一、中国大蒜(Allium sativum L.)18个品种的酯酶同工酶多态性分析(论文文献综述)
王丹丹[1](2018)在《基于SRAP和TRAP标记的新疆10种野生葱蒜的遗传多样性》文中研究指明葱蒜是世界范围内重要的食用、药用、蔬菜、饲料和观赏植物资源,其中洋葱、葱及大蒜等是重要的经济作物在我国广泛栽培。新疆是我国及中亚地区野生葱蒜重要的分布地,其特殊的地理环境为葱属植物的抗逆育种提供了宝贵的基因材料。本研究以新疆10种野生葱蒜为研究材料,通过不同器官基因组DNA提取,比较基因组DNA对扩增结果影响,同时利用SRAP和TRAP分子标记对新疆10种野生葱蒜的遗传多样性进行分析,以期为开展新疆野生葱蒜种类鉴定、亲缘关系分析提供方法,为生产上葱蒜类蔬菜品种鉴定提供技术指导。主要研究结果如下:(1)利用改良SDS法对不同时期不同器官进行基因组DNA的提取,研究发现获得的基因组DNA纯度(OD260/OD280)在1.714~1.968之间,变化不大,基因组DNA的浓度在150~305μg/m L之间,变化较大。对于同一器官不同时期而言,新鲜叶片基因组DNA浓度最高,枯黄叶片的最低;花药散落前的花基因组DNA浓度最高,花蕾的最低;果实完熟期的种子基因组DNA浓度最高,绿熟期种子的最低。经基因组DNA检测及PCR产物检测表明,以上不同器官均可获得高质量的基因组DNA,且PCR产物条带清晰。(2)选用SRAP标记通用的正向和反向引物各15条,正向引物和反向引物随机组合成225对引物组合,筛选出15对引物组合,用于后期新疆10种野生葱蒜的遗传多样性研究。(3)利用筛选出的15对引物,通过程序和温度筛选最终确定SRAP的反应程序为:35℃退火温度下进行前5个循环,52℃退火条件下35个循环。2μL 10×PCR Buffer,d NTPs浓度0.225 mmol/L,引物浓度0.250μmol/L,Taq酶用量1.000 U,模板DNA用量75.000 ng为最佳SRAP-PCR反应体系。通过SRAP-PCR扩增共检测出263个位点,多态性位点为259个,多态性位点比率(PPB)为98.45%,Nei’s遗传多样性指数(H)为0.4106,香农遗传多样性指数(I)为0.5937,说明新疆10种野生葱蒜的遗传多样性较丰富。10个种群内基因多样度(Hs)和总群体遗传多样度(Ht)分别为0.2099和0.4101,基因分化系数(Gst)为0.4882,基因流(Nm)为0.5241,表明其遗传变异主要存在于种群内,种群间的基因流动性较小。基于SM系数法,其遗传相似系数为0.59~0.95,将供试材料分为六大类群,表明其亲缘关系较近。(4)选用2条固定引物和7条随机引物,以及依据NCBI数据库搜索的葱属植物EST序列设计的3条固定引物及3条随机引物,随机组合50对TRAP引物组合进行引物筛选,结果表明筛选出的11对TRAP引物组合在不同种群及其近缘种间有一定的通用性。(5)采用筛选出的11对引物组合,进行退火温度筛选,确定TRAP-PCR的第一步退火温度为37℃,第二步退火温度为53.2℃。经优化,最终确定TRAP-PCR最佳反应体系为2μL 10×PCR Buffer,0.250 mmol/L d NTPs,0.250μmol/L引物,0.750 U Taq酶,75.000 ng模板DNA。TRAP标记共检测到202个位点,多态性位点为188个,多态性位点比率(PPB)为93.11%,种群间的Nei’s遗传多样性指数(H)为0.1704,香农信息指数(I)为0.2449,种群内基因遗传多样度(Hs)为0.1894;总种群遗传多样度(Ht)为0.3939,种群间基因分化系数(Gst)为0.5192,而种群间的基因流(Nm)为0.4630,说明新疆10种野生葱蒜的遗传多样性较丰富,且遗传变异主要存在于种群间,种群间的基因流动性较小。基于SM系数法,其相似系数为0.60~0.95,将供试材料分为4大类群,表明其亲缘关系较近。(6)通过对SRAP和TRAP标记的比较研究,新疆10种野生葱蒜遗传多样性丰富、且遗传距离与地理距离没有相关性。
晏姿[2](2017)在《香雪兰种质资源评价及其调控技术的研究》文中进行了进一步梳理香雪兰(Freesia spp.)是世界十大切花之一,早在18世纪中期至19世纪,欧洲一些国家已经开始从南非引入香雪兰原种开展了杂交育种工作,近些年来,我国每年从国外引进的香雪兰种球种类繁多,并培育出了一些新品种,但缺乏相应品种分类保存及管理体系,加上市场上一些商业种球的无秩序流通,使得现有香雪兰种质资源容易出现品种混乱的现象,且由于气候、区域的差异,种球很容易出现退化,种质资源得不到充分利用,这些都严重阻碍了香雪兰在我国切花市场的推广与应用。故本研究以国内自育和国外进口香雪兰品种为对象,首先从形态特征和随机扩增多态性DNA分子标记(Random polymorphism DNA,RAPD)两个水平对其进行种质资源的评价,为我国香雪兰种质资源的利用提供参考依据;在此基础上进一步探索了不同基质配比、生物肥、缓释肥及植物生长调节剂对香雪兰株型与花期的调控,为香雪兰在我国的切花与盆栽生产中提供实践经验。主要研究结果如下:1.对26个品种的20个形态指标进行测定与分析,结果显示:变异性分析表明26个香雪兰品种之间存在较为丰富的性状变异,尤其是与开花有关的性状变异最为丰富,其中瓣型的变异系数最大,为145.9%;相关性分析表明香雪兰的植株性状(株高、叶宽)、开花性状(花葶高、花径、花葶数、花梗粗度、现蕾期)与球茎性状(大球直径与重量、仔球数)三者之间关联度高;主成分分析表明香雪兰的株高、叶宽、花径、花葶高、花色、瓣型、茎粗、初花期、盛花期、大球重量、大球直径、仔球数等12个指标可以较全面地反映其主要形态特征,今后在对新的香雪兰品种进行分类研究时可依据上述特征进行分析;形态特征聚类分析的结果表明,26个香雪兰品种被分为两大类,第一类主要特征是株型较矮、叶片较窄、花小,包括9个国内自育品种和2个国外进口品种;第二大类主要特征是株型高大、叶片宽硕、花大,包括14个进口品种和1个国内自育品种,花色和产地是香雪兰品种聚类的2大关键因素。2.进一步,利用RAPD分子标记技术对35份香雪兰种质材料进行了种质资源评价。试验选取了82条随机引物,共筛选出15条多态性最为丰富的的引物,获得148条扩增条带,多态性条带为96条,占总条带数的64.9%。35份香雪兰材料被分为两大类群,第一大类群主要特征是株型矮小、叶片细窄、花小,包含了9个国内自育品种,遗传距离在0.05-0.16之间;第二大类群主要特征是花大、花梗较粗,叶片宽硕,包含了所有进口品种和2个自育品种,遗传距离在0.02-0.25之间。其中,第二大类群又分为两小类,第1小类包括12个进口品种和1个自育品种(‘上农红台阁’),第2小类包括10个进口品种和1个自育品种(‘上农橙黄’)。3.选取11种由不同材料按不同比例组合成的复合基质,以园土作为对照进行比较分析,旨在探讨适合香雪兰栽培的基质组合。结果表明,泥炭+椰糠+不同无机基质的组合处理对香雪兰的营养生长指标效果最好,园土+椰糠+黄沙组合处理的香雪兰观赏特征表现最佳,园土+泥炭+黄沙组合和商业复合基质效果次之,且差异性不大。综合来看,50%泥炭+30%椰糠+20%蛭石基质配比最有利于香雪兰的营养生长,20%园土+60%椰糠+20%黄沙组合的香雪兰综合观赏效果最好。值得提出的是,园土的效果远远低于其他组,说明普通园土不能很好满足其生长要求,在今后栽培生产中宜适当进行改良。4.研究了生物肥料和高效缓释肥对香雪兰生长发育的影响。选用不同浓度的生物肥料海藻肥-海中宝营养液、高效缓释肥(奥绿高钾肥、奥绿标准肥)进行处理,定期测定相关指标。结果表明,海中宝稀释倍数为400倍时,植株的总鲜重、总干重、可溶性糖含量、小花数和花葶强度、大球的直径及个数均大于其他组值,且400倍液和800倍液处理后植株各指标的差异性并不显着,说明高浓度海藻肥促进了香雪兰的生殖生长及物质的合成与积累;浓度稀释倍数为2000倍时,香雪兰的植株高度远大于其他组,说明海藻肥浓度较低时,更有助于香雪兰的营养生长;除400倍液处理外,所有处理组均推迟了花期。缓释肥处理中,适宜浓度的奥绿标准肥和高钾肥都可以促进香雪兰的生长发育,其中标准肥的最佳浓度为5 g/L,高钾肥的最佳浓度为7 g/L,且高钾肥7 g/L的株高、叶宽、花葶高、花葶数、花葶强度、叶绿素含量均高于其他组,并比对照组提前10 d开花,高浓度的标准肥则会抑制香雪兰的生长发育。综合来看,海中宝400倍液,5 g/L奥绿标准肥和7 g/L高钾肥对香雪兰生长发育有着积极影响,可以指导今后生产实践。5.采用浸泡种球、叶面喷施及浸泡种球+叶面喷施等3种方式,用不同浓度水杨酸(SA)水溶液对盆栽小苍兰进行处理,以清水作为对照组,探究了SA对香雪兰生长发育的调控作用。结果表明,低浓度(150.0 mg/L)SA促进香雪兰的营养生长及球茎发育,而高浓度(450.0和600.0 mg/L)SA对香雪兰的生长及开花会产生抑制作用,且高浓度浸球方式容易损伤叶片,喷施方式对植株的矮化效果不显着。综合来看,以300.0 mg/L SA浸泡种球+450.0 mg/L SA叶面喷施对香雪兰生长及开花的综合效果最佳。此外,笔者还利用5种不同浓度的茉莉酸甲酯(Me JA)分别以浸球和喷施两种方式来处理香雪兰,结果表明,浸球处理促进了香雪兰株高生长,喷施处理则可矮化植株,但两种处理方式对香雪兰的花径、花葶数、花葶粗度和强度都没有显着影响。比较发现,10mg/L喷施处理综合效果最佳,不仅矮化效果比较好,而且其小花数量、总花期、可溶性蛋白含量均最高,且比对照组提前一周开花。
