为在“益气活血”理论指导下,脑血疏口服液治疗出血性中风病提供理论基础和实验依据。方法:1.SPF级健康雄性SD大鼠尾状核注射胶原酶Ⅶ建立脑出血模型,造模成功后随机分为模型组、脑血疏1组、脑血疏2组和依达拉奉组,假手术组和假手术给药组大鼠只进针并随机分组,每组各20只。在术后2h,假手术组和模型组给予生理盐水0.27ml/100g体重灌胃;脑血疏1组给予脑血疏口服液0.27ml/100g体重灌胃;依达拉奉组给予依达拉奉注射液0.54mg/100g体重腹腔注射。脑血疏2组在评估造模成功1天后给予脑血疏口服液0.27ml/100g体重灌胃给药,每组大鼠均每隔24h给药一次,总共给药3天。术后第1天和第3天,每组20只SD大鼠进行改良的神经功能缺损评分（Modified neurological severity score,mNSS）;术后第3天,每组6只SD大鼠进行旷场实验,观察大鼠脑出血后神经功能缺损情况。给药3天后,每组3只SD大鼠断头取脑,分别通过HE染色、尼氏染色和Tunel染色的方法,观察大鼠脑出血后脑组织病理结构和神经元损伤凋亡情况。2.给药3天后,每组3只SD大鼠制备脑组织冰冻病理切片,每组5只SD大鼠取新鲜脑组织用于Western blot检测。通过免疫荧光和Western blot检测Nrf2、精氨酸酶-1（Arginase-1,Arg-1）、CD163和HO-1 蛋白的表达情况。结果:1.mNSS神经功能评分和旷场实验发现,模型组大鼠的神经功能评分显着高于假手术组,行走路程和站立次数显着少于假手术组,神经功能缺损明显;与模型组相比,脑血疏1组大鼠神经功能评分显着降低,行走路程和站立次数明显增多,神经功能缺损得到明显改善。与脑血疏2组相比,脑血疏1组大鼠神经功能评分有降低趋势,行走路程和站立次数有增加趋势。2.HE染色、尼氏染色和Tunel染色的结果显示,与假手术组相比,脑出血模型组大鼠脑组织中,脑水肿明显增加,神经细胞形态明显改变,凋亡神经元明显增多,损伤加重。与模型组相比,脑血疏1组大鼠脑水肿程度减小;神经元损伤明显改善,凋亡神经元减少。与脑血疏2组相比,脑血疏1组大鼠水肿程度、神经元损伤和凋亡神经元有降低趋势。3.免疫荧光的结果显示,脑出血模型组大鼠脑组织中Nrf2、Arg-1、CD163和HO-1的表达明显高于假手术组;与模型组变比,脑血疏通大鼠脑出血后脑组织中Nrf2、Arg-1、CD163和HO-1的表达明显增高。与脑血疏2组相比,脑血疏1组大鼠脑出血后脑组织中Nrf2、Arg-1、CD163和HO-1的表达有增加趋势。4.Western blot的结果显示,与假手术组相比,脑出血模型组大鼠脑组织中Nrf2、Arg-1、CD163和HO-1的表达明显升高。与模型组相比,脑血疏1组大鼠脑出血后脑组织中Nrf2、Arg-1、CD163和HO-1的表达明显增高。与脑血疏2组相比,脑血疏1组大鼠脑出血后脑组织中Nrf2、Arg-1、CD163和HO-1的表达有增加趋势。结论:脑血疏口服液能够明显减轻脑出血大鼠神经功能缺损,降低脑组织病理损伤,减轻神经元损伤情况,保护神经元的正常功能。脑血疏口服液能够通过干预Nrf2/CD163通路诱导小胶质细胞M2型极化来促进对血肿中血红蛋白的清除分解。并且实验结果表明,大鼠脑出血后给予脑血疏口服液治疗并未出现不良反应,术后给药比术后1d给药具有更好的治疗趋势。
王蔚[3]（2016）在《脑出血急性期中医分阶段治疗方案及蛭龙活血通瘀胶囊的干预作用机制研究》文中指出第一部分：临床观察目的：通过临床观察脑出血急性期应用中医分阶段治疗方案对患者相关指标的影响,研究中医分阶段治疗方案对脑出血急性期治疗的临床疗效,从而制定符合临床实际、规范化且行之有效、易于推广应用的脑出血急性期的临床治疗方案,以期提高该病的临床疗效。方法：采用随机平行对照的临床试验方法,纳入脑出血急性期患者,共60例,随机分为观察组和对照组,每组各30例,其中对照组采用西医常规治疗,包括稳定生命体征、控制血压、血糖、营养神经、改善脑代谢等；观察组在此基础上采用中医分阶段治疗方案,针对急性期不同阶段分别给予中药汤剂辨证施治,中成药、针灸理疗等方法进行治疗,两组均于治疗前及治疗后14d对患者的临床疗效及中医症状分级量表评分、NIHSS评分、Rankin评分、Barthel指数评分讲行检测,并于治疗前、治疗后7d及14天对患者颅内血肿的变化情况以及安全性指标,包括血常规、肝肾功、凝血等进行检测,从而比较两组的临床疗效和对上述指标的影响情况,分析并评价两组的有效性和安全性。结果：1、中医分阶段治疗方案组（观察组）患者的中医症状分级量表评分、NIHSS评分、Rankin评分、Barthel指数评分、颅内血肿体积改善情况均明显优于单纯西医治疗组（对照组）,P<0.05；观察组的中医证候疗效、西医临床疗效、颅内血肿疗效均明显高于对照组,P<0.05；2、两种治疗方案对患者的生命体征、肝肾功、血常规、凝血等指标均未造成不良影响,具有较好的安全性。结论：对脑出血急性期患者采用中医分阶段治疗方案较单纯西医治疗能够更加有效的使患者神经功能得到改善,从而提高患者治愈率,并改善生活质量,安全有效,值得推广。第二部分：动物实验目的：探讨蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑水肿、血脑屏障功能的影响,并研究该药脑保护的作用机制,为蛭龙活血通瘀胶囊在脑出血急性期的临床运用提供科学的实验依据。方法：取255只雄性、健康的SD大鼠,采用随机分组法分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊高、中、低剂量组,各组又根据指标检测的时间不同划分为12h、48h、72h三个亚组,采用自体血注入法制备脑出血大鼠模型,各药物组于术后分别给予蛭龙活血通瘀胶囊灌胃,每日量分别为0.3g/kg、0.6g/kg和1.2g/kg,而模型组和假手术组则灌胃与药物组同等体积的生理盐水,3ml／次,给药次数及时间同药物组。各组进行相应干预后,在各规定的时间点对大鼠神经行为学评分（NSS）进行测定,取出脑组织,检测大鼠脑含水量及脑系数,HE染色对大鼠脑出血血肿周围组织行病理学观察,采用伊文思蓝法检测血脑屏障的通透性,电子显微镜观察血脑屏障的超微结构,Western-blot法检测与脑水肿相关的蛋白AQP-4、MMP-9及TIMP-1的表达,PT-PCR法检测AQP-4、MMP-9及TIMP-1 mRNA表达。结果：1、脑出血模型大鼠在术后12h可见脑组织水肿,48h及72h脑水肿程度逐渐加重,神经功能缺损情况逐渐明显,NSS评分随之升高,脑含水量及脑系数也逐渐升高,HE染色见脑组织明显水肿,间质疏松,血肿周围结构紊乱。蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组在术后12h、48h及72h,大鼠脑水肿情况均较模型组有所改善,神经功能评分较之下降,脑含水量及脑系数也较之下降（P<0.01）,HE染色可见脑组织血肿周围水肿均有不同程度的改善,各药物组之间比较以高剂量组改善最为明显。2、脑出血模型大鼠在术后12h血脑屏障的通透性即可发现有明显改变,脑组织EB含量明显升高,术后48h时升高最为明显,72h时稍有下降。电镜超微结构显示术后48h,整个血管腔形态不规则,基膜厚薄不均,毛细血管周围水肿明显,组织稀疏,电子密度降低,内皮局部膨出,部分与基膜剥离,血脑屏障结构发生破坏。蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组在术后12h、48h及72h,大鼠血脑屏障通透性较模型组均具有不同程度的改善（P<0.01）,脑组织EB含量较之有所下降,电镜超微结构观察发现血管周围水肿程度较为轻微,血脑屏障的结构得到明显改善,以高剂量组改善最为明显。3、脑出血模型大鼠在术后12h、48h及72h脑组织中AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白及基因的表达均有明显上升,其中,AQP-4蛋白及基因表达呈进行性升高,在72h时升高最为明显,MMP-9、TIMP-1蛋白及基因表达也有明显升高,在48h时上升明显并达到高峰,在72h时略有下降。而蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组在术后12h、48h及72h时大鼠脑组织AQP-4、MMP-9蛋白及基因的相对表达量均有不同程度的下降,TIMP-1蛋白及基因的相对表达量有所升高,与模型组比较,差异均具有显着性（P<0.01）,不同剂量组间比较,高剂量组最为明显（P<0.01）。结论：1、蛭龙活血通瘀胶囊能够明显改善脑出血大鼠神经功能缺损症状,使神经功能缺损评分有所减轻,并降低脑出血大鼠脑含水量及脑系数,从而使脑组织水肿程度得到明显改善。2、蛭龙活血通瘀胶囊能够明显改善脑出血大鼠血脑屏障的通透性,使脑组织EB含量有所减轻,保护血脑屏障的组织结构避免血脑屏障受到破坏,从而减轻脑组织的水肿程度。3、蛭龙活血通瘀胶囊能够明显降低脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9蛋白及基因的表达,同时升高TIMP-1蛋白及基因的表达,从而改善血肿周围脑组织水肿。4、蛭龙活血通瘀胶囊上述药理作用存在一定的量效关系,以高剂量组作用最为明显。
艾鑫,刘翠[4]（2014）在《脑血疏口服液对脑出血大鼠血肿体积的影响及神经功能的保护作用》文中认为目的研究脑血疏口服液对脑出血（ICH）大鼠血肿体积的影响,探讨其对神经功能的保护作用。方法 130只SD大鼠随机分为ICH对照组、ICH干预组和假手术组;ICH对照组、ICH干预组再随机分为1d、2d、4d、5d、7d和14d组6个亚组。采用注射Ⅳ型胶原酶建立ICH模型,造模后依照Longa FZ五级评分法对大鼠进行神经行为学评分,后于相应时间点处死大鼠,根据多田公式测量血肿体积,电镜下观察各组大鼠脑组织结构改变。结果 ICH模型建立后所有动物均出现不同程度的神经功能缺失症状,ICH对照组动物症状明显重于ICH干预组。ICH干预组不同时间点血肿体积均显着小于ICH对照组,且脑组织结构明显改善。结论大鼠脑出血后应用脑血疏口服液能明显促进血肿吸收,改善神经功能缺损和脑组织结构,提高治疗效果。
曲馨[5]（2014）在《“百会”透“曲鬓”对脑出血急性期大鼠p-jak、p-stat3、EGFR、GFAP影响的实验研究》文中研究指明目的:本研究通过观察“百会”透“曲鬓”针刺法对急性期脑出血大鼠神经功能评分、脑组织形态学变化以及脑组织中p-JAK、p-STAT3、EGFR和GFAP蛋白表达的动态影响,探讨该疗法治疗脑出血的可能作用机制。方法:156只SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为空白组、模型6小时组、模型1天组、模型3天组、模型7天组、针刺6小时组、针刺1天组、针刺3天组、针刺7天组、抑制剂6小时组（AG490）、抑制剂1天组（AG490）、抑制剂3天组（AG490）、抑制剂7天组（AG490）,每组12只,共13组。各组除空白组不做处理外均采用自体血脑内注入法制备脑出血模型,抑制剂组造模前脑内注入抑制剂AG490,针刺组造模后给予“百会”透“曲鬓”针刺法治疗。对大鼠神经功能缺损程度用Berderson评分法评价;观察在光镜下脑出血的各组大鼠脑组织形态学改变;各组大鼠脑组织中p-JAK的蛋白表达用蛋白免疫印迹方法检测;运用免疫组化方法检测各组大鼠脑组织中p-STAT3、EGFR和GFAP的阳性细胞数。结果:1.神经功能缺损评分测量结果以3d时间点神经功能缺损最重,其后神经功能缺损逐渐减轻。神经功能缺损征在针刺组大鼠治疗后有明显改善,与模型组比较,1d、3d和7d评分有显着差异（P<0.05）。抑制剂组（AG490）治疗后神经功能缺损征有显着改善,与模型组比较,各时间点动态评分均有明显不同（P<0.05）。针刺组与抑制剂组比较,各时间点评分均无明显差异（P>0.05）。2.光镜观察结果光镜下,模型组血肿周围脑组织坏死、水肿、炎性细胞浸润,神经细胞核空泡化、固缩,毛细血管扩张、充血,3d时最为严重,7d时逐渐减轻。相同时间点与模型组比较,针刺组和抑制剂组脑组织逐渐修复,水肿程度较轻,炎性细胞减少。3.蛋白免疫印迹检测结果各组大鼠不同时相点都有p-jak蛋白表达。模型组1 d开始p-jak蛋白表达量增加,3d达高峰,7d逐渐减弱。针刺组、抑制剂组与模型组比较,p-JAK蛋白表达明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。抑制剂组与针刺组比较,除6h外,其余各时间点p-JAK蛋白表达明显降低针刺组,差异有统计学意义（P<0.05）。4.P-STAT免疫组化检测结果各组大鼠不同时相点都有P-STAT的阳性细胞表达。空白组有少量表达,模型组、针刺组和抑制剂组从脑出血后6h开始表达量明显增加,于3d达高峰,7d仍有少量表达;针刺组、抑制剂组与模型组比较,在1d、3d和7d点p-STAT3阳性表达均较模型组显着减少,差异有统计学意义（P<0.05）。抑制剂组与针刺组比较,在3d时差异明显,有统计学意义（P<0.05）。5.EGFR免疫组化检测结果各组大鼠不同时相点都有EGFR的阳性细胞表达。空白组有少量表达,模型组、针刺组和抑制剂组从脑出血后6h开始表达量明显增加,于3d达高峰,7d仍有少量表达;刺组、抑制剂组与模型组比较,在3d、7d时EGFR阳性表达均较模型组显着减少,差异有统计学意义（P<0.05）。