马宏亮[3](2014)在《老鸦瓣种质资源遗传多样性及其药材品质评价研究》文中进行了进一步梳理老鸦瓣Tulipa edulis(Miq.)Baker为百合科(Liliaceae)郁金香属(Tulipa)植物,其干燥鳞茎为中药光慈姑。光慈姑味甘,性寒,有毒,具有行血化瘀、解毒散结的功效,主治瘰疬,疮肿,痈疽,咽喉肿痛,产后瘀滞。根据植物志记载及实际调查结果,其主要分布于安徽、江苏、浙江、江西、湖北、山东、河南、陕西、辽宁等地。随着药用价值的开发,光慈姑在临床上的应用也越来越广泛,市场对光慈姑的需求也逐年增加。但老鸦瓣自然更新速度非常缓慢,其野生资源日趋匮乏。因此,开展老鸦瓣人工栽培技术研究十分迫切,而开展老鸦瓣种质资源遗传多样性评价研究,是有效保护、合理利用老鸦瓣的基础。目前国内外对老鸦瓣种质资源研究还是空白,缺乏不同居群间表型性状、遗传变异及药用成分的比较与分析。此外,中药的品质由遗传特性及生长环境所决定,其中遗传因素是决定中药材品质的内因。因此开展老鸦瓣资源调查及其遗传多样性研究意义重大。本研究通过资源调查,采用形态学、孢粉学、分子遗传标记及植物化学等技术,以中国10个省份28个老鸦瓣居群为材料,从表型、DNA及代谢产物三个层面,对中国老鸦瓣种质资源遗传多样性进行研究,探讨老鸦瓣遗传多样性特性及其与药材品质的关系,为有效保护、合理开发利用老鸦瓣种质资源提供理论依据。本研究的主要内容及结果如下:(1)通过对10个省份30个样点进行实地种质资源调查,结果显示老鸦瓣按照水系流域分布,其主要分布在长江中下游、黄河中下游流域、淮河流域及环渤海地区,其中集中分布在长江中下游及淮河流域,如江苏中北部、安徽中北部;主成分分析结果表明,影响老鸦瓣分布的地理及气候因子主要为年活动积温、年降水量及年日照时数,但老鸦瓣分布生境类型丰富,其对温度、光照、湿度及土壤类型的适应性较广;生境类型对老鸦瓣的繁殖方式有一定的影响。(2)对不同居群老鸦瓣的10个表型性状进行了分析,结果表明,不同居群老鸦瓣在叶及鳞茎等形态性状上存在显着差异,具有丰富的遗传变异。主成分分析结果表明鳞茎直径、鳞茎鲜重为老鸦瓣形态变异的主要因素。(3)应用扫描电镜技术对不同居群老鸦瓣花粉进行形态观察与比较分析。结果显示,老鸦瓣花粉为椭球形至长椭球形,赤道面观均为舟形。萌发沟均为单沟,均不具盖,萌发沟延伸至两极,沟中部比两端狭窄。不同居群老鸦瓣在花粉大小、表面纹饰等方面存在差异。表面纹饰的差异主要体现在纹饰类型、网脊宽度、网眼形状、大小及密度等方面。根据表面纹饰特征差异,将老鸦瓣花粉分为Ⅰ类条纹花粉及Ⅱ类网纹花粉,Ⅱ类网纹状花粉再根据网脊的宽度又分为Ⅱ a与Ⅱ b两类。Ⅱa的网脊<0.40μm,由单个或2至5个长短、方向不一的短线脊组成,网眼较大;Ⅱb的网脊>0.40 μm,其主要特征是由2至多个长短、方向不一的短线脊组成,网脊较宽,网眼较小。(4)利用ISSR(Inter-Simple Sequence Repeats)分子标记技术分析老鸦瓣遗传多样性。结果表明,在物种水平上,多态性位点百分率(PPL)为94.80%,Nei’s多样性指数(He)为0.2648。居群水平上,PPL变化范围为12.80%~40.40%,平均为28.23%。Nei’s基因分化系数(Gst)为0.533,表明居群间的遗传变异较大,居群内也存在一定的分化。UPGMA法及PCoA法的分析结果表明,不同居群老鸦瓣基本按照地理远近关系而分为五大类群,经Mantel分析,不同居群老鸦瓣遗传距离与地理距离存在一定的相关性,但个别居群也不完全按照地理距离划分。(5)应用 SRAP(Sequence-Related Amplified Polymorlphism)标记对不同老鸦瓣种质资源进行了遗传多样性水平和遗传结构分析。结果表明:在物种水平上,多态性位点百分率(PPL)高达100.00%,Nei’s多样性指数(He)为0.3311,Shannon信息指数(Ⅰ)为0.4873。居群水平上,PPL在28.48%~57.44%,平均为43.62%,PPL值较高的有河南新乡辉县及河南息县等居群。河南新乡辉县、辽宁大连、河南息县等居群的He及Ⅰ值均高于其他居群,具有较丰富的遗传多样性。He及Ⅰ与PPL值的大小变化趋势基本一致。Nei’s基因分化系数(Gst)为0.5024,表明居群内与居群间的遗传变异相当;采用UPGMA及PCoA法对28份老鸦瓣种质进行亲缘关系分析,其结果与ISSR分析略有差异,但基本呈现一致性。(6)对不同居群老鸦瓣核糖体ITS2序列进行了比较分析。结果显示ITS2序列有效分析长度为474 bp,G + C的平均含量为60.1%。ITS2序列共有18个变异位点,其中14个单核苷酸变异位点,4个简约信息变异位点。单倍型多样度(Hd)为0.561,核苷酸多态性(Pi)为0.0042,平均核苷酸差异数(K)为1.974,显示ITS2序列存在一定的遗传变异。根据ITS2序列遗传距离,应用UPGMA及PCoA法进行亲缘关系分析,结果表明,老鸦瓣种内至少存在三个变异类型,其中河南桐柏山居群构成一单系分支,其他两大变异类群基本按照地缘关系分成南北两大类型。(7)对不同居群老鸦瓣叶绿体matK序列进行了比较分析。结果显示matK序列有效分析长度为886 bp,G + C的平均含量为31.6%;matK序列共有36个变异位点,其中22个单核苷酸变异为点,14个简约信息变异为点;Hd为0.997,Pi为0.00651,K为5.766,与ITS2序列遗传变异参数相比较,matK序列提供了更丰富的遗传变异信息;根据matK序列的遗传距离,应用UPGMA及PCoA法进行遗传关系分析,其结果与ITS2序列分析结果基本一致;matK与ITS2序列相结合进行分析其优势明显。(8)采用marK、rbcL及psbA-trnH三个DNA序列作为DNA条形码技术,研究其在老鸦瓣物种鉴定中的作用。研究结果显示,老鸦瓣及同属植物的rbcL及psbA-trnH序列较为保守,序列变异位点很少,只能将老鸦瓣及同属植物与百合科其他属植物鉴别出来,而不足以在属内将老鸦瓣鉴别出来;而老鸦瓣及同属植物的matK序列遗传变异丰富,不仅可以将老鸦瓣及同属植物与百合科其他属植物鉴别出来,而且在属内水平也可以将老鸦瓣与同属植物鉴别出来,因此,matK序列可以作为老鸦瓣物种鉴定及其药材光慈姑真伪鉴定的DNA条形码。(9)建立了光慈姑多糖含量的提取及测定方法,对不同产地光慈姑药材进行了质量评价。结果表明,不同产地光慈姑药材多糖含量在8.1593~206.0053mg·g-1之间,不同产地光慈姑多糖含量差异显着,山东泰山光慈姑多糖含量最高,浙江湖州莫干山含量最低。光慈姑多糖含量高低与纬度、温度及光照等地理气候因子相关,从南至北,光慈姑多糖含量呈增加的趋势。同时应用近红外光谱结合偏最小二乘回归法,建立了快速测定光慈姑多糖的定量分析模型,模型的内部交叉验证均方差(RMESCV)值为0.0031,决定系数R2达到了 0.9994,结果显示模型的分析效果非常理想,可以用于大批量光慈姑多糖的快速测定。(10)运用等离子体发射光谱法测定了光慈姑药材中26种无机元素含量。结果表明,在大量元素中,K、Ca、Mg的含量比较高,在微量元素中Mn的含量最高,不同产地光慈姑各元素含量差异显着。主成分分析表明K、Ca及Mg元素是导致样品差异的主导因子。各产地光慈姑药材中Pb、As、Cu及Cr等重金属的含量都较低,符合《中国药典》相关规定。应用近红外光谱结合偏最小二乘回归法,建立了快速同时测定光慈姑无机元素的定量分析模型,结果表明,该定量模型对光慈姑无机元素含量具有一定的分析能力,但对不同元素的分析效果不一样,对Pb、Ni、Sn及Fe元素含量分析效果较好,而对其他元素含量分析结果误差较大,因此,应继续收集更多样品进一步优化模型。
吴凤芝,金雪[4](2014)在《葱属作物遗传多样性研究进展》文中研究说明遗传多样性作为生物多样性的重要组成部分,是生态系统多样性和物种多样性的基础。葱属作物具有较高的营养价值,是重要的世界性蔬菜和调味品,研究其遗传多样性具有重要的理论和实践意义。文章分别从表型、蛋白质及DNA水平综述葱属作物种质资源遗传多样性的研究进展,并对未来葱属作物遗传多样性的研究方向进行展望,研究集中在葱属作物交配系统、自然选择、遗传漂变、基因流等各种进化力量对其群体的影响,从多层次、多角度揭示其遗传多样性。
金雪[5](2013)在《分蘖洋葱种质资源遗传多样性的研究》文中研究表明分蘖洋葱(Allium cepa var. agrogatum Don.)为百合科(Liliaceae)葱属(Allium)草本植物,为一年生植物。它包含丰富的营养、具有较高的药用价值,是世界上重要的蔬菜和调味品,在我国东北地区有广泛种植,如黑龙江省、吉林省等地区。分蘖洋葱生长时期短,病虫害较轻,可以减少农药使用,并且有效的提高了土地复种指数,适于绿色食品的发展。因此,具有较好的市场前景。但一直以来分蘖洋葱品种的筛选与鉴定研究还不深入,品种分类不清,甚至可能存在同名异物及同物异名的现象,因而不利于分蘖洋葱的推广和生产。本研究以收集自黑龙江省和吉林省的48份分蘖洋葱为材料,运用ISSR、SSR、AFLP三种分子标记方法结合农艺学性状分析研究供试分蘖洋葱种质资源遗传多样性,以探明其生态遗传学关系,解决分蘖洋葱可能存在的同物异名或同名异物问题;并比较三种分子标记方法,以期找到适合分蘖洋葱遗传多样性分析的分子标记方法,最终为分蘖洋葱的品种评价与鉴定提科学论依据。本研究得到的主要结果如下:1.在田间,对分蘖洋葱的抽薹情况、幼叶色和鳞茎色和进行了调查,根据表型性状测量所得的数据计算了48份分蘖洋葱材料间的遗传相似系数,研究表明48份分蘖洋葱材料间的遗传相似系数变化在0.381.0之间。根据农艺性状观察结果构建的遗传关系图表明,在遗传相似系数为0.60处可将48份材料分为3类。2.96条ISSR引物中选出了13条多态性较高的引物,能够扩增出清晰、稳定条带。以选出的13条引物对48份分蘖洋葱材料进行了ISSR扩增,得到132条带,其中有109个多态性位点,多态性百分率达82.6%,平均每条引物能够扩增出8.4个多态性条带。48份分蘖洋葱的遗传相似系数变化范围在0.590.94之间,平均为0.75。聚类分析显示,在遗传相似系数为0.75处可将48份资源分为三大类,聚类结果与地理分布有明显关联。3.从101对SSR引物中筛选出了31对能扩增出条带的引物,其中23对具有多态性。用这23对引物对48份分蘖洋葱材料进行微卫星分析,共检测到116条带,其中有66条多态性条带,多态比率为56.9%,平均每对引物扩增2.9条多态条带。48份分蘖洋葱的遗传相似系数介于0.610.91之间,平均为0.76。聚类分析结果显示,在遗传相似系数为0.75处可将48份资源聚为3类,聚类结果与地理分布有明显关联。4.从64对AFLP选择性扩增引物中,选出了10对AFLP引物组合,能扩增出470条带,其中有288条多态性条带,多态百分率为61.3%,平均每对引物扩增28.8条多态性条带。48份分蘖洋葱材料的遗传相似系数变化范围在0.590.94之间,平均为0.72。聚类分析显示,在遗传相似系数0.73处可将48份资源分为三大类,聚类结果与地理分布有明显关联。5.三种分子标记的聚类结果一致性较高,而与农艺性状聚类结果存在较大差异,但四种分析方法的聚类结果均与地理分布有明显关联。但也有地理来源差距较大的种质聚为一类,如来自黑龙江省的“双城2”和来自吉林省的“白城1”聚在一起,说明黑龙江省与吉林省之间分蘖洋葱种质资源进行了交流。另外,聚类结果显示“宾县1”和“宾县2”,“白城1”和“双城2”,“兰西”和“4号”之间亲缘关系最近,但这些资源间遗传相似系数都未达到1。对48份分蘖洋葱资源遗传多样性的评价结果表明,48份分蘖洋葱资源遗传多样性较丰富,聚类结果均与地理分布有明显关联,未发现同物异名或同名异物现象。通过比较三种分子标记方法认为,对分蘖洋葱遗传多样性的评价以AFLP标记最为适合,在需要快速鉴定的情况下ISSR标记也较合适。
季丽静[6](2013)在《观赏芍药部分新种质SSR遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建》文中提出观赏芍药是指芍药科(Paeoniaceae)芍药属(Paeonia L.)芍药组(Sect. Paeonia)具有观赏价值的多年生宿根花卉。它不仅是我国着名的传统花卉,在世界花卉市场中也占有重要的一席之地。芍药种质资源丰富,栽培历史悠久,遍布范围广泛,一般按照种源组成的不同可将其分为中国芍药品种群、欧洲芍药品种群和杂种芍药品种群三大类。尤其是杂种芍药品种群中的芍药具有花色明亮、花型独特、生长势旺、抗性强等显着的优良性状,正逐渐成为观赏芍药育种的新趋势。但国人对芍药的认识大多局限于中国芍药品种群,对欧洲芍药品种群、杂种芍药品种群中的西方栽培品种了解甚少,致使欧美地区培育的观赏特性优异的芍药品种在我国罕有应用,因而制约了我国芍药新品种培育的进程。本研究利用课题组多年从欧洲、美洲等地区引进、收集的观赏芍药新种质,从开发微卫星标记出发,探讨了89个欧美芍药新品种及部分重要亲本原种的遗传多样性,并构建了DNA指纹图谱。主要研究成果如下:1.以二倍体品种’Charlie’s White’为材料,利用“磁珠富集法”构建了芍药的微卫星富集文库,从253个阳性克隆中挑选出193个进行测序,共得到82个微卫星位点,并设计引物50对。对这50对引物进行多态性筛选并对实验所需的PCR体系进行了优化,结果可得50对引物中共有15对具有多态性(30%)且15对引物均能扩增出清晰的条带。2.利用开发出的15对芍药多态性引物对89份芍药属材料进行遗传多样性的研究。结果显示,89份材料均能被很好地扩增。15对引物共得到145个等位位点,其中多态性等位位点达140个(96.6%),平均每对引物扩增出9.3个位点。有效等位位点从1.569到5.723变化,平均为3.795个。PIC含量的变化范围为0.362~0.825,平均0.678。遗传多样性指数最大为2.194,最小为1.082。89份材料的遗传相似系数变异范围为0.35~0.98,基于UPGMA法构建了89份材料的聚类图和主成分分析图。聚类图和主成分分析图基本能将芍药野生种与品种区分开,但在品种群分类上有所差异,聚类图较主成分分析更加能够体现材料间的遗传关系。综合以上数据可知,SSR标记所反映的多样性信息非常丰富。3.根据15对引物的多态性信息含量和Shannon遗传多样性指数大小的大小筛选出10对特征引物进行61份欧美地区芍药品种指纹图谱的构建。结果可知,利用这些特征引物能够明显区分61份材料。从绘制的指纹图谱中可知,这些芍药新品种倍型丰富,有一条带、两条带,甚至出现了三条带、四条带,该指纹图谱为芍药新种质的鉴定和倍性确定奠定了理论基础。
金雪,周新刚,刘守伟,刘淑芹,吴凤芝[7](2013)在《48份分蘖洋葱种质资源遗传多样性的ISSR标记和农艺性状分析》文中研究指明对来自黑龙江省和吉林省不同地区的48份分蘖洋葱资源的遗传多样性进行了ISSR标记及农艺性状观测分析。从51条ISSR引物中筛选到13条多态性高、扩增稳定、重复性好的引物,这13条引物共扩增出132个位点,其中109个多态位点;应用Nei-Li相似系数法估算了48份材料间的遗传相似系数,结果表明,48份分蘖洋葱遗传相似系数变化范围在0.59~0.94之间。对分蘖洋葱的抽薹情况、幼叶色、鳞茎色和单球质量进行了调查,结果表明,48份分蘖洋葱遗传相似系数变化范围在0.38~1.00之间。ISSR标记和农艺性状分析均表明48份分蘖洋葱的遗传多样性较丰富;两种方法的聚类结果基本一致,聚类结果与地理分布有明显的联系。