抑制剂组与针刺组比较,3d时EGFR阳性表达较针刺组显着减少,差异有统计学意义（P<0.05）。6.GFAP免疫组化检测结果各组大鼠不同时相点都有GFAP的阳性细胞表达。空白组有少量表达,模型组、针刺组和抑制剂组（AG490）从大鼠脑出血后6h开始表达量明显增加,于3d达高峰,7d仍有少量表达;针刺组与模型组比较,3d点针刺组GFAP阳性表达较模型组显着减少,差异有统计学意义（P<0.05）。抑制剂组与模型组比较,3d、7d时间点有明显差异（P<0.05）,其余时间点差异均无统计学意义（P>0.05）。针刺组与抑制剂组比较,在各时间点无明显差异（P>0.05）。结论:1.针刺“百会”透“曲鬓”穴可以明显提高大鼠脑出血后神经功能缺损程度评分,减轻神经功能缺损症状。2.针刺“百会”透“曲鬓”穴可以明显改善脑出血后神经细胞损伤程度和炎性细胞浸润,对脑出血后神经元具有保护作用。3.“百会”透“曲鬓”在脑出血急性期可能通过抑制 EGFR、p-JAK、p-STAT3、GFAP蛋白表达,从而拮抗ICH后炎症反应,减轻继发性脑损伤,发挥其保护神经元的作用。
李宝红[6]（2014）在《基于水蛭传统给药的抗凝活性组份的相关研究》文中研究说明目的：水蛭（Hirude nipponica Whitman, HIRUDO）最早记载于《神农本草经》,是我国传统中药材,有逐血祛瘀之效,现已广泛用于多种心脑血管疾病,疗效较好。水蛭素（Hirudin）被认为是水蛭中抗凝活性组份,研究报导较多。水蛭经高温处理后其水蛭素抗凝活性失活但其提取所得组份依然具有抗凝活性。2010版《中国药典》记载水蛭为水蛭科动物蚂蟥（Whitmania pigra Whitman）、水蛭（Hirude nipponica Whitman）或柳叶蚂蟥（Whitmania acranulata Whitman）的干燥全体。单方使用水蛭符合中医药理论的理、法、方、药,即水蛭提取的总有效部位的总体疗效比单一成分疗效更强,因此水蛭有效部位（组份）的使用更符合中医药理论。水蛭传统的给药方式均经口服,但其气味腥臭,难以吞咽,且容易变质,稳定性差。本研究基于传统的口服给药方式,以宽体金线蛭（Whitmania pigra Whitman）为研究对象,对宽体金线蛭的抗凝血活性组份的提取工艺进行研究,并对其提取组份进行了药效学、毒理学研究,为水蛭口服给药存在的气味腥臭、难以吞咽等问题予以改进。本研究结果提示,所得提取组份可代替水蛭干燥全体入药,可以克服水蛭传统给药存在的部分问题,为水蛭的剂型研究提供新的思路。方法：1水蛭抗凝活性粗提取组份提取工艺研究比较了三种不同提取方法（即水提醇沉法、醇提水沉法、丙酮提取法）所得提取组份对抗凝活性和血浆复钙时间的影响,确定水提醇沉为较优的提取方法,并进一步通过星点设计-效应面优化法优选最佳提取工艺。2水蛭抗凝粗提取组份凝胶柱层析分离纯化按最佳工艺提取所得水蛭粗提取组份用DEAE Sephadex A-50、Sephadex G-50凝胶柱进行分离纯化得抗凝活性组份A1、G1,并比较了水蛭粗提取组份、A1、G1三者的抗凝活性。3凯氏定氮法测定实验所得产品的蛋白质含量用凯氏定氮法测定实验所得样品蛋白质含量。4活性组份抗血栓药效学实验研究将抗凝活性组份G1用于体内外抗血栓实验,包括G1对大鼠动静脉旁路循环实验性血栓形成的影响、对体外血栓形成的影响、对大鼠血小板、胆固醇及血浆比粘度的影响、对全血浆凝块及优球蛋白溶解的影响、对大鼠脑毛细血管通透性的影响、对血小板聚集性的影响等,探讨其抗血栓作用机制。5活性组份慢性毒性实验研究本研究对抗凝活性组份G1的慢性毒性做了详细研究,具体方法为：SD大鼠连续灌胃给药60天,观察各实验动物一般健康指标、体重变化、血常规指标检查（WBC、NEU、LYM、NEU%、LYM%、RBC、HGB、HCT、MCV、MCHC和PLT）、肝肾功能指标检查（SGPT、SGO、BUN、Cr）、其他血清生化指标（血糖、胆固醇、总蛋白、白蛋白,碱性磷酸酶）以及对重要器官心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胃、胰腺、脑、睾丸、子宫和胸腺组织的脏器系数及组织形态结构的影响等,来评价抗凝活性组份G1的长期毒性。6活性组份急性毒性实验研究选择NIH小鼠给予临床用量的70倍,给药后观察小鼠7天内饮食、活动、大小便及死亡情况。结果：1水蛭抗凝活性粗提取组份提取工艺研究水提醇沉组和醇提水沉组所得的水蛭粗提组份抗凝血活性效价高,丙酮组较低。为此,本实验选择蒸馏水作为提取溶剂。并经实验优化得最佳提取工艺：水蛭药材浸泡4h后提取三次,每次提取时间1.5h,溶剂水用量为药材的10倍,醇沉浓度为50%,醇沉静置时间20h。经验证试验证实,所建立的数学模型预测性较好,工艺条件重现性好,偏差率低。2水蛭抗凝粗提取组份凝胶柱层析分离纯化水蛭粗提取组份经过阴离子交换剂DEAE Sephadex A-50层析分离,得到三组活性组份,分别标记为A1、A2、A3,测定它们的抗凝血活性后,选择抗凝血活性最强的活性组份A1（166.52±0.21U/g）进行下一步Sephadex G-50凝胶柱层析纯化,得到抗凝血活性更强的组份G1（225.28±1.03U/g）,远高于中国药典所规定的要求。研究表明,经水煎煮提取、浓缩、干燥等高温处理后的水蛭提取组份尚有明显的抗凝血活性,说明除水蛭素外,水蛭中还有其它的抗凝血活性成分的存在。2凯氏定氮法测定实验所得产品的蛋白质含量凯氏定氮法测定A1、G1蛋白质含量,其蛋白质含量明显低于水蛭粉、水蛭粗提取组份的总氮含量。但它们的抗凝血活性明显高于水蛭粉及水蛭粗提取组份的抗凝血活性,研究表明水蛭抗凝血活性与总氮含量之间的关系尚需进一步深入研究。3活性组份抗血栓药效学实验研究药效学研究表明抗凝活性组份G1能抑制大鼠动静脉旁路循环实验性血栓的形成,显着降低大鼠血小板数量及抑制血小板聚集,降低血浆粘度以及缩短小鼠全血浆凝块溶解时间和优球蛋白溶解时间,减轻大鼠不完全性脑缺血的脑血管通透性。4活性组份慢性毒性实验研究抗凝活性组份G1长期毒性实验结果表明：在20、10、5mg/kg剂量范围内,SD大鼠给药及停药期间一般状况良好,粪便成形、行为活动、进食、体重增长情况均无异；给药组大鼠60天及停药15天的血常规、肝肾功能、血液生化指标及重要器官的脏器系数等实验指标与对照组基本相同,无显着性差异（P>0.05）。给药60天及停药15天各组大鼠器官的组织病理学检查结果显示：各器官组织形态结构与正常对照组基本相同,未见明显病理改变,脏器未见明显毒性损伤。5活性组份急性毒性实验研究急性毒性实验表明,小鼠一次灌服5Omg/kg抗凝活性组份G1溶液的最大给药量30g生药/kg,无小鼠死亡现象发生,组织器官切片均无异常。结论：1.水蛭粗提组份经过DEAE Sephadex A-50、Sephadex G-50凝胶柱分离纯化,获得抗凝活性显着增高活性组份A1,G1,本研究所采用的分离纯化方法简单,环保。其中抗凝活性组份G1的抗凝血作用强,可望在临床上用于血栓性疾病的治疗。2.水蛭粗提取组份的蛋白质含量最高,但其抗凝活性明显低于纯化后的活性组份A1,G1,说明提取所得各组份的抗凝活性和其中含氮量无线性关系。此外,此结果提示提取组份中的某些不含氮的化合物也可能通过其他凝血机制发挥抗凝活性作用,尚需进一步深入研究。3.通过一系列的药效学实验和毒理学实验,说明本研究所得抗凝活性组份基本无药理毒性,使用安全、抗凝活性高,可以代替水蛭入药以克服水蛭传统口服存在的问题并为水蛭的剂型研究提供参考。