关明[8](2011)在《新疆大蒜种质资源鉴定及规范化种植研究》文中认为目的:大蒜(Allium sativum L.)具有多重功效,是国内外医药保健品、食品加工等领域的研究热点。新疆地处大蒜的原产地——中亚,其地产大蒜是优势药用植物资源,在国际上被称为“高蒜氨酸大蒜”。本研究旨在阐明新疆地产大蒜与内地部分省区大蒜以及新疆不同品种大蒜之间的亲缘关系,为新疆优势药用大蒜的筛选提供分子水平的佐证;比较不同品种大蒜的品质优劣和差异,为筛选优质种质提供参考;制订操作规程,为大蒜规范化种植提供借鉴;为新疆优势药用大蒜的GAP规范化种植、优良育种及种质资源保护提供依据。方法:1)大蒜种质资源RAPD遗传多样性分析采用CTAB法提取大蒜基因组DNA,利用核酸蛋白分析仪与琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量;PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳筛选RAPD随机引物;优化PCR反应条件和反应程序,建立大蒜RAPD-PCR优化反应体系;利用Quantity One软件结合人工方法读带,建立0、1二元原始数据矩阵;采用POPGENE1.32软件计算样品的多态性位点比率、有效等位基因数(Ne)、Nei基因多样性指数(H)和Shannon信息指数(I);采用NTSYSpc 2.10e软件计算样品的遗传相似系数,按UPGMA法进行聚类分析,建立树状图,并进行主成分分析,建立二维散点图。2)不同品种大蒜化学组分分析采用高效液相色谱法测定不同品种大蒜中蒜氨酸、潜在大蒜辣素的含量,并测定含水量,对测定结果进行聚类分析;采用傅里叶变换红外光谱仪获取各样品的红外谱图及不同波数下的透过率数据,运用主成分分析及聚类分析对谱图数据进行分析;筛选和优化高效薄层色谱条件,建立大蒜高效薄层色谱指纹图谱,利用指纹图谱解决方案软件确认共有峰,结合主成分分析与聚类分析进行相似度比较。3)不同品种大蒜的显微鉴别制作石蜡切片,借助显微照片对大蒜鳞芽组织细胞及鳞芽表皮细胞进行观察和比较鉴别。4)大蒜规范化种植初步研究采用环境监测方法和仪器分析技术对吉木萨尔县大蒜种植基地进行环境质量监测与评价;采用高效液相色谱法对大蒜活性成分进行动态检测;采用高效液相色谱法、高效薄层色谱法等修订大蒜药材质量标准(草案)的部分内容;通过田间跟踪记录并结合上述实验结果与长期实践经验制订大蒜规范化种植操作规程(草案)。结果:1)大蒜种质资源RAPD遗传多样性分析PCR反应总体积25μl,模板DNA 50 ng,引物10 pmol,dNTP 10μmol,MgCl2 50μmol,Taq DNA聚合酶1.5U,10xPCR反应缓冲液2.5μl,以重蒸馏水补充至25μl;反应程序为94℃预变性3 min,(94℃变性45 s,36℃退火1min,72℃延伸l.5min),共40个循环,72℃最终延伸7min,4℃保存;从47个RAPD随机引物筛选出条带清晰、多态性明显、重复性好的10个引物,多态性比率为68.29%,Ne =1.2993,H = 0.1916,I = 0.2942;通过分析大蒜RAPD指纹图谱中的条带,可将样品聚为第Ⅰ和第Ⅱ两大类。新疆地产大蒜样品聚为第Ⅰ大类,包括四类:第一类以天山以北地区的样品为主,蒜氨酸含量一般;第二类以天山以南地区的样品为主,蒜氨酸含量高;第三类仍以天山以南地区的样品为主,蒜氨酸含量较高;第四类以新疆东部地区的样品为主,蒜氨酸含量较低;山东、河南等内地大蒜样品聚为第Ⅱ大类,即第五类。2)不同品种大蒜化学组分分析不同品种大蒜的蒜氨酸、潜在大蒜辣素等活性成分含量差异显着,新疆天山以南地区阿合奇县与乌什县的大蒜样品活性成分含量最高,为优势药用大蒜,按蒜氨酸、潜在大蒜辣素含量的高低可聚为四至五类;傅里叶变换红外谱图数据分析显示不同品种大蒜化学组分整体信息的相似度为76.3%~99.8%,样品可分为五大类,新疆天山以北伊犁地区样品聚为一类,天山以南地区样品聚为一类,东部地区样品聚为一类,内地样品基本聚为一类;确定正丁醇-正丙醇-冰醋酸-水(3:1:1:1)为高效薄层色谱展开剂,共指认9个特征色谱峰,不同品种大蒜在化学组分相对含量和比例上有不同程度差异,样品可分为五大类,新疆境内的大蒜样品基本以天山山脉为分化基础。3)不同品种大蒜的显微鉴别通过显微照片观察和测量发现:天山以南地区大蒜样品的鳞芽表皮细胞及气孔较大,天山以北地区大蒜样品的鳞芽表皮细胞及气孔大小居中,而新疆东部地区与内地大蒜样品则偏小;大蒜鳞芽组织细胞的大小呈现相同规律。4)大蒜规范化种植初步研究吉木萨尔县大蒜种植基地环境质量良好,达到大气环境质量一级标准、土壤质量二级标准、农用灌溉水质量标准,大蒜样品中Ca、Se含量高,As含量未超过国家标准限值,Mn、Cr含量低,未检出Pb、Cd;动态检测结果表明,大蒜逐渐成熟的8月至10月间,9月时的蒜氨酸含量达到了最高值,含水量降至最低,储存期内的12月,潜在大蒜辣素的含量达到最高值;确定0.04%三氟乙酸为高效液相色谱流动相,蒜氨酸为对照品,大蒜供试品高效薄层色谱中,在与蒜氨酸及L-精氨酸对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,大蒜药材水分均值为58.2%,酸不溶性灰分均值为0.38%;初步实施操作规程后,效果良好,三年间大蒜中蒜氨酸的含量有所回升。结论:1)地理和环境因素是影响大蒜遗传变异的主要因素。不同品种的大蒜具有较为丰富的遗传多样性,新疆境内的大蒜样品保持较近的遗传关系,并主要以天山山脉为分化基础,而山东、河南等内地大蒜样品与新疆境内大蒜样品的亲缘关系较远。2)化学组分分析的聚类结果与RAPD分子标记遗传多样性分析的聚类结果保持一致。新疆境内天山以南地区乌什县和阿合奇县的大蒜样品药用优势明显,可以作为优质种质进行进一步研究开发。3)吉木萨尔县大蒜种植基地符合GAP规定的基地环境质量要求,适宜发展成为大蒜GAP种植基地;建议9月进行大蒜采收,12月进行原料加工;大蒜药材质量标准应以蒜氨酸为对照品,并需增加水分和酸性不溶性灰分两项检查内容;操作规程规范了吉木萨尔县大蒜种植基地的生态环境和大蒜栽培技术等技术要求,可以继续完善并推广。
周静[9](2011)在《大蒜种质亲缘关系的形态学和分子标记研究》文中提出大蒜(Allium sativum L.)为百合科葱属植物,具有药食两用的功效。在不同生态环境下,所栽培的品种一般具有明显的区域适应性。长期以来,人们沿袭从形态学和生物学特性上采用数量分类学的方法对大蒜进行分类,但这种分类方法受群体数量和环境因素的影响较大,因此我们分别利用形态性状、SRAP和SSR分子标记技术对40份不同来源的大蒜种质资源进行亲缘关系的分析,为大蒜种质资源的鉴定、评价提供理论和技术基础。本研究主要的结果如下:对40个大蒜种质进行了16个农艺学性状的调查和分析,结果表明其平均形态多样性指数为3.623。基于这些农艺学性状进行聚类分析,40份种质被分为A、B两大类,A类包含了绝大多数的种质(共37份),这37份种质在不同的相似性水平上被分成三类;B类中仅包含3份种质(苏联蒜、泰国清迈蒜、韩引40号)。从380对SRAP引物中筛选出23对多态性引物。这23对SRAP引物可把40份大蒜种质在0.58的相似系数水平上可聚为A、B两大类。其中A大类共包含31份种质,在不同的遗传水平上又进一步被分为三个亚类:其中25份种质在0.65的相似性水平上被聚为第一亚类;4份种质在0.67的相似性水平上被聚为第二亚类;第三亚类包括2份种质;B大类包含了9份种质,在0.61的相似性水平上被聚为两大类,第一亚类包含6份种质;第二亚类共有包含3份种质。从100对大葱SSR引物中筛选出一对多态性引物、8对大蒜SSR引物中共筛选出5对多态性引物。这6对SSR引物可把40份大蒜资源在0.54相似系数水平上可聚为A和B两大类。其中A大类共包含30份种质,在不同的遗传水平上又进一步被分为三个亚类:其中25份种质在0.68的相似性水平上被聚为第一亚类;3份种质在0.78的相似性水平上被聚为第二亚类;第三亚类包括2份种质;B大类包含了10份种质,在0.58的相似性水平上被聚为两大类,第一亚类包含6份种质;第二亚类共包含4份种质。比较40份大蒜种质的SRAP的相似性系数矩阵和SSR标记的相似性系数矩阵,结果表明两者之间的相关系数为0.617,相关性较高。