李萍[7]（2014）在《破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠NF-κB信号通路作用机制研究》文中指出目的：本研究拟于大鼠脑出血模型上应用ELISA、免疫组化、RT-PCR等方法，研究破血化瘀、填精补髓法是否通过调节NF-κB信号通路减轻脑出血后的继发损伤机制，以论证破血化瘀、填精补髓法可以减轻脑出血后炎症反应和细胞凋亡，保护神经功能，促进脑组织损伤修复的假说，探索破血化瘀、填精补髓法治疗脑出血的机制。方法：1.选择正常Wistar雄性大鼠，体重240g～260g，随机分为假手术组、脑出血模型组（模型组）、出血性中风方剂组（方剂组）、脑血康对照组（对照组），按照自体尾动脉血注射方法制备稳定的脑出血模型。2.通过神经行为学评分、干湿重法、HE染色法观察破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠的神经功能缺损、脑含水量及血肿周围脑组织病理的干预效果。3.应用ELISA法检测脑出血血肿周围脑组织的IL-1、IL-6、TNF-的表达变化。4.应用免疫组化法和RT-PCR法检测NF-κB、TLR4、MyD88的蛋白表达及mRNA的变化。结果：1.假手术组Longa评分为0分，方剂组和对照组与模型组比较可明显降低神经功能缺损评分（P<0.05），其中方剂组功能恢复最为明显，与对照组比较存在显着差异（P<0.05）。2.模型组大鼠脑含水量较假手术组增加明显（P<0.05），方剂组和对照组脑含水量与模型组比较下降明显，其中方剂组下降更为显着，与对照组比较存在显着差异（P<0.05）。3.模型组与方剂组和对照组HE染色均显示脑组织病理变化明显，3d时病理较5d时改变更显着，但方剂组和对照组的脑组织破坏较模型组大鼠轻。4. ELISA法检测3d时血肿周围脑组织中IL-1、IL-6、TNF-含量，方剂组和对照组均低于模型组，存在显着差异（P<0.05），方剂组降低IL-1、IL-6、TNF-能力与对照组比较，无显着性差异（P﹥0.05）。5.脑出血后3d，NF-κB、TLR4、MyD88的表达一致。模型组与假手术组比较，模型组阳性细胞表达最强，数目最多，着色最深，呈棕褐色；对照组与方剂组阳性细胞中等强度表达，数目较少，着色为棕黄色；假手术组阳性细胞阳性表达较弱，着色为淡黄色，数目最少。其灰度值检测，各组与模型组比较有极显着性差异（P<0.01），方剂组与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。6. RT-PCR检测，NF-κB、TLR4、MyD88的表达一致。模型组与假手术组相比，NF-κBmRNA、TLR4mRNA、MyD88mRNA水平明显增高（P<0.01）；方剂组和对照组与模型组相比，NF-κB mRNA、TLR4mRNA、MyD88mRNA水平明显降低（P<0.05），两者之间也有差异（P<0.05）。结论：1.证实破血化瘀、填精补髓法可以明显降低脑出血后脑水肿程度，减轻血肿周围损伤脑组织的炎症反应，改善神经功能缺损程度。2.脑出血后血肿周围脑组织中IL-1、IL-6与TNF-的表达增多，受损脑组织细胞形态的病理变化与其密切相关，破血化瘀、填精补髓法可以抑制IL-1、IL-6与TNF-的表达，对抗脑出血后的炎症反应。3. NF-κB、TLR4、MyD88可在脑出血后血肿周围受损脑组织中表达增多，破血化瘀、填精补髓法治疗ICH的机制可能是调节NF-κB-TLR4-MyD88信号通路抑制炎症反应和细胞凋亡而达到“解毒”目的，并且治疗由“毒损所致”的髓虚，既针对“诸毒”之标，又兼顾“髓虚”之本而发挥治疗脑出血作用。
王维琼,赵德喜[8]（2013）在《水蛭治疗出血性脑卒中》文中指出中医认为,"离经之血便是瘀血""瘀血不去,则出血不止,新血不生",应用活血化瘀药治疗出血性脑卒中体现"宁血"之法。水蛭作为主要的活血化瘀药之一,有"破瘀血而不伤新血"之功,药理研究表明,水蛭可抗凝血酶活性、减轻脑水肿、改善血脑屏障的通透性、促进神经细胞功能恢复,治疗出血性脑卒中疗效确切,安全可靠。
刘晓萍[9]（2012）在《脑血疏口服液的实验研究与临床效果评价》文中认为脑血疏口服液是一种具有益气、活血、化瘀作用的复方中药,目前作为治疗脑出血的药物已在临床上广泛使用。研究发现脑血疏口服液具有显着加快血肿吸收、改善脑出血患者的神经功能缺损程度和临床综合症状等作用。本文以近年来发表的文献为依据,综述了脑血疏口服液药理、药效、毒理及临床研究概况,并对其发展前景做了展望。
李妍[10]（2012）在《活血及利水中药对大鼠脑出血后脑水肿干预作用的研究》文中提出目的探讨活血、利水中药治疗脑出血后脑水肿的作用机制。方法1.采用自体股动脉血注入脑尾状核建立大鼠脑出血模型, SD雄性大鼠随机分为假手术组（36只）、模型组（36只）、活血组（36只）和利水组（36只），并设立造模后1d、3d、5d三个时间观察点；2.组织干湿重法计算脑含水量；3. HE染色观察血肿周围脑组织病理改变；4.免疫组织化学染色法、Western Blot和Real-time PCR法分别检测大鼠血肿周围脑组织AQP4和PAR-1蛋白和基因的表达；5.免疫组织化学染色法和Real-time PCR法分别检测大鼠血肿周围脑组织炎症因子NF-κB、TNF-α和IL-1β蛋白和基因的表达。结果1.与假手术组比较，模型组大鼠各时间点血肿周围脑组织含水量明显增加，AQP4、PAR-1、NF-κB、TNF-α和IL-1β蛋白及基因的表达明显增强（P<0.01）；2.与模型组相比较，活血组和利水组各时间点血肿周围脑组织含水量明显下降，AQP4、PAR-1、TNF-α和IL-1β的表达均显着降低（P<0.05），活血组NF-κB表达明显低于模型组（P<0.05），利水组NF-κB表达与模型组比较无统计学意义（P>0.05）；3.活血组和利水组之间相比较，血肿周围脑组织含水量、AQP4、PAR-1、NF-κB、TNF-α和IL-1β的表达均有统计学意义（P<0.05）；4.模型组大鼠相关性分析显示，脑组织含水量与AQP4表达呈正相关，AQP4的表达与PAR-1的表达呈正相关，PAR-1的表达与炎性因子NF-κB、TNF-α和IL-1β的表达分别呈正相关；5.模型组大鼠血肿周围脑组织可见明显的病理改变，活血组、利水组血肿周围脑组织的病理变化得到改善。结论1.凝血酶—PAR-1——炎症反应途径可能是AQP4上游信号通路的一部分，凝血酶及其受体PAR-1可能通过其介导的炎症反应上调血肿周围组织AQP4的表达而参与脑出血后脑水肿的形成；2.活血、利水中药均能够减轻脑水肿，其作用机制可能是通过干预血肿周围脑组织中相关蛋白、细胞因子的表达实现的，但是，不同功效的中药其作用环节、作用靶点和作用强度不同。
二、水蛭提取液对实验性脑内血肿吸收的病理学及动物行为的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、水蛭提取液对实验性脑内血肿吸收的病理学及动物行为的影响（论文提纲范文）
（1）基于破血化瘀法的脑出血方干预脑血肿吸收机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 综述一、脑出血的中西医治疗现状与进展 |
| 1 中医对于脑出血的认识 |
| 2 |
| 3. 小结 |
| 综述二、脑出血的内源清除机制研究进展 |
| 1 小胶质细胞吞噬RBC作用 |
| 2 RBC内源性清除 |
| 3 Hb内源性清除 |
| 4 炎性反应 |
| 5 结语 |
| 实验研究 |
| 实验一 脑出血方对脑出血大鼠模型血肿吸收的调控作用及分子机制 |
| 第一章 脑出血方对 IV 型胶原酶诱导脑出血模型大鼠行为学的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据处理 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 第二章 脑出血方对 IV 型胶原酶诱导脑出血模型大鼠血肿周围组织中 CD36 信号通路相关蛋白表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据处理 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 实验二 脑出血方对脑出血体外模型血肿吸收的调控作用及分子机制 |
| 第一章 小胶质细胞与红细胞共培养建立脑出血体外模型 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 第二章 优化 Microglia 与 RBC 体外共培养模型 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据统计分析 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 第三章 基于破血化瘀法的脑出血方干预小胶质细胞对红细胞的吞噬情况 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据统计分析 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 第四章 基于破血化瘀法的脑出血方对脑出血体外模型相关蛋白表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据处理 |
| 4. 实验结果 |
| 5 小结 |
| 第五章 基于破血化瘀法的脑出血方是否通过CD36 影响脑出血体外模型血肿清除 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3. 数据统计分析 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
（2）脑血疏干预Nrf2/CD163诱导小胶质细胞M2型极化促进脑出血血肿吸收的机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 脑血疏口服液与中枢神经系统疾病的研究概况 |
| 1 脑血疏口服液的中医配伍作用 |
| 2 脑血疏口服液的药理学作用 |
| 3 脑血疏口服液的安全性 |
| 4 脑血疏口服液临床应用 |
| 5 脑血疏口服液作用机制 |
| 6 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 CD163与中枢神经系统疾病的研究进展 |
| 1 CD163的结构和功能 |
| 2 CD163的表达形式 |
| 3 CD163与中枢神经系统疾病 |
| 4 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 脑血疏口服液对脑出血大鼠神经功能损伤的行为学观察 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二脑血疏口服液对脑出血大鼠脑组织病理结构和神经元损伤的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 脑血疏口服液干预NRF2/CD163通路诱导小胶质细胞M2型极化的作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）脑出血急性期中医分阶段治疗方案及蛭龙活血通瘀胶囊的干预作用机制研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第一部分 临床观察 |
| 引言 |
| 临床观察技术路线 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 病例选择 |
| 1.2.1 西医诊断标准 |
| 1.2.2 中医诊断标准 |
| 1.2.2.1 疾病诊断 |
| 1.2.2.2 证候诊断 |
| 1.2.3 疾病分期诊断 |
| 1.2.4 病情严重程度划分 |
| 1.2.5 纳入标准 |
| 1.2.6 排除标准 |
| 1.2.7 剔除及脱漏标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 分组情况 |
| 2.2 急性期病程阶段的划分 |
| 2.3 治疗方法 |
| 2.3.1 对照组 |
| 2.3.2 观察组 |
| 2.4 观察指标 |
| 2.4.1 各组一般情况 |
| 2.4.2 疗效性观察指标 |
| 2.4.2.1 中医证候学的观察 |
| 2.4.2.2 卒中相关量表的观察 |
| 2.4.2.3 血肿体积(出血量)的观察 |
| 2.4.3 疗效判定标准 |
| 2.4.3.1 中医证候疗效判定 |