邢莉莉[10](2009)在《60Co-γ射线对切花菊试管苗的辐射诱变效应研究》文中研究说明本研究以切花菊生根组培苗为对象,通过60Co-γ射线结合组织培养的方法,为电离辐射在切花菊诱变育种中的应用提供参考。首先以不同剂量60co-γ射线辐射‘神马’和‘长紫’两个切花菊品种的生根组培苗,再以辐射后苗的茎段和叶片为外植体进行组织培养,研究γ射线的不同辐射剂量对不同品种、不同外植体在组培阶段的损伤效应;然后对各来源再生的M1代田间主要观赏性状进行观察,统计其变异情况;在细胞学水平,观察统计变异植株减数分裂过程中的异常现象及其变异率,初步探讨了γ射线辐射对染色体减数分裂分裂行为的诱变效应和机制;最后利用ISSR技术,从分子水平鉴定这些田间性状上发生变异的植株,对它们的遗传变异程度进行分析。主要研究结果如下:(1)根据对腋芽发生情况的观察,辐射伤害主要集中在处理后2w内。20Gy处理下1w,两品种的腋芽发生数均低于对照的50%。γ射线对试管苗茎段和叶片的愈伤组织诱导和分化也有明显抑制作用,随着辐射剂量的增加抑制作用加强。‘神马’茎段愈伤组织诱导率由对照的100%下降到20Gy处理下的68%,‘长紫’相应由对照的100%下降为29%;20Gy处理时两品种叶片产生的愈伤组织均无分化。不同品种、不同来源的愈伤组织对辐射的敏感程度也存在差异。辐射处理后外植体再分化过程中,叶片由于辐射敏感性强,分化再生能力严重受抑,而茎段适合进行辐射处理后愈伤组织的诱导分化。20Gy是‘神马’试管苗辐射结合茎段再生的适宜剂量。(2)‘长紫’M1代株高降低,花径减小,而‘神马’在株高和花径上出现略微增加的趋势,两品种舌状花和管状花数无明显变化。茎段和叶片的再生植株在田间主要性状的变异程度整体上大于来源于腋芽的植株。‘神马’株高以叶片再生后代产生的变异系数最大,达到11.6%,茎段为10.7%,腋芽为10.4%;花径以茎段再生后代变异程度最大,达13.7%。‘长紫’变异后代茎段再生苗的花径变异系数为12.5%,大于腋芽的11.7%。叶形、花色、花型等性状也出现不同程度的变异。‘长紫’在花色上的变异率最高,达到了6.67%,花型最高变异率为13.33%;而‘神马’在花色上未发现有变异,花型最高变异率也仅有5.71%。表明紫花品种比白花品种更易发生花器官变异。(3)两品种辐射后代在减数分裂后期Ⅰ(AⅠ)和后期Ⅱ(AⅡ)均出现了落后染色体和染色体桥的异常现象,且异常率明显高于对照,随着处理剂量升高异常率增加,两种异常现象大体呈上升趋势。‘长紫’PMCs发生两种变异的最高比率在AⅠ分别为9.0%和11.3%,AⅡ为15.4%和8.9%。‘神马’PMCs发生变异的概率略低,AⅠ出现落后染色体及染色体桥的概率最高为10.8%和6.2%,AⅡ分别为6.3%和7.9%,有多分孢子出现。(4)对形态性状变异后代进行ISSR分析,‘长紫’扩增出多态性条带112条,多态性比率71.3%;‘神马’得到多态性条带93条,多态性比率为67.9%。说明60Co-γ射线辐射引起了后代基因组DNA不同程度的变异。从遗传相似系数可以看出,‘长紫,辐射后代的变异程度普遍大于‘神马’,基因组DNA对辐射更为敏感。不同变异类型在基因组DNA上发生的变异程度也不同,‘长紫’瓣性下降、舌状花变管状花同时发生变异的后代与对照的遗传相似性系数仅为0.072,而瓣性增加的变异后代与对照的遗传相似性系数平均达到0.375;‘神马’叶形发生变化的后代与对照的遗传相似性系数平均值在各变异类型中最高,为0.464。通过UPGMA法将‘长紫’后代分为5类,聚类结果大体上与花型和花色的变异类型相关。
二、中国大蒜(Allium sativum L.)18个品种的酯酶同工酶多态性分析(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、中国大蒜(Allium sativum L.)18个品种的酯酶同工酶多态性分析(论文提纲范文)
(1)基于SRAP和TRAP标记的新疆10种野生葱蒜的遗传多样性(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
中英文缩写词对照表 |
第1章 绪论 |
1.1 植物遗传多样性的研究 |
1.2 DNA分子标记在植物遗传多样性研究中的应用 |
1.3 存在的问题 |
1.4 本研究的目的和意义 |
1.5 研究内容及技术路线 |
第2章 实葶葱不同器官基因组DNA的提取 |
2.1 材料与方法 |
2.2 结果与分析 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第3章 基于SRAP标记的新疆野生葱蒜遗传多样性分析 |
3.1 材料与方法 |
3.2 结果与分析 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第4章 基于TRAP标记的新疆野生葱蒜遗传多样性分析 |
4.1 材料与方法 |
4.2 结果与分析 |
4.3 讨论 |
4.4 小结 |
第5章 SRAP与 TRAP在新疆野生葱蒜遗传多样性上的对比分析 |
5.1 数据分析 |
5.2 结果与分析 |
5.3 讨论 |
5.4 小结 |
第6章 结论与展望 |
6.1 结论 |
6.2 展望 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(2)香雪兰种质资源评价及其调控技术的研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 植物种质资源评价研究进展 |
1.1.1 形态学评价 |
1.1.2 细胞学评价 |
1.1.3 生化水平评价 |
1.1.4 分子生物学标记 |
1.2 香雪兰生长发育调控技术研究现状 |
1.2.1 环境调控 |
1.2.2 植物生长调节剂调控 |
1.3 研究内容与技术路线 |
1.3.1 研究目的与意义 |
1.3.2 研究内容 |
1.3.3 技术路线 |
第二章 基于形态特征的香雪兰种质资源评价 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.1.3 数据分析与统计 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 香雪兰形态特征的差异性分析 |
2.2.2 基于香雪兰形态特征的主成分分析 |
2.2.3 基于香雪兰主要形态特征的相关性分析 |
2.2.4 基于香雪兰形态特征的聚类分析 |
2.3 讨论 |
第三章 基于RAPD分子标记技术的的香雪兰种质资源评价 |
3.1 材料和方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 香雪兰花苞基因组DNA的提取 |
3.1.3 PCR扩增反应 |
3.1.4 扩增产物的电泳分离 |
3.1.5 数据分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 香雪兰扩增片段的多态性分析 |
3.2.2 香雪兰种质资源的亲缘关系的分析 |
3.3 结论与讨论 |
第四章 不同基质配比对香雪兰生长发育的影响 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 试验材料 |
4.1.2 试验方法 |
4.1.3 数据分析 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 不同基质配比对香雪兰营养生长的影响 |
4.2.2 不同基质配比对香雪兰开花性状的影响 |
4.2.3 不同基质配比对香雪兰开花率的影响 |
4.2.4 不同基质配比对香雪兰球茎发育的影响 |
4.3 结论与讨论 |
第五章 生物肥和缓释肥对香雪兰生长发育的影响 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 试验材料 |
5.1.2 试验方法 |
5.1.3 统计分析 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 海中宝对香雪兰生长发育的影响的影响 |
5.2.2 奥绿肥对香雪兰生长发育的影响 |
5.3 讨论 |
5.3.1 海中宝对香雪兰生长发育的影响 |
5.3.2 奥绿肥对香雪兰生长发育的影响 |
第六章 植物生长调节剂对香雪兰生长发育的影响 |
6.1 材料与方法 |
6.1.1 试验材料 |
6.1.2 试验方法 |
6.1.3 统计分析 |
6.2 结果与分析 |
6.2.1 水杨酸对香雪兰生长发育的影响 |
6.2.2 茉莉酸甲酯对香雪兰生长发育的影响 |
6.3 讨论 |
6.3.1 水杨酸对香雪兰生长发育的影响 |
6.3.2 茉莉酸甲酯对香雪兰生长发育的影响 |
第七章 结论与展望 |
7.1 主要研究结论 |
7.1.1 基于形态特征的香雪兰种质资源评价 |
7.1.2 利用RAPD技术对香雪兰种质资源的评价 |
7.1.3 不同基质配比对香雪兰生长发育的影响 |
7.1.4 海藻肥追肥及奥绿缓释肥对香雪兰生长发育的影响 |
7.1.5 水杨酸及茉莉酸甲酯对香雪兰生长发育的影响 |
7.2 展望 |
参考文献 |
附录1 35 个香雪兰品种图片 |
附录2 其他引物扩增结果 |
致谢 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 |
(3)老鸦瓣种质资源遗传多样性及其药材品质评价研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符号及缩略语说明 |
前言 |
第一章 文献综述 |
第一节 老鸦瓣及光慈姑研究概况 |
1 老鸦瓣系统分类 |
2 光慈姑本草考证 |
3 老鸦瓣生物学特性 |
4 老鸦瓣人工栽培技术 |
5 老鸦瓣组织培养 |
6 光慈姑品质评价 |
第二节 药用植物遗传多样性研究 |
1 遗传多样性概念 |
2 药用植物遗传多样性研究方法 |
2.1 形态标记技术研究 |
2.2 细胞学标记技术研究 |
2.3 生化及生理标记技术研究 |
2.4 分子标记技术研究 |
第三节 中药质量评价研究现状 |
1 基于化学成分的含量测定方法 |
2 指纹图谱与化学模式识别用于中药质量控制与评价 |
3 中药谱效整合指纹谱研究 |
第二章 老鸦瓣种质资源调查及其生态因子分析 |
1 材料与方法 |
1.1 材料与试剂 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 老鸦瓣种质资源地理分布 |
2.2 老鸦瓣种群特征分析 |
2.3 土壤理化性质分析 |
2.4 土壤有机质及无机元素相关性分析 |
2.5 土壤有机质及无机元素主成分分析 |
2.6 地理及气候因子主成分分析 |
3 讨论 |
3.1 老鸦瓣种质资源分布 |
3.2 生态因子对老鸦瓣分布的影响 |
3.3 生态因子对老鸦瓣繁殖体系的影响 |
第三章 老鸦瓣种质资源表型多样性研究 |
第一节 老鸦瓣植株形态多样性研究 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
1.3 数据分析 |
2 结果与分析 |
2.1 老鸦瓣形态性状变异 |
2.2 形态性状间相关分析 |
2.3 形态特征主成分分析 |
2.4 形态性状与地理气候因子相关性分析 |
3 讨论 |
3.1 老鸦瓣形态变异多样性 |
3.2 老鸦瓣形态性状与地理气候因子相关性分析 |
第二节 老鸦瓣花粉形态多样性分析 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 老鸦瓣花粉大小及形态特征 |
2.2 老鸦瓣花粉萌发沟特征 |
2.3 老鸦瓣花粉外壁纹饰特征 |
2.4 老鸦瓣花粉形态特征主成分分析 |
2.5 老鸦瓣花粉特征综合分析 |
3 讨论 |
3.1 老鸦瓣花粉形态变异特征 |
3.2 老鸦瓣花粉形态特征演化规律 |
第四章 老鸦瓣种质资源分子遗传多样性研究 |
第一节 基于ISSR及SRAP的老鸦瓣种质遗传多样性研究 |
1 材料与方法 |
1.1 材料与仪器 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 ISSR-PCR反应体系正交试验 |
2.2 dNTP浓度对ISSR-PCR的影响 |
2.3 Mg~(2+)浓度对ISSR-PCR的影响 |
2.4 退火温度对ISSR-PCR的影响 |
2.5 循环次数对ISSR-PCR的影响 |
2.6 最佳体系建立 |
2.7 引物筛选及样品分析 |
2.8 居群遗传多样性分析 |
2.9 居群间遗传变异分析 |
2.10 聚类分析 |
2.11 主坐标分析 |
2.12 遗传距离与地理距离Mantel分析 |
2.13 遗传多样性与地理气候因子相关性分析 |
2.14 ISSR与SRAP分析结果比较 |
3 讨论 |
3.1 ISSR标记特性分析 |
3.2 SRAP标记特性分析 |
3.3 老鸦瓣种质资源遗传多样性 |
3.4 老鸦瓣居群遗传结构与分化 |
3.5 老鸦瓣野生资源保护与开发利用 |
第二节 老鸦瓣DNA序列分析 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 老鸦瓣ITS2序列多态性分析 |
2.2 老鸦瓣matK序列多态性分析 |
2.3 不同居群老鸦瓣系统发育分析 |
2.4 遗传距离与地理距离Mantel分析 |
2.5 ITS2与matK序列比较分析 |
2.6 ITS2与matK序列的Mantel分析 |
2.7 ITS2与matK序列综合分析 |
3 讨论 |
3.1 DNA序列遗传变异 |
3.2 老鸦瓣居群系统发育分析 |
3.3 matK与ITS2序列比较及综合分析 |
3.4 老鸦瓣遗传资源现状与保护策略 |
第三节 DNA条形码对老鸦瓣物种鉴定研究 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 序列扩增及测序结果分析 |
2.2 psbA-trnH序列分析 |
2.3 rbcL序列分析 |
2.4 matK序列分析 |
3 讨论 |
3.1 psbA-trnH序列分析结果 |
3.2 rbcL序列分析结果 |
3.3 matK序列分析结果 |
第五章 光慈姑品质评价研究 |
第一节 光慈姑多糖的含量测定方法及其品质评价 |
1. 材料与仪器 |
1.1 材料与试药 |
2. 方法与结果 |
2.1 对照品溶液的配制 |
2.2 供试品溶液的制备 |
2.3 测定法 |
2.4 检测波长的选择 |
2.5 光慈姑多糖提取方法比较 |
2.6 方法学考察 |
2.7 样品测定 |
2.8 光慈姑多糖含量与地理气候因子的相关性分析 |
3. 讨论 |
3.1 光慈姑多糖提取方法 |
3.2 光慈姑多糖含量差异 |
第二节 基于近红外光谱光慈姑多糖定量及模式识别分析 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 仪器与试剂 |
1.3 光慈姑多糖含量测定 |
1.4 NIR图谱采集 |
1.5 数据处理 |
2 结果与分析 |
2.1 光慈姑近红外光谱库的建立 |
2.2 定量建模的建立 |
2.3 定量模型波段的优化 |
2.4 模型验证及样品分析 |
2.5 基于NIRS的定性模型建立 |
3 讨论 |
3.1 光慈姑多糖的NIR定量分析 |
3.2 光慈姑NIR的定性分析 |
第三节 不同产地光慈姑无机元素含量分析 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 仪器与试剂 |
1.3 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 无机元素测定结果 |
2.2 无机元素之间相关性分析 |
2.3 主成分分析 |
3 讨论 |
第四节 基于近红外光谱的光慈姑无机元素定量分析 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 仪器与试剂 |
1.3 光慈姑无机元素含量测定 |
1.4 NIR图谱采集 |
1.5 数据处理 |
2 结果与分析 |
2.1 元素及模型选择 |
2.2 光慈姑近红外光谱库的建立 |
2.3 定量模型的建立 |
2.4 定量模型的建立及验证 |
3 讨论 |
全文结论 |
论文创新点与不足之处 |
参考文献 |
附图 |
攻读博士期间发表论文情况 |
致谢 |
(4)葱属作物遗传多样性研究进展(论文提纲范文)
1 遗传多样性研究意义和方法 |
2 葱属作物遗传多样性研究进展 |
2.1 形态学水平的表型多样性研究 |