| 2.4.3.2 西医临床疗效评定分级标准 |
| 2.4.3.3 颅内血肿的判定标准 |
| 2.4.4 安全性指标 |
| 2.5 统计学分析 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 两组一般情况比较 |
| 3.1.1 两组性别分布比较 |
| 3.1.2 两组年龄(岁)比较 |
| 3.1.3 两组身高(cm)比较 |
| 3.1.4 两组体重(kg)比较 |
| 3.1.5 两组发病时间(h)比较 |
| 3.1.6 两组出血部位比较 |
| 3.1.7 两组病情严重程度比较 |
| 3.1.8 两组中医证候分布比较 |
| 3.1.9 两组合并症比较 |
| 3.2 两组疗效性观察指标比较 |
| 3.2.1 两组治疗前后中医症状量化评分比较 |
| 3.2.2 两组NIHSS量表评分前后比较 |
| 3.2.3 两组Barthel指数评分前后比较 |
| 3.2.4 两组改良Rankin量表评分前后比较 |
| 3.2.5 两组血肿体积(cm~3)治疗前后比较 |
| 3.3 两组临床疗效比较 |
| 3.3.1 两组中医证候疗效比较 |
| 3.3.2 两组西医临床疗效评定比较 |
| 3.3.3 两组颅内血肿疗效比较 |
| 3.4 两组安全性指标及不良反应情况比较 |
| 3.4.1 两组治疗前后生命体征情况比较 |
| 3.4.2 两组治疗前后血常规检验比较 |
| 3.4.3 两组治疗前后肝肾功能、凝血功能检验情况比较 |
| 3.4.4 两组治疗前后大小便检验情况 |
| 3.4.5 不良反应发生情况 |
| 3.4.6 两组不良反应发生情况比较 |
| 4 小结 |
| 5 讨论 |
| 5.1 中医对脑出血急性期的认识及诊治思路 |
| 5.2 关于脑出血临床疗效评判指标的选择 |
| 5.3 蛭龙活血通瘀胶囊治疗脑出血急性期的理论依据 |
| 第二部分 动物实验 |
| 引言 |
| 动物实验技术路线 |
| 实验一：蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠脑水肿的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物和试剂 |
| 1.3 实验仪器及耗材 |
| 1.4 动物分组 |
| 1.5 模型制备 |
| 1.6 模型评估 |
| 1.7 给药方法 |
| 1.8 检测指标 |
| 1.8.1 神经行为学功能检测 |
| 1.8.2 脑含水量及脑系数检测 |
| 1.8.3 脑组织HE染色病理组织学检测 |
| 1.9 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠神经行为学的影响 |
| 2.2 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠脑含水量的影响 |
| 2.3 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠脑系数的影响 |
| 2.4 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠脑组织病理学的影响 |
| 3 小结 |
| 4 讨论：脑出血动物模型制备 |
| 实验二：蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠血脑屏障功能的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物及试剂 |
| 1.3 实验仪器及耗材 |
| 1.4 动物分组 |
| 1.5 模型制备及评定 |
| 1.6 给药方法 |
| 1.7 检测指标 |
| 1.7.1 血脑屏障通透性检测 |
| 1.7.2 血脑屏障超微结构观察 |
| 1.8 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠血脑屏障通透性的影响 |
| 2.2 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠血脑屏障超微结构的影响 |
| 3 小结 |
| 4 讨论：脑出血后脑水肿与血脑屏障通透性的关系 |
| 实验三：蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白和基因的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物及试剂 |
| 1.3 实验仪器及耗材 |
| 1.4 动物分组 |
| 1.5 模型制备及评定 |
| 1.6 给药方法 |
| 1.7 检测指标 |
| 1.7.1 待检样品制备 |
| 1.7.2 AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白检测 |
| 1.7.2.1 蛋白提取及检验 |
| 1.7.2.2 Western blot操作步骤 |
| 1.7.3 AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA检测 |
| 1.7.3.1 引物设计 |
| 1.7.3.2 RNA的提取 |
| 1.7.3.3 合成cDNA |
| 1.7.3.4 RT-PCR扩增 |
| 1.7.3.5 RNA电泳及检测 |
| 1.8 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠AQP-4、MMP-9和TIMP-1蛋白表达的影响 |
| 2.1.1 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠AQP-4蛋白表达的影响 |
| 2.1.2 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠MMP-9蛋白表达的影响 |
| 2.1.3 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠TIMP-1蛋白表达的影响 |
| 2.2 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达的影响 |
| 2.2.1 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠AQP-4 mRNA表达的影响 |
| 2.2.2 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠MMP-9 mRNA表达的影响 |
| 2.2.3 蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠TIMP-1 mRNA表达的影响 |
| 3 小结 |
| 4 讨论 |
| 4.1 AQP-4与脑出血后脑水肿的关系 |
| 4.2 MMP-9与脑出血后脑水肿的关系 |
| 4.3 TIMP-1与脑出血后脑水肿的关系 |
| 参考文献 |
| 第三部分：文献综述 |
| 1 活血化瘀法在脑出血急性期的应用及研究现状 |
| 2 蛭龙活血通瘀胶囊治疗脑血管疾病的研究现状分析 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附件1:中风病证候诊断量表 |
| 附件2:中风病症状分级量化评分表 |
| 附件3:美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS) |
| 附件4:改良Rankin量表（MRS评分） |
| 附件5: Barthel指数(Bl评分） |
| 附件6:安全性监测指标及血肿体积监测信息表 |
| 附件7:在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（4）脑血疏口服液对脑出血大鼠血肿体积的影响及神经功能的保护作用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物分组 |
| 1.2 动物模型的建立 |
| 1.3 相关指标测定及方法 |
| 1.3.1 大鼠神经行为学评分 |
| 1.3.2大鼠血肿形态观察与体积测量 |
| 1.3.3 大鼠脑组织超微结构观察 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 大鼠神经行为学观察与评分 |
| 2.2 大鼠血肿形态观察与体积测量 |
| 2.3 大鼠脑组织超微结构观察 |
| 3 讨论 |
（5）“百会”透“曲鬓”对脑出血急性期大鼠p-jak、p-stat3、EGFR、GFAP影响的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 综述 |
| 1 中医对脑出血的研究 |
| 1.1 人脑功能中医的认识 |
| 1.2 脑出血中医病名的认识 |
| 1.3 脑出血病因病机中医的认识 |
| 1.4 祖国医学对脑出血的辨证治疗 |
| 2 针灸治疗脑出血的概况 |
| 2.1 现代脑出血针灸治疗的临床认识 |
| 2.2 针灸治疗脑出血的临床机理研究 |
| 3 现代医学对脑出血的认识 |
| 3.1 脑出血的病理学改变 |
| 3.2 脑出血的治疗方法 |
| 4 EGFR-JAK/STAT通路研究进展 |
| 4.1 现代对EGFR研究 |
| 4.2 JAK与STAT蛋白 |
| 4.3 JAK-STAT通路 |
| 4.4 EGFR-JAK/STAT信号转导在活化的星形胶质细胞中作用 |
| 5 GFAP在中枢系统中的现代研究 |
| 5.1 颅脑损伤后星形胶质细胞的变化 |
| 5.2 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) |
| 5.3 星形胶质细胞的发育过程 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料与实验方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 不同时间点各组大鼠神经功能缺损评分比较 |
| 2.2 不同时间点各组大鼠脑组织HE染色结果 |
| 2.3 脑组织中各组p-JAK大鼠蛋白免疫印迹结果 |
| 2.4 不同时间点各组大鼠脑组织p-STAT3免疫组化染色结果 |
| 2.5 不同时间点各组大鼠脑组织GFAP免疫组化染色结果 |
| 2.6 不同时间点各组大鼠脑组织EGFR免疫组化染色结果 |
| 讨论 |
| 1 “百会”透“曲鬓”针刺方案的选择 |
| 1.1 头针的理论基础 |
| 1.2 选穴理论依据 |
| 2 动物模型选择依据 |
| 2.1 实验动物种类的选择 |
| 2.2 实验动物模型的选择 |
| 3 实验条件的控制 |
| 3.1 温度和空气湿度 |
| 4 针刺“百会”透“曲鬓”对实验性ICH大鼠EGFR-JAK/STAT表达相关性的探讨 |
| 4.1 头穴透刺法对脑出血模型大鼠脑组织p-jak、p-stat3的影响 |
| 4.2 头穴透刺法对脑出血模型大鼠脑组织EGFR、GFAP的影响 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（6）基于水蛭传统给药的抗凝活性组份的相关研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 目录 |
| 引言 |
| 文献研究部分 |
| 第一章 水蛭研究概述 |
| 第二章 抗凝活性组份测定方法的研究概况 |
| 1 生物底色法 |
| 2 体外抗凝血活性测定 |
| 3 血浆复钙时间 |
| 4 凝血酶滴定法 |
| 5 毛细管法 |
| 第三章 水蛭的抗凝活性提取组份药理学研究近况 |
| 1 抗凝血、抗血栓形成作用 |
| 2 抗肿瘤作用 |
| 3 抗纤维化作用 |
| 4 其它药理学研究 |
| 第四章 水蛭素临床应用研究概况 |
| 1 脑出血治疗 |
| 2 术后的抗凝治疗 |
| 3 保护脑缺血再灌注损伤 |
| 4 其它临床应用 |
| 第五章 水蛭给药途径研究概况 |
| 1 口服 |
| 2 经鼻给药 |
| 3 其它给药方式 |
| 第六章 研究思路 |
| 实验研究部分 |
| 第一章 水蛭抗凝活性粗提取组份提取工艺初步研究 |
| 1 仪器与试药 |
| 2 主要试剂的配置 |
| 3 实验方法 |
| 4 讨论 |
| 第二章 水蛭抗凝粗提组份凝胶柱层析分离纯化 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法与结果 |
| 3 结果分析 |
| 4 讨论 |
| 第三章 水蛭抗凝活性组份的蛋白质含量测定 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论与分析 |
| 第四章 水蛭抗凝活性组份药效学研究 |
| 1 材料与仪器 |
| 2 主要试剂的配制 |
| 3 实验方法 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 第五章 水蛭抗凝活性组份毒理学研究 |
| 1 材料与仪器 |
| 2 水蛭活性组份的制备 |