2.2 生化水平同功酶多样性研究 |
2.3 分子水平DNA多态性研究 |
2.3.1 ISSR标记 |
2.3.2 SSR标记 |
2.3.3 AFLP标记 |
3 展望 |
(5)分蘖洋葱种质资源遗传多样性的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
1 引言 |
1.1 研究的目的与意义 |
1.2 国内外研究动态和趋势 |
1.2.1 遗传多样性研究的意义 |
1.2.2 遗传多样性检测方法 |
1.2.3 葱属作物遗传多样性研究进展 |
2 材料与方法 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 分蘖洋葱材料 |
2.1.2 化学试剂 |
2.1.3 仪器设备 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 田间农艺性状调查 |
2.2.2 植株基因组 DNA 提取 |
2.2.3 DNA 提取结果检测 |
2.2.4 ISSR 标记分析 |
2.2.5 SSR 标记分析 |
2.2.6 AFLP 分子标记分析 |
2.2.7 数据处理 |
3 结果与分析 |
3.1 农艺性状 |
3.2 DNA 提取结果 |
3.3 ISSR 标记分析 |
3.3.1 ISSR 引物筛选结果 |
3.3.2 ISSR 引物多态性分析 |
3.3.3 ISSR 标记聚类分析 |
3.4 SSR 标记分析 |
3.4.1 SSR 引物筛选结果 |
3.4.2 SSR 引物多态性分析 |
3.4.3 SSR 标记聚类分析 |
3.5 AFLP 标记分析 |
3.5.1 酶切与连接结果 |
3.5.2 预扩增 |
3.5.3 选择性扩增引物筛选结果多态性分析 |
3.5.4 引物多态性分析 |
3.5.5 聚类分析 |
4 讨论 |
4.1 ISSR、AFLP 及 SSR 标记多态性引物的筛选 |
4.2 ISSR、AFLP 及 SSR 的扩增效率及多态性 |
4.3 不同标记方法的聚类结果 |
4.4 分蘖洋葱遗传多样性研究中分子标记方法的选择 |
4.5 分蘖洋葱的亲缘关系分析 |
5 结论 |
致谢 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
(6)观赏芍药部分新种质SSR遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
目录 |
1 引言 |
1.1 植物遗传多样性研究概述 |
1.1.1 遗传多样性的概念与研究意义 |
1.1.2 遗传多样性研究的方法 |
1.2 芍药属种质资源遗传多样性研究进展 |
1.2.1 形态水平 |
1.2.2 细胞水平 |
1.2.3 生理生化水平 |
1.2.4 分子水平 |
1.3 芍药属微卫星开发及指纹图谱构建 |
1.4 本研究的目的意义和技术路线 |
1.4.1 本研究的目的意义 |
1.4.2 本研究的技术路线 |
2 芍药SSR分子标记的引物开发和通用性研究 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 植物材料 |
2.1.2 实验药剂 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 基因组DNA的提取 |
2.2.2 酶切处理 |
2.2.3 接头连接 |
2.2.4 Dynabead磁珠富集SSR序列的DNA片段 |
2.2.5 连接质粒载体并转化 |
2.2.6 白斑筛选及PCR检测 |
2.2.7 测序 |
2.2.8 序列分析及引物设计 |
2.2.9 引物扩增 |
2.2.10 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 DNA的提取 |
2.3.2 酶切结果 |
2.3.3 连接产物PCR检测 |
2.3.4 磁珠富集SSR序列的DNA片段琼脂糖检测 |
2.3.5 菌液PCR检测 |
2.3.6 序列分析及引物设计 |
2.3.7 PCR体系及退火温度优化 |
2.3.8 多态性引物的筛选 |
2.4 小结与讨论 |
2.4.1 DNA的提取 |
2.4.2 重复基元 |
2.4.3 磁珠富集效率 |
3 芍药新种质SSR标记的遗传多样性分析 |
3.1 实验材料 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 DNA的提取 |
3.2.2 荧光SSR标记 |
3.2.3 数据处理 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 荧光引物检测 |
3.3.2 微卫星位点的遗传多样性分析 |
3.3.3 芍药遗传多样性分析和聚类分析 |
3.3.4 主成分分析 |
3.4 小结与讨论 |
3.4.1 荧光SSR分子标记的适用性 |
3.4.2 用同物异名”或观赏性状相似的品种 |
3.4.3 聚类分析与主成分分析一致性问题 |
3.4.4 地理来源与遗传背景的关系 |
4 基于SSR标记的芍药品种指纹图谱构建 |
4.1 实验材料 |
4.2 实验方法 |
4.2.1 特征引物的筛选 |
4.2.2 数据处理 |
4.3 结果与分析 |
4.4 小结与讨论 |
5 结论与讨论 |
5.1 结论 |
5.2 讨论 |
5.2.1 扩大样本数量,增加标记方法与种类 |
5.2.2 近缘物种SSR标记筛选 |
5.2.3 形态学和SSR分子标记的结合 |
5.2.4 构建不同倍性芍药细胞学鉴定技术体系 |
5.2.5 完善芍药指纹图谱系统 |
5.2.6 芍药种质资源的连锁遗传图谱构建 |
附图 |
参考文献 |
个人简介 |
导师简介 |
致谢 |
(8)新疆大蒜种质资源鉴定及规范化种植研究(论文提纲范文)
中英文缩略词对照表 |
摘要 |
ABSTRACT |
前言 |
第一部分 大蒜种质资源RAPD 遗传多样性分析 |
1 研究内容与方法 |
1.1 材料、试剂与仪器 |
1.2 实验方法 |
2 结果 |
2.1 基因组DNA 的提取及质量与浓度检测 |
2.2 PCR 反应条件与反应程序的确定 |
2.3 随机引物的筛选 |
2.4 大蒜RAPD 遗传多样性分析 |
3 讨论 |
3.1 基因组DNA 提取方法的选择 |
3.2 分子标记技术RAPD 的可靠性 |
3.3 与相关文献报道的比较 |
4 小结 |
第二部分 不同品种大蒜化学组分分析 |
一、不同品种大蒜中活性成分比较分析 |
1 研究内容与方法 |
1.1 材料、试剂与仪器 |
1.2 实验方法 |
2 结果 |
2.1 色谱分离与分析 |
2.2 含水量测定 |
2.3 蒜氨酸含量测定 |
2.4 潜在大蒜辣素含量测定 |
2.5 聚类分析 |
3 讨论 |
3.1 蒜氨酸的含量测定 |
3.2 潜在大蒜辣素的含量测定 |
3.3 鲜蒜水分测定 |
3.4 含量测定结果的统计分析 |
3.5 与分子标记鉴定结果的比较 |
4 小结 |
二、不同品种大蒜红外光谱指纹图谱比较分析 |
1 研究内容与方法 |
1.1 材料、试剂与仪器 |
1.2 实验方法 |
2 结果 |
2.1 方法学考察 |
2.2 大蒜FTIR 指纹图谱 |
2.3 样品FTIR 谱图快速比较 |
2.4 数据处理与统计分析 |
3 讨论 |
4 小结 |
三、不同品种大蒜高效薄层色谱指纹图谱比较分析 |
1 研究内容与方法 |
1.1 材料、试剂与仪器 |
1.2 实验方法 |
2 结果 |
2.1 色谱条件的优化筛选 |
2.2 方法学考察 |
2.3 薄层色谱指纹图谱及技术参数 |
2.4 大蒜药材薄层色谱指纹图谱的相似度分析 |
3 讨论 |
4 小结 |
第三部分 不同品种大蒜的显微鉴别 |
1 研究内容与方法 |
1.1 材料、试剂与仪器 |
1.2 实验方法 |
2 结果 |
2.1 大蒜石蜡切片制作工艺的确定 |
2.2 不同品种大蒜石蜡切片显微鉴别 |
3 讨论 |
4 小结 |
第四部分 大蒜规范化种植初步研究 |
一、大蒜种植基地环境质量评价 |
1 研究内容与方法 |
1.1 种植基地概况及主要仪器与试剂 |
1.2 实验方法 |
2 结果 |
2.1 种植基地灌溉水环境质量监测与评价 |