| 3 实验方法 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读研究生期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（7）破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠NF-κB信号通路作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 综述一：脑出血发病机制及现代医学治疗研究进展 |
| 综述二：出血性中风中医药治疗概况 |
| 综述三：活血化瘀法治疗出血性中风的实验研究现状 |
| 实验研究 |
| 实验一：破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠模型脑组织形态及神经功能缺损程度的影响 |
| 实验二：破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠模型 IL-1、IL-6、TNF- 的影响 |
| 实验三：破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠模型 NF-κB、TLR4、MyD88 蛋白表达的影响 |
| 实验四：破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠模型 NF-κB、TLR4、MyD88 基因表达的研究 |
| 讨论 |
| 1 “破血化瘀、填精补髓”法治疗出血性中风的确立依据 |
| 2 方剂解析 |
| 3 结果分析 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
（8）水蛭治疗出血性脑卒中（论文提纲范文）
| 1 理论研究 |
| 2 实验研究 |
| 3 临床研究 |
| 3.1 单味制剂 |
| 3.2 复方汤剂 |
| 3.3 中成药 |
| 3.4 针剂 |
| 4 问题与展望 |
（9）脑血疏口服液的实验研究与临床效果评价（论文提纲范文）
| 1 实验研究 |
| 1.1 药理及药效学研究 |
| 1.2 毒理学研究及稳定性评价 |
| 2 治疗脑出血效果评价 |
| 3 治疗血管性痴呆效果评价 |
| 4 小结 |
（10）活血及利水中药对大鼠脑出血后脑水肿干预作用的研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 一、 出血性中风血瘀病机的中医学研究 |
| （一） 血瘀理论 |
| （二） 出血性中风血瘀病机的确立 |
| （三） 出血性中风血瘀病机的形成及其演变 |
| （四） 活血化瘀法在出血性中风中的应用 |
| 二、 脑出血后脑水肿的西医学研究 |
| （一） 脑出血后脑水肿的分子生物学基础研究 |
| （二） 脑出血后脑水肿的西医治疗研究现状 |
| 第二部分 实验研究 |
| 一、 主要实验材料和仪器 |
| （一） 仪器 |
| （二） 试剂 |
| （三） 主要溶液的配制 |
| 二、 实验方法 |
| （一） 实验动物及分组 |
| （二） 动物模型的建立 |
| （三） 实验药物的制备及用药方法 |
| （四） 标本的取材和制备 |
| （五） 神经功能缺损评分 |
| （六） 大鼠脑组织含水量的测定 |
| （七） HE 染色流程 |
| （八） 免疫组化法检测 AQP4、PAR-1、NF-κBp65、TNF-α及 IL-1β的表达 |
| （九） Real-time PCR 检测脑组织 AQP4、PAR-1、NF-κBp65、TNF-α和 IL-1β的表 达 |
| （十） Western blot 检测脑组织 AQP4 和 PAR-1 蛋白的表达 |
| （十一）统计学处理 |
| 三、 结果 |
| （一） 动物的一般情况及体重改变 |
| （二） 各组大鼠神经功能缺损评分 |
| （三） 各组大鼠脑组织含水量的变化 |
| （四） 组织病理学改变 |
| （五） 各组大鼠各时间点 AQP4 蛋白和基因的表达 |
| （六） 各组大鼠各时间点 PAR-1 蛋白和基因的表达 |
| （七） 各组大鼠各时间点 NF-ΚBp65 蛋白和基因的表达 |
| （八） 各组大鼠各时间点 TNF-α蛋白和基因的表达 |
| （九） 各组大鼠各时间点 IL-1Β蛋白和基因的表达 |
| （十） 相关关系分析 |
| 四、 讨论 |
| （一） 脑出血模型的制备 |
| （二） 基于血水理论探讨脑出血后脑水肿发病机制及治疗 |
| （三） 药物的选择及现代药理研究 |
| （四） 活血、利水中药对实验性大鼠脑出血后脑水肿的干预机制探讨 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录 1 图片 |
| 附录 2 英文缩略语 |
| 致谢 |
| 在读期间论文发表及科研参与情况 |
| 附件1 |
| 附件2 |
| 详细摘要 |
四、水蛭提取液对实验性脑内血肿吸收的病理学及动物行为的影响（论文参考文献）
- [1]基于破血化瘀法的脑出血方干预脑血肿吸收机制的研究[D]. 王若男. 长春中医药大学, 2020(08)
- [2]脑血疏干预Nrf2/CD163诱导小胶质细胞M2型极化促进脑出血血肿吸收的机制[D]. 田超. 北京中医药大学, 2020(04)
- [3]脑出血急性期中医分阶段治疗方案及蛭龙活血通瘀胶囊的干预作用机制研究[D]. 王蔚. 成都中医药大学, 2016(05)
- [4]脑血疏口服液对脑出血大鼠血肿体积的影响及神经功能的保护作用[J]. 艾鑫,刘翠. 中西医结合心脑血管病杂志, 2014(07)
- [5]“百会”透“曲鬓”对脑出血急性期大鼠p-jak、p-stat3、EGFR、GFAP影响的实验研究[D]. 曲馨. 黑龙江中医药大学, 2014(04)
- [6]基于水蛭传统给药的抗凝活性组份的相关研究[D]. 李宝红. 广州中医药大学, 2014(01)
- [7]破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠NF-κB信号通路作用机制研究[D]. 李萍. 长春中医药大学, 2014(03)
- [8]水蛭治疗出血性脑卒中[J]. 王维琼,赵德喜. 长春中医药大学学报, 2013(03)
- [9]脑血疏口服液的实验研究与临床效果评价[J]. 刘晓萍. 中国药物经济学, 2012(06)
- [10]活血及利水中药对大鼠脑出血后脑水肿干预作用的研究[D]. 李妍. 山东中医药大学, 2012(12)
标签：蚂蝗论文; 脑出血论文; 水蛭的作用与功效论文; 中医论文; 对照组论文;