2.2 种植基地土壤环境质量监测与评价 |
2.3 种植基地空气环境质量监测与评价 |
2.4 大蒜中微量元素含量 |
3 讨论 |
4 小结 |
二、大蒜活性成分动态检测 |
1 研究内容与方法 |
1.1 材料、试剂与仪器 |
1.2 实验方法 |
2 结果 |
2.1 含水量变化 |
2.2 蒜氨酸含量变化 |
2.3 潜在大蒜辣素含量变化 |
3 讨论 |
4 小结 |
三、大蒜药材质量标准(草案)的修订 |
1 研究内容与方法 |
1.1 材料、试剂与仪器 |
1.2 实验方法 |
2 结果 |
2.1 薄层色谱鉴别 |
2.2 检查 |
2.3 蒜氨酸含量测定 |
3 讨论 |
4 小结 |
四、大蒜规范化种植操作规程(草案) |
1 主要内容与适用范围 |
1.1 主要内容 |
1.2 适用范围 |
2 引用标准 |
3 生态环境 |
3.1 地理位置 |
3.2 气候概况 |
3.3 土壤概况 |
3.4 水资源及水质概况 |
3.5 生态环境质量现状评价 |
4 种质特性 |
4.1 种质来源 |
4.2 形态特征 |
4.3 生育特性 |
4.4 生态适应性 |
5 栽培技术 |
5.1 播前准备 |
5.2 播种 |
5.3 田间管理 |
5.4 病虫害防治 |
6 采收、加工、贮藏与包装运输 |
6.1 采收 |
6.2 加工 |
6.3 留种 |
6.4 贮藏 |
6.5 包装 |
6.6 运输 |
7 实施栽培技术的成效 |
8 大蒜药材质量标准(草案) |
结论 |
创新 |
不足 |
展望 |
致谢 |
参考文献 |
附录 |
综述 |
参考文献 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 |
攻读博士学位期间承担的科研项目 |
个人简历 |
导师评阅表 |
(9)大蒜种质亲缘关系的形态学和分子标记研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 我国大蒜种质资源的现状 |
1.1.1 概述 |
1.1.2 大蒜种质资源的分类和育种现状 |
1.1.3 大蒜种质资源的分子标记现状 |
1.2 分子标记的分类和发展 |
1.2.1 分子标记技术的分类 |
1.2.2 分子标记技术的发展 |
1.3 分子标记技术的应用 |
1.3.1 遗传图谱的构建和基因定位研究 |
1.3.2 基于图谱克隆基因 |
1.3.3 物种亲缘关系和系统分类 |
1.3.4 用于疾病诊断和遗传病连锁分析 |
1.4 分子标记的展望 |
1.5 SSR标记及其在蔬菜育种中的应用 |
1.5.1 SSR标记 |
1.5.2 SSR标记在蔬菜育种中的应用 |
1.6 SRAP标记及其研究进展 |
1.6.1 SRAP标记 |
1.6.2 SRAP标记的研究进展 |
1.7 本研究的目的和意义 |
第二章 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 供试材料 |
2.1.2 试剂和仪器 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 样品的种植及农艺性状调查 |
2.2.2 DNA提取与分离 |
2.2.3 体系的优化 |
2.2.4 引物筛选 |
2.2.5 PCR扩增和电泳 |
2.2.6 制胶、电泳及银染 |
2.2.7 条带统计及聚类分析 |
第三章 结果与分析 |
3.1 农艺学性状数据聚类分析 |
3.1.1 农艺性状在各种质间的分布 |
3.1.2 农艺性状的聚类分析 |
3.2 大蒜种质遗传多样性的SRAP鉴定与分类研究 |
3.2.1 SRAP多态性分析 |
3.2.2 SRAP遗传相似性分析 |
3.2.3 SRAP聚类分析 |
3.3 大蒜种质遗传多样性的SSR鉴定与分类研究 |
3.3.1 SSR体系优化结果 |
3.3.2 SSR多态性分析 |
3.3.3 SSR遗传相似性分析 |
3.3.4 SSR聚类分析 |
3.3.5 SRAP和SSR聚类结果的比较 |
3.4 SRAP和SSR标记在大蒜种质分类中的综合利用 |
第四章 讨论 |
4.1 大蒜种质资源的形态标记多样性分析 |
4.2 大蒜种质资源的SRAP标记遗传多样性分析 |
4.3 大蒜种质资源的SSR标记遗传多样性分析 |
4.4 大蒜种质资源的SRAP和SSR两种分子标记遗比较分析 |
4.4.1 SRAP和SSR信息获取量的比较 |
4.4.2 SRAP和SSR综合后聚类结果的比较 |
第五章 结论 |
5.1 依据形态性状的大蒜亲缘关系鉴定 |
5.2 依据SRAP的大蒜亲缘关系鉴定 |
5.3 依据SSR的大蒜亲缘关系鉴定 |
5.4 两种分子标记聚类结果的比较 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(10)60Co-γ射线对切花菊试管苗的辐射诱变效应研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略词 |
引言 |
第一章 文献综述 |
1 辐射诱变育种研究进展 |
1.1 辐射源、材料和剂量的选择 |
1.2 辐射诱变机理的研究 |
1.3 辐射诱变后代鉴定 |
2 辐射诱变与组织培养结合育种研究进展 |
2.1 组培与辐射诱变结合育种的优缺点 |
2.2 辐射诱变与组织培养结合的方式 |
2.3 两者结合的注意事项 |
3 辐射诱变在菊花育种中的研究进展 |
3.1 菊花育种中存在的问题 |
3.2 菊花辐射育种进展 |
3.3 展望 |
4 本研究的目的和内容 |
第二章 辐射对2个切花菊品种试管苗组培过程的诱变效应 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 辐射对茎段腋芽发生率的影响 |
2.2 辐射对茎段及叶片愈伤组织诱导及分化的影响 |
3 讨论 |
第三章 辐射对2个切花菊试管苗M1代主要性状的诱变效应 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 辐射对M1代定量性状变异的影响 |
2.2 辐射对M1代定性性状变异的影响 |
3 讨论 |
第四章 辐射后代减数分裂异常行为观察 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 ‘长紫’辐射变异后代减数分裂异常行为观察 |
2.2 ‘神马’辐射变异后代减数分裂异常行为观察 |
3 讨论 |
第五章 辐射后代ISSR遗传变异分析 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 ISSR扩增结果 |
2.2 辐射后代基因组变异情况 |
3 讨论 |
全文结论 |
参考文献 |
攻读学位期间发表的论文及获奖情况 |
致谢 |
四、中国大蒜(Allium sativum L.)18个品种的酯酶同工酶多态性分析(论文参考文献)
- [1]基于SRAP和TRAP标记的新疆10种野生葱蒜的遗传多样性[D]. 王丹丹. 新疆农业大学, 2018
- [2]香雪兰种质资源评价及其调控技术的研究[D]. 晏姿. 上海交通大学, 2017(08)
- [3]老鸦瓣种质资源遗传多样性及其药材品质评价研究[D]. 马宏亮. 南京农业大学, 2014(08)
- [4]葱属作物遗传多样性研究进展[J]. 吴凤芝,金雪. 东北农业大学学报, 2014(01)
- [5]分蘖洋葱种质资源遗传多样性的研究[D]. 金雪. 东北农业大学, 2013(10)
- [6]观赏芍药部分新种质SSR遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建[D]. 季丽静. 北京林业大学, 2013(11)
- [7]48份分蘖洋葱种质资源遗传多样性的ISSR标记和农艺性状分析[J]. 金雪,周新刚,刘守伟,刘淑芹,吴凤芝. 中国蔬菜, 2013(02)
- [8]新疆大蒜种质资源鉴定及规范化种植研究[D]. 关明. 新疆医科大学, 2011(06)
- [9]大蒜种质亲缘关系的形态学和分子标记研究[D]. 周静. 西北农林科技大学, 2011(05)
- [10]60Co-γ射线对切花菊试管苗的辐射诱变效应研究[D]. 邢莉莉. 南京农业大学, 2009(S